肝脂平胶囊中芍药苷的提取工艺研究论文

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时间:2018-11-22

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1、肝脂平胶囊中芍药苷的提取工艺研究论文.freelizethepreparationprocessofpeoniflorininGanzhipingCapsules.MethodsTheoptimumpreparationprocessentasindexes.Thechieffactorsinfluencingtheextractionefficiencysachasthecontentofthetimesofaddedeofextractionandtimesofboilingumtechnicalconditionesamountofesandboi

2、ling1heachtime.ConclusionPeoniflorincontentethodisreliable.freelm×250mm,5μm);Mettler十万分之一电子分析天平;RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);超声波清洗器(华南超声设备厂);DZF-6020型真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司);芍药苷对照品均购自中国药品生物制品检定所;试剂均为分析纯。赤芍等购自武昌区药材公司,姜黄购自广西,经鉴定均为正品。2方法与结果2.1方法赤芍、海藻采取传统的水提工艺,以芍药苷为考察指标,影响提取率较大的因素可能有:加水量、提取次数

3、、提取时间、浸泡时间等。将浸泡时间和吸水量单独考虑,把加水量、提取次数、提取时间设置到正交水平表中,共有3个因素。各设3个水平,其因素水平设置见表1。表1赤芍、海藻水提因素水平(略)考虑各因素的交互作用,选用L9(34)进行正交实验。按处方比例,取赤芍饮片和海藻9份,每份50g,置1000ml圆底烧瓶中用可调温电热套加热回流提取,按表1中各实验号因素水平的要求进行处理,以干膏量和总干膏中芍药苷的含量为考察指标,结果见表2~4。2.2色谱条件色谱柱为ZorbaxSB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(

4、40∶65);流速1ml/min;检测波长230nm;柱温35℃;灵敏度0.08AUFS。2.3测试溶液的制备2.3.1对照品溶液的配制精密称取经P2O5减压干燥器中干燥36h的芍药苷对照品12.66mg于25ml容量瓶内,加甲醇20ml后超声处理20min使溶解,放至室温,加甲醇定容至刻度。2.3.2药材溶液的制备称取赤芍粗粉0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,称定重量。浸泡4h,超声处理20min,放至室温,再称定重量,用甲醇补足损失的重量,摇匀,滤过,即得。2.3.3供试品溶液的制备取赤芍和海藻提取的干膏适量,精密称定,置25

5、ml容量瓶内,精密加入甲醇20ml后超声20min使溶解,放至室温,加甲醇定容至刻度。进样前均用0.45μm微孔滤膜过滤。2.4标准曲线的制备用微量进样器分别取已配好的对照品溶液3,4,5,6,7,8μl注入高效液相色谱仪,测定峰面积,根据进样量和测得的峰面积计算标准曲线(附HPLC图1~3)。经计算得回归方程:Y=1990.2X-698.1(r=0.99999,n=6)。这一结果显示芍药苷的进样量与峰面积在1.519~4.051μg范围内具有良好的线性关系。2.5稳定性实验吸取供试品溶液,用20μl定量环间隔一定时间(2h)进样,连续测定5次。实验结果

6、表明,芍药苷在8h内基本稳定,记录各峰面积,RSD=2.04%。2.6精密度实验用20μl定量环进芍药苷对照品溶液,按上述色谱条件,重复进样5次,测定峰面积并计算其相对标准偏差,RSD=0.97%,结果表明精密度较好。2.7回收率实验采用加样回收法,取适量样品,加入芍药苷适量,按上述色谱条件测定,计算回收率。平均回收率为99.15%,RSD=2.53%。结果表明,本方法具有良好的回收率。2.8结果统计与分析结果统计见表2~4。从方差分析表和正交试验结果可以看到,三因素中,对干膏量的影响大小依次为CBA,且C3C2C1;B3B2B1;A3A2A1,其中仅C

7、因素对干膏量有显著影响(F=72.1055)。三因素对干膏中芍药苷总量的影响大小依次为CBA,且C3C2C1;B2B3B1;A3A2A1,其中仅C因素对芍药苷总量有显著影响(F=104.67)。故选定A、C因素的水平为A3、C3,对于B因素,在给定的水平条件下,虽无显著影响,但从节省能源、有效成分尽量提取充分的角度考虑,拟选定B因素的水平为B2。因此,从实际出发,综合考虑,选择的最佳提取工艺为A3B2C3。即10倍水,煎煮3次,1h/次。表2赤芍、海藻水提正交实验安排及结果(略)表3干膏量的方差分析(略)表4芍药苷含量的方差分析(略)2.9验证实验按最佳

8、工艺验证4批,所得药液同前法处理,测定,取4批的平均值,得干膏量12.7901g

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