复方贞术调脂胶囊水提液精制方法研究

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1、复方贞术调脂胶囊水提液精制方法研究【摘要】目的优选复方贞术调脂胶囊水提液精制方法。方法以总酚酸、总多糖、丹酚酸B含量及总固体得率为指标,比较壳聚糖絮凝法、超滤法和水醇法三种精制方法对复方贞术调脂胶囊水提液的精制效果。结果采用壳聚糖絮凝法进行精制,水提液中丹酚酸B、总多糖及总酚酸转移率较高,分别为90.37%,93.16%,94.39%,总固体得率为31.5%。结论壳聚糖絮凝法工艺简单,有效成分转移率较高,可用于复方贞术调脂胶囊水提液的精制。【关键词】复方贞术调脂胶囊;超滤法;壳聚糖絮凝法;水醇法  Abstra

2、ct:ObjectiveTooptimizethepurificationprocedureoftheactiveponentsofpoundZhenzhutiaozhicapsule.MethodsChitosan,ixtureandultrafiltrationple,ixture  复方贞术调脂胶囊由女贞子、丹参、白术、佛手等中药组成,具有调肝降脂、健脾补肾、祛瘀解毒功效,用于治疗高脂血症,疗效显著。前期研究结果显示,丹参、白术、佛手中水溶性组分具有调节血脂,抗脂质过氧化,抗动脉粥样硬化等作用[1-3]。

3、因此,丹参、白术、佛手等药材以水为提取溶剂进行提取。但在有效成分被提取出的同时,大量水溶性杂质也被提出。为去除杂质,富集有效成分,提高制剂的稳定性,本文以丹酚酸B、总酚酸、总多糖含量及总固体得率为指标,优选复方贞术调脂胶囊水提液的精制方法。  1仪器与试药  1.1仪器  DIONEXultimate3000(美国);UV1101型分光光度计(上海天美);RE52AA旋转蒸发器(上海嘉鹏科技有限公司);BS423S型电子分析天平(北京赛多利斯);KQ250型医用超声波清洗机(昆山超声仪器有限公司,功率25

4、0illipore,SD239/P34409)。  1.2试剂    原儿茶醛对照品(110810200205,供含量测定用),丹酚酸B对照品(111562200706,供含量测定用)均购自中国药品生物制品检定所。乙腈、甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯。  2方法与结果  2.1样品溶液的制备  2.1.1原液  按处方量称取丹参、白术、佛手等药材,加入7倍量的水,提取3次,每次1h。合并提取液,滤布(50μm)滤过,浓缩,定容至3000mL,作为样品溶液Ⅰ。  2.1.2水提醇沉法  精密量取样品溶液Ⅰ1

5、00mL,浓缩至50mL(每毫升药液含1.0g生药),加入乙醇使含醇量达50%,静置,冷藏24h,滤过,滤液减压回收乙醇,加水定容至250mL,作为样品溶液Ⅱ。  2.1.3壳聚糖絮凝法  精密量取样品溶液Ⅰ100mL,加水稀释至250mL,加入30mL壳聚糖醋酸溶液(称取壳聚糖1g,加入2%的醋酸溶液100mL,搅拌,静置24h,备用),搅匀,静置24h,离心,取上清液,加水定容至250mL,作为样品溶液Ⅲ。  2.1.4超滤法  精密量取样品溶液Ⅰ100mL,加水稀释至药液浓度0.05g/mL,在120kP

6、a压力下,采用截留分子量为50k的超滤膜滤过,滤液浓缩并定容至250mL,作为样品溶液Ⅳ。  2.2总多糖含量测定  2.2.1葡萄糖标准曲线的绘制  精密称取干燥至恒重的无水葡萄糖0.0556g,加水溶解并定容于50mL量瓶中,制成每1mL含1.112mg的溶液,作为对照品溶液。分别精密吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL至50mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密吸取上述各浓度溶液2mL,分别加入2%苯酚溶液1mL,摇匀,迅速加入浓硫酸5mL,摇匀,静置5min,至沸水浴中加热15min,取出

7、,快速用冷水冷却至室温。以水为空白,同样显色操作制备空白对照,于紫外可见分光光度计490nm波长处测其吸光度。以葡萄糖毫克数为横坐标,以吸光度为纵坐标,得回归方程Y=2.8122X+0.1406,r=0.9993。葡萄糖在0.02224~0.13344mg范围内与吸光度呈良好线性关系。  2.2.2供试品溶液制备  分别精密量取样品溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各100mL,加乙醇使含醇量达85%,静置,滤过,滤渣分别用无水乙醇、丙酮洗涤,干燥,加水溶解并定容至25mL,分别作为供试品溶液1、2、3、4。  2.2.3稳定

8、性考察  精密量取供试品溶液Ⅰ100μL,置25mL刻度试管中,按“2.2.1”项下方法操作,测定吸光度,然后每隔30min测定1次(n=6),150min内吸光度基本不变,表明供试品在150min内基本稳定。  2.2.4含量测定  精密量取供试品溶液1、2、3、4各100μL,置25mL试管中,按“2.2.1”项下方法操作,测定吸光度,计算总多糖含量及转移率(见表1)。  2.3总

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