复方鳖甲软肝方防治肺纤维化细胞凋亡的实验研究

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1、复方鳖甲软肝方防治肺纤维化细胞凋亡的实验研究作者：段斐，耿德海，许文杰，唐志远，史建红【摘要】　　目的通过观察细胞凋亡，探讨复方鳖甲软肝方防治肺纤维化的机理和疗效。方法选SD雄性大鼠180只，随机分为假手术组，模型组，阳性药物对照组，复方鳖甲软肝方高、中、低剂量组，共6组，每组30只。博莱霉素常规造模的同时给药，假手术组和模型组每天灌胃生理盐水，其余4组灌药进行防治。各组分别于7，14，28d随机抽取10只大鼠，8只制成光镜标本，2只麻醉后快速开胸取肺组织，进行电镜标本的制作。免疫组化载玻片用DEPC处理后备用。结果Ⅰ型和Ⅱ型肺泡上皮

2、细胞以及成纤维细胞均有凋亡。bax在肺泡Ⅰ型和Ⅱ型上皮细胞，肺泡巨嗜细胞胞质和胞膜均表达。假手术组和高、中剂量组呈弱阳性表达，模型组强阳性表达。Bcl-2在核膜和线粒体表达，模型组强阳性表达，药物组弱表达。结论复方鳖甲软肝方通过调节细胞凋亡，上调Bax活性，抑制Bcl-2的活性，抑制Ⅱ型上皮细胞凋亡，减少纤维积聚和纤维化形成，对肺纤维化起到防治作用。【关键词】复方鳖甲软肝方；凋亡；超微结构　　Abstract:ObjectiveTostudythepreventiveandtherapeuticeffectofpoundprescri

3、ptiononaryinterstitialfibrosis)causedbyBleomycinA5.Methods180SDratslydividedintosixgroups:shamoperationgroup,modelgroup,positivemedicinegroup,high-dosagegroup,medium-dosagegroupandloediumgroup.Aftertheyedicine,tenratsineachgroupeachtimeadeforlightmicroscopespecimen.2rat

4、smunohistochemicalglasscoversacrophagecytoplasm,cytolemmaexpressionoperationgroup,highCPTSandmediumCPTSgroupsandremarkablypositiveinmodelgroup,acrophage.Bcl-2eandonkaryotheca.ExpressioninmodelgrouparkablypositiveinCPTSgroups,ationofIPF.ConclusionCPTShasobvioustreatingef

5、fectthroughreducingfiberpilingandrestrainingformingoffibrosisonratsycinA5,CPTScanregulatethealveolarapoptosisbyinhibitingtheBcl-2expression,enhancingtheBaxexpressionandinhibitingtheapoptosisofATⅡ.　　Keyicrostructure特发性肺间质纤维化以肺泡上皮细胞凋亡（apoptosis）导致肺泡结构完整性破坏和肺成纤维细胞增生为特征［1］。

6、早期各种炎症细胞和肺泡细胞分泌炎症因子引起细胞损伤与细胞增殖失控，启动细胞凋亡的途径，引起肺纤维化［2］。Bcl-2和Bax是一对相互拮抗的基因产物，两者自可形成同二聚体，也可相互作用为异二聚体。Bcl-2和Bax与凋亡调控直接相关：Bax增高促进细胞凋亡；Bcl-2增高抑制细胞凋亡［3］。两者的平衡状态维持肺组织细胞的正常，保持呼吸功能的稳定。　　1器材　　1.1药物防治药物：复方鳖甲软肝方(内蒙古福瑞中蒙药科技股份有限公司生产的复方中药干粉，600g/瓶，批号：20020501)，高剂量1.4g·kg-1·d-1、中剂量0.7g·

7、kg-1·d-1、低剂量药物为0.35g·kg-1·d-1，相当于临床日用量（0.1g·kg-1）的14倍，7倍，3.5倍。　　阳性对照药：醋酸强的松0.56mg·100g-1·d-1，广东华南制药厂生产，批号011201。　　造模药物：注射用盐酸博莱霉素(bleomycin，BLM-A5)，日本化药株式会社生产，批号X12100。　　1.2动物及分组SD大鼠180只，雄性，体重200～220g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，动物级别：SPF/VAF，许可证编号：SCXK2002-0003。饲养于同级动物房，自由饮水。购入后适

8、应性饲养1周，进行实验分组。动物随机分为6组：假手术组；模型组；阳性药物对照组；复方鳖甲软肝方（以下表格中简称鳖甲方组）高、中、低剂量组。每组30只。各组均于7，14，28d随机抽取10只大鼠采血，同时取肺制成光、电镜标