高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤生化指标和超微结构的影响论文

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1、高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤生化指标和超微结构的影响论文.freelalondi-aldyde;superoxidedismutase;endothelin;nitricoxideAbstract:AIMToobservetheprotectiveeffectsofhyper-oxicliquidonmyocardialischemia-reperfusioninjuryinrab┐bits.METHODSThirty-sixrabbitslydividedintothreegroups:groupAundergoingallprocedurese

2、xceptischemia-reperfusionandtreatment,groupBreceivingtheroutinetreatmentafterischemia-reperfusion,andgroupCre-ceivingtheroutinetreatmentinfusionofhyperoxicliquid10mLkg-1afterischemia-reperfusion.RESULTSGroupCshoyocardialMDAcontentsandplasmaETlevel(P0.01),butanincreaseinmyocar-d

3、ialT-SODactivityandserumNOlevel(P0.01).freelitigationinmyocardialultrastructuralinjuryinparisionyocardialischemiaandreperfusioninjuryinrab-bits.0引言心肌缺血性疾病是常见病、多发病,是威胁人类健康的主要疾病之一.近年来研究表明,钙超载和自由基是心肌缺血再灌注损伤的重要机制[1-4],因此针对性地对Ca2+拮抗剂和自由基清除剂进行了多方面的研究,取得了一定的效果.但引起心肌早期损害的直接因素是缺氧,如通过液体途

4、径给缺血心肌供氧,可能减轻缺血心肌的坏死程度,延长心肌的生存能力而产生一定的治疗作用.用家兔心肌缺血再灌注模型,观察最新研制的高氧液体对心肌的保护作用,并探讨与自由基的关系,为临床应用提供理论依据.1材料和方法1.1材料家兔由本校实验动物中心提供,高氧液用西安高氧医疗设备有限公司研制的“高氧医用液体治疗仪”制备,用量子化溶氧机制以临床常用液体(50gL-1葡萄糖,生理盐水或平衡盐液等)为载体,溶O2后可使PO2由150mmHg上升到750~975mmHg和含O3(10~20mgL-1)的高氧液体.超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒购自北京北方生物技术研究

5、所;丙二醛(MDA)试剂盒购自南京建成生物工程研究所;内皮素(ET)放免盒购自中国人民解放军总医院,一氧化氮(NO)试剂盒购自军事医学科学院.1.2实验方法健康家兔36只,雌雄不拘,体质量2.0~3.5kg,实验前禁食12h,30gL-1的戊巴比妥钠30mgkg-1耳静脉麻醉,气管切开并插管.以家兔开胸冠状动脉左室支结扎/放开为制造心肌缺血再灌注模型[5].将实验动物随机分为3组:(A组)非缺血对照组:完成全部操作,只穿线不结扎冠状动脉,观察90min;(B组)缺血再灌注常规治疗组:缺血60min,再灌注90min,用生理盐水10mLkg-1静脉滴注

6、,于左室支动脉结扎前10min静滴1/3量,再灌注时静滴2/3量;(C组)高氧液治疗组:按B的方法将生理盐水改为高氧液.1.3观察指标和测定方法实验结束时取冠状窦血4mL,2mL血立即分离血清,置-30℃保存以备集中检测NO,另2mL血加入含EDTA和抑肽酶的试管中,尽快在4℃3000rmin-1离心10min,取血浆置-30℃冰箱保存待测ET,具体测定步骤按放免试剂盒说明操作;实验结束后立即取左室壁心肌组织用4℃冷生理盐水洗去血迹,制成2mm×2mm×5mm的心肌组织块,用25mgL-1戊二醛固定作电镜标本,用透射电镜观察心肌细胞结构;余下心肌置液

7、氮中保存待测MDA及T-SOD,其测定步骤按试剂盒说明书进行.统计学处理:实验结果用x±s表示,组间均数比较用t检验,多个样本均数比较用单因素方差分析,均数间两两比较用t检验.2结果2.1三组心肌组织MDA含量及T┐SOD活性的变化由Tab1可见,B组MDA含量明显高于A组(P0.01),T-SOD活性明显低于A组(P0.05),C组与A组比较,各指标无显著性差异,与B组比较,C组MDA含量明显下降(P0.01),SOD活性明显增加(P0.01).2.2三组动物血浆ET和血清NO水平变化由Tab1可见C组ET水平显著低于B组(P0.01),而NO水平

8、显著高于B组(P0.01).表1高氧液对缺血再灌注心肌MDA,SOD,ET,NO的影响略2.3三组动物心肌组

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