hplc法测定复方益母口服液中水苏碱的含量论文

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1、HPLC法测定复方益母口服液中水苏碱的含量论文【摘要】目的建立高效液相色谱法测定复方益母口服液中水苏碱的含量。方法以KromasilC18(5μm，250mm×4.6mm)为色谱柱，乙腈0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液（体积比18∶82，pH值5.5）为流动相，流速1.0mL·min-1，柱温35℃，检测波长215nm，以外标法进行检测。结果水苏碱进样量在1.00～25.00μg范围内具有良好的线性关系.freelL·支-1，批号：2008211、2008423、2008512）；乙腈（色谱纯，江苏汉邦科技有限公司），水为二次

2、重蒸水，其他试剂均为分析纯（山东禹王化学试剂有限公司）。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱:KromasilC18(5μm，250mm×4.6mm，天津琛航科技仪器有限公司提供)；流动相:乙腈0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液（体积比18∶82，pH值5.5），流速:1.0mL·min-1，检测波长:215nm，柱温:35℃，进样量:10μL。2.2对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的水苏碱适量，置5mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得0.5mg·mL-1的对照品溶液［6］，摇匀，备用。2.3最大吸收波长的选择采用岛津

3、UV160紫外分光光度计，对甲醇配制的0.5mL·min-1的对照品溶液在200～400nm波长范围内进行扫描，于215nm处有一个最大吸收特征峰，故选择为检测波长。2.4阴性对照溶液的制备取不含益母草的阴性对照品，按生产厂家提供的生产工艺以及供试品溶液配制方法制备。2.5供试品溶液的制备与测定方法各批号复方益母口服液以0.45μm微孔滤膜过滤，弃去初滤液，分别精密量取续滤液2.0mL，置10mL容量瓶中，加入甲醇制成供试品溶液，进样10μL。同时取对照品溶液10μL进样，分别测定峰面积，按外标法计算样品的含量。2.6系统适用性试

4、验取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照液，分别进样，结果水苏碱的保留时间为6.075min，理论塔板数为6800，与相邻峰的分离度大于1.5，符合中国药典的规定。阴性对照图谱在水苏碱色谱峰的保留时间处无明显吸收峰，表明处方中其他成分对水苏碱的测定无干扰，见图1。A.对照品溶液;B.阴性对照溶液;C.供试品溶液图1HPLC色谱图（略）Figure1HPLCchromatograms2.7标准曲线与线性范围取对照品溶液，分别进样2.0、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0μL，记录其色谱峰的峰面积。以峰面积对进样量作图，绘制标准

5、曲线，结果水苏碱回归方程：Y=978.2X+21.4，r=0.9997，线性范围：1.00～25.00μg。2.8稳定性试验取同一批供试品溶液（批号2008423），分别于0、2、4、8、12、24h测定水苏碱含量，结果其RSD值为0.23%，说明供试品溶液在本实验条件下24h内稳定。2.9精密度试验取1份对照品溶液，重复进样5次，测定峰面积,.freelents2.12样品测定分别精密量取对照品溶液和供试品溶液进样测定，按外标法以峰面积分别计算得3批口服液样品中水苏碱的含量分别为0.69、0.71、0.72g·mL-1。3讨论3.

6、1复方益母口服液中含水苏碱、益母草碱、益母草啶和益母草宁等多种生物碱，其中水苏碱为主要的活性成分，具有扩张外周血管、增加血流量、抗血小板凝集等作用，选择测定制剂中的水苏碱具有代表性。3.2生物碱类成分使用C18反相柱进行分析时，由于反相柱的封尾不完全，残存的微酸性硅醇基团会与生物碱类成分发生化学吸附而导致拖尾现象，而流动相中微量的酸能使生物碱类成分预先达到“酸饱合”的效果，减少了生物碱类成分与反相柱硅醇基的吸附，改善拖尾。经过比较发现，本文所采用的乙腈0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液（体积比18∶83，pH5.5），分离效果好

7、，保留时间适当。3.3采用高效液相色谱法对复方益母口服液中的主要成分水苏碱进行含量测定，回收率高，操作简单，稳定性和重现性好，可以作为该制剂质量控制的方法。【