大鼠增龄过程中骨质疏松与椎间盘退变的相关性分析

《大鼠增龄过程中骨质疏松与椎间盘退变的相关性分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、大鼠增龄过程中骨质疏松与椎间盘退变的相关性分析作者：张银刚　李天清　王金堂　郭雄【摘要】　　目的研究大鼠增龄过程中骨质疏松症和椎间盘退变的相关性。方法50只健康纯种SD大鼠，喂养22个月，建立老龄大鼠模型，进行股骨、胫骨、腰椎等组织学观察，并评价椎间盘退变的相关指标(椎间盘软骨Ⅱ型和Ⅹ型胶原表达、软骨终板血管芽相对面积、软骨终板钙化层/非钙化层厚度)与骨质疏松的相关指标(骨皮质厚度指数、骨小梁相对面积、骨密度、骨最大应力和应变)的相关性。结果骨质疏松相关指标骨皮质厚度指数、骨小梁相对面积、股骨密度、椎体骨密度与椎间盘退变指标终板血管芽相对面积、非钙化/钙化层比值、Ⅱ型胶

2、原定量之间存在中度到强度的负相关，而与Ⅹ型胶原表达存在中度到强度的正相关，其中椎体骨密度与软骨终板的Ⅹ型胶原相关性最强。骨生物力学指标最大变形和最大负荷与椎间盘退变的各个指标无相关性。结论骨质疏松和椎间盘退变呈负相关，这种相关并不能完全归因于环境因素；而骨生物力学最大变形、最大负荷和椎间盘退变无相关性。【关键词】骨质疏松症；椎间盘；老龄大鼠　　　Analysisofthecorrelationbetonthsinordertobuildthemodelofagingrats,thehistologyoffemoralbone,tibialboneandlumbalver

3、tebramunohistochemistrymethods,therelativeareaofvascularbud,thethicknessofcalcifiedlayeranduncalcifiedlayeroncartilageendplateandtheindexesaxstressandstrainingofbone.ResultsThereoderateorstrongnegativecorrelationamongtheindexesofthedegenerationofintervertebraldiscincludingtherelativeare

4、aofvascularbud,theratiooftheuncalcifiedandthecalcifiedlayer,thequantitationofcollagentypeⅡandtheindexesofosteoporosisincludingthethicknessratioofcorticalbone,therelativeareaofbonetrabecula,thedensityoffemoralboneandvertebralbodybone,themaxstressandstrainingofbone.Hooderateorstrongpositi

5、vecorrelationechanicsincludingthemaxstressandstraininghadnocorrelationentfactors;buttheindexesofbonebiomechanicsincludingthemaxstressandstraininghavenocorrelationberg大学分子生物学实验中心提供；碱性磷酸酶－生物素标记的抗鼠IgG由华美生物有限公司提供；透明质酸酶、链酶蛋白酶、蛋白水解酶、3hydroxy2naphthylocid2,4dimethylaniline、Fastred均来自美国Sigma

6、公司。高清晰病理图像分析仪为北航医学生物公司产品；组织切片机为德国Ainca公司产品；QDR2000型HOLOJAC双光子骨密度仪和电子万能生物力学试验机为美国PE公司产品。　　1.2实验动物和方法　　1.2.1大鼠老龄性模型的建立取同批健康纯种SD大鼠50只(由西安交通大学动物实验中心提供)，雌性，全部饲养条件一致，自由摄食，喂以大鼠标准饲料，饮用蒸馏水，达22月，体重为220-310g，未曾生育，处死作为老龄大鼠组(年龄22月)。　　1.2.2取材实验动物在20g/L乌拉坦溶液麻醉下，腹腔动脉抽血处死，取动物双侧后肢股骨、胫骨，腰椎等组织，分别固定于40g/L多聚

7、甲醛溶液中或放置于低温冰箱保存待用。其中L1、L2椎体和左股骨用于进行骨密度检测，左侧股骨检测完骨密度后再行生物力学实验，右下肢和L3、L4用于作组织学检查。　　1.2.3形态学检查分取L3-4脊柱节段，包括L3、L4椎体及L3-4椎间盘，股骨中1/2处，胫骨中上段(包含膝关节)，经40g/L多聚甲醛溶液固定，80g/L的中性EDTA脱钙液脱钙40d，常规石蜡包埋，用90g/L的多聚赖氨酸处理载玻片，切片，每张6-8μm，HE染色。　　1.2.4免疫组化方法测定Ⅱ、Ⅹ型胶原表达椎间盘组织切片用二甲苯脱蜡、逐级乙醇水化后，用透明质酸酶(Hy