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时间:2018-11-23
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1、蜂胶提取物对荷瘤小鼠肿瘤免疫系统的影响研究【关键词】蜂胶提取物;,,小鼠;,,免疫功能 摘要:目的观察蜂胶提取物对荷瘤小鼠免疫系统的影响。方法通过将荷瘤小鼠移植S180肉瘤,观察蜂胶提取物对荷瘤小鼠NK细胞活性,淋巴细胞增殖以及淋巴细胞IL2诱生的影响。结果蜂胶提取物对NK细胞杀伤活性有明显增强作用,能够显著提高淋巴细胞增殖能力和IL2的含量(P<0.01)。结论蜂胶提取物能够显著提高荷瘤小鼠免疫系统的活性。 关键词:蜂胶提取物;小鼠;免疫功能 EffectofEthanolExtractfromPropolisonCellIm
2、munityofTumorbearingMice PANMing (DepartmentofBioengineering,SichuanInstituteofScienceandTechnology,Zigong643000,China) Abstract:ObjectiveTostudytheinfluenceofethanolextractfrompropolisoncelularimmunityofmicebearingtumor.MethodsEffectofethanolextractfrompropolisonNKc
3、ellsreactive,lymphocyteproliferationandlymphocyteIL2luredhealthoftumorbearingmicetumorbearingmice.ResultsEthanolextractfrompropoliscouldstrengthenNKcellantireactive,increaselymphocyteproliferationandthecontentofIL2(P<0.01).ConclusionEthanolextractfrompropoliscansignific
4、antlyimprovetheimmunityactivityofmicebearingtumor. Keypropolis;Mice;Immunefunction 蜂胶是蜜蜂巢中的一种树脂状物质,含有多种化学成分,有研究者提出其中的黄酮类、槲皮素、多糖等具有抗肿瘤及免疫调节等功效[1~3]。在对其免疫增强作用的系统研究中发现,蜂胶提取物能够刺激免疫机能和丙种球蛋白活性,增加抗体生成量,增强巨噬细胞的吞噬能力,从而提高机体抵抗力、抑制癌细胞生长[4~8]。本实验对蜂胶提取物抗肿瘤及其作用机制进行了初步研究,现报告如下。 1材料与
5、方法 1.1材料 1.1.1动物昆明种标准小鼠,体重18~22g,雌雄各半,由四川大学动物实验中心提供;BalB/C纯种小鼠,体重18~22g,雌雄各半,由成都中医药大学动物中心提供。 1.1.2蜂胶提取物由本实验室制备,将蜂胶粗品用80%的乙醇提取,回收乙醇,浓缩而得。 1.1.3肿瘤细胞株S180肉瘤,经小鼠腹腔传代保种,由生命科学学院试验室提供。L929细胞,由生命科学学院实验室提供。 1.1.4主要试剂与仪器RPMI1640;小牛血清;胎牛血清;a甲基甘露糖苷(amm);刀豆蛋白A(ConA);Sigma产四甲基偶唑
6、蓝(MTT);CO2培养箱;酶标仪。 1.2实验方法[9]菌取传代6d的S180肉瘤细胞悬液,经生理盐水稀释后调细胞数至4×107/ml,每只小鼠腋下接种0.2ml,24h后随机分组:蜂胶提取物组小鼠每天按0.1ml/10g体重腹腔注射蜂胶提取物(15mg/ml),1次/d,连续7d,荷瘤模型组小鼠每天按0.1ml/10g体重腹腔注射生理盐水,环磷酰胺(CY)组小鼠每只每天腹腔注射环磷酰胺0.4mg/ml,途径、方法、次数同蜂胶提取物组,另设正常对照组小鼠注射生理盐水,途径、剂量、方法同荷瘤模型组,于接种肿瘤后第12天各组小鼠分别颈
7、椎处死取脾进行以下实验。 1.2.1NK细胞杀伤活性的测定小鼠脾脏NK细胞的获得:常规方法制备脾细胞,计数,调细胞数至1×107个/ml,即为备用的NK细胞。靶细胞:传代培养的L929细胞在试验时用0.25%胰蛋白酶消化1~2min,加完全1640培养液轻轻吹打细胞,离心将细胞重悬于含10%小牛血清的1640培养液中,调细胞数至2×105个/ml,即为备用的NK细胞的靶细胞。NK细胞活性的测定:取事先配好的靶细胞悬液加入96孔板中,0.1ml/孔,然后培养箱中培养1h,向每孔加入0.1ml效应细胞(使效靶比例50:1),靶细胞对照孔
8、加完全16400.1ml,各设4个复孔,再放入培养箱中培养20h,MTT法检测NK细胞活性。 杀伤率(%)=(靶细胞OD值-实验组OD值)靶细胞OD值×100% 1.2.2淋巴细胞增殖反应的测定常规制备1×107/m
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