高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与icam

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1、高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与ICAM王德明，刘艳阳，桂靖，常业恬，刘梅梅【摘要】目的：研究高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用与细胞间黏附分子（ICAM-1）的关系。方法：56只家兔随机分为3组：假手术对照组（P组）、缺血再灌注损伤组（IR组）、高氧液灌注组（HBO组）。分别取缺血危险区心肌，免疫组化法检测ICAM?的表达；检测匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量；计算心肌梗死面积。结果：HBO组、IR组SOD活性均较P组降低（均P0.05）；MDA含量则较

2、P组增加（均P0.05）。HBO组心肌梗死面积较IR组明显减小（P0.05）。ICAM-1的表达，IR组比HBO、P组都明显增高（均P0.05）。结论：高氧液处理可下调心肌缺血再灌注损伤时ICAM-1的表达，使SOD活性升高.freelyocardialischemiaandreperfusioninjuryofrabbits.Method:Fifty-sixfamilyrabbitsly.AnimalsexperiencedLDAocclusionfor60minutesischemiaandf

3、olloinutes.AnimalsingroupHBOreceivedhyperbaricoxygeninfusionbeforeischemiaandduringreperfusion.Themyocardialischemiaalltherabbitsseparately，ICAM-1munohistochemtry，theactivityofsuperoxidedismutase(SOD)andthecontentofmalondialdehyde(MDA)inhomogenatealle

4、ringroupHBOthanthatingroupIR（P0.05）.TheexpressionofICAM-1entdoyocardialischemiaandreperfusioninjuryofrabbits.Keyutase(SOD)；malondialdyde(MDA)；ICAM-1本研究采用兔心肌缺血再灌注模型，观察高氧液对心肌缺血再灌注损伤的保护作用与ICAM-1的关系，探讨适合临床应用的心肌保护措施。1材料和方法1.1材料实验动物家兔由中南大学实验动物部提供。GY?高氧医用液体治

5、疗仪（西安高氧设备有限公司）。MDA、SOD检测试剂盒（南京建成生物有限公司），ICAM?检测试剂盒（武汉博士德生物制剂公司），伊凡氏蓝、氯化三苯四唑(TTC)（美国Sigma公司）。1.2实验方法56只健康家兔，雌雄不拘，麻醉后经颈部正中气管切开插管，连接呼吸机行机械通气，监测动物心电图。经左侧3-4肋间开胸后暴露心脏，5-0无损伤缝线两次绕过冠状动脉左前分支近端心肌深面，两端套以胶管，拉紧胶管阻断相应冠状动脉，见心电图ST段上抬，心肌变青紫；放松套管见心肌恢复成阻断前颜色，ST段回到原来水平表

6、明心肌再灌注。1.3实验分组完成上述操作后稳定30min，将实验动物随机分为假手术组（P组）、缺血再灌注组（IR组）、高氧液处理组（HBO）组。P组完成前面的操作，不进行缺血及再灌注，HBO组在缺血前及再灌注期间以20mL·kg-1·h-1速度输注高氧液（乳酸林格氏液，氧分压600～750mmHg，O3含量10～20mg·L-1），其他组以20ml·kg-1·h-1速度输注生理盐水；除P组外，其他两组经60min缺血和120min的再灌注，整个实验过程中，维持相同液体输注速度。1.4观测指标在再灌

7、注0min、60min、120min，分别取IR组、HBO组家兔各8只阻断冠状动脉前降支，经主动脉根部注入4%伊凡氏蓝染色，保留缺血危险区心肌组织。取小块缺血区心肌以多聚甲醛固定24h，石蜡包埋切片。将缺血区心肌切成2mm薄片，浸泡在1%TTC缓冲液中，37℃水浴中孵化10min。见梗死的心肌组织呈苍白色，非梗死的心肌组织着色呈砖红色。按Ismaeil等1的方法测量并计算出缺血心肌重（g）、梗死心肌重（g）及心肌梗死面积（%）。1.5SOD、MDA测定取各组动物缺血危险区新鲜心肌组织于0℃下匀浆，

8、分别取0.1mL匀浆液，于液氮中保存，待所有动物实验结束后，按照试剂盒提供的操作说明一次性完成检测。1.6ICAM-1表达检测常规切片，按照免疫组化方法进行常规处理，在Olympus-BX51显微镜下观测结果。选择不同的视野照相，传至与之相连的电脑，进行图像分析，采用累计灰度值法计算各标本切片的阳性表达率。1.7统计学处理方法采用方差分析。2结果2.1心肌梗死面积占缺血面积的百分比与IR组（45.5±4.3）%相比，HBO组（25.2±4.2）%显著降低（P0.05）。2.2SOD