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1、新生鼠脑损伤后神经蛋白聚糖的变化【摘要】目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后脑内神经蛋白聚糖的动态变化,探讨神经可塑性相关抑制因素在发育期脑损伤后的改变。方法7d龄SD大鼠随机分为假手术组和HIBD组,于脑缺氧缺血术后1,4,7,14,28d分别取脑组织进行H-E染色和免疫组织化学染色观察组织病理变化及神经蛋白聚糖蛋白表达,并以RT-PCR法检测其mRNA表达。结果假手术组神经蛋白聚糖的表达于术后7d达到高峰(P<0.05),此后阳性表达逐渐减少;HIBD组术后4d、7d的神经蛋白聚糖蛋白及其mRNA表达均低于假手术组(P<0.05),
2、至术后14d、28d表达增高,均高于假手术组(P<0.05)。结论新生大鼠HIBD后脑组织神经蛋白聚糖蛋白及其mRNA表达随着时间推移发生变化,提示HIBD后神经可塑性调控的关键时期为损伤后2周内。【关键词】缺氧缺血,脑;蛋白聚糖类;大鼠;软骨素硫酸盐类;动物,新生;疾病模型,动物ABSTRACT:ObjectiveToobservethechangeofneurocaninneonatalratbrainsafterhypoxia-ischemiabraindamage(HIBD),andexplorethechangeofinhibitoryfac
3、torsneuronalplasticityassociatedage.Methods7daysneonateSDratslydividedintosham-operatedgroupandHIBDgroup.Thenat1,4,7,14,28daysaftertheoperation,dissectthebrainandtheexpressionofneurocanerasechainreaction(RT-PCR)andimmunohistochemicalmethodrespectively.ResultsTheamountofneurocanreac
4、hedapeaklevelafter7daysoftheoperationinsham-operatedbrains(P<0.05),thenreduced.ExpressionofneurocaninHIBDbrainsat4,7daysaftertheoperation-operatedbrains(P<0.05),-operatedbrainsat14,28daysaftertheoperation(P<0.05).ConclusionTheexpressionofneurocanisdifferentintheprogressofn
5、eonatalHIBDandthebesttimeforcontrollingneuronalplasticityassociatedinhibitoryfactorsisiabrain;proteoglycans;rats;chondroitinsulfates;animal,neodels,animal新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemicbraindamage,HIBD)是儿童神经系统伤残的常见原因,存活者常遗留智力低下、脑性瘫痪等神经系统后遗症。虽然脑损伤神经本身具有可塑性,但由于受到环境因素和抑制因素的影响,其再生往往不如周围神经
6、容易。近来研究发现，神经蛋白聚糖是影响脑损伤神经可塑性的一种抑制蛋白,但其在发育期脑损伤中变化的报道少见。本实验模拟新生儿HIBD建立动物模型,观察损伤后不同时间段神经蛋白聚糖的表达,探讨脑神经可塑性相关抑制因素在发育期脑损伤后的改变,为指导发病后促进脑神经修复的临床治疗提供实验依据。1材料与方法1.1动物分组及HIBD模型建立选择新生7d龄健康SD大鼠(福建省医学科学研究所),雌雄不限,体质量11～17g。按1∶1随机分为HIBD组和假手术组,参照2.3脑组织神经蛋白聚糖mRNA的表达脑组织神经蛋白聚糖mRNA表达情况见表2。假手术组术后1d阳性条带较弱,
7、4，7d阳性条带明显增亮,14，28d阳性条带较前减弱。HIBD组术后1d条带模糊,4，7d阳性条带弱于同期假手术组,14，28d神经蛋白聚糖mRNA表达强于同期假手术组(图3)。HIBD:缺氧缺血性脑损伤.A:假手术组；B～D:HIBD组;A:脑组织结构层次清晰,细胞轮廓正常,核居中,核仁清楚；B:术后4d,左侧大脑大片坏死,细胞溶解、消失,可见“鬼影细胞”;C:7d胶质细胞增生,细胞核固缩、破裂;D:14d胶质细胞大量增生形成胶质瘢痕.表1大鼠脑组织神经蛋白聚糖免疫组织化学阳性产物校正累积光密度n＝5.HIBD:缺氧缺血性脑损伤.与假手术组术后其他时间比
8、较,☆:P<0.05;与同期假手术组比较,△:
