粗叶悬钩子总生物碱不同部位对肝损伤的保护作用研究论文

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1、粗叶悬钩子总生物碱不同部位对肝损伤的保护作用研究论文赵锦燕，吴志生，陈旺，洪振丰【摘要】目的研究粗叶悬钩子总生物碱的不同极性部位对小鼠急性肝损伤的影响。方法采用回流提取法提取粗叶悬钩子总生物碱，用不同极性溶剂萃取其不同极性部位；制备小鼠急性肝损伤模型，用粗叶悬钩子总生物碱不同极性部位干预，观察其对小鼠血清生化和组织病理学的影响。结果醋酸乙酯低剂量和正丁醇高剂量组均可以显著降低转氨酶的活性；正丁醇高剂量组可以显著提高SOD活性，醋酸乙酯组可以显著提高SOD活性并降低NO含量。结论粗叶悬钩子总生物碱醋酸乙酯和正丁醇部位可

2、以降低转氨酶活性.freell，水浴回流1h，各提取3次，合并提取液，浓缩干燥后，分别得石油醚提取物0.01g，氯仿提取物0.01g，醋酸乙酯提取物0.1g，正丁醇提取物0.5g。由于石油醚和氯仿提取物量非常少，不足以作动物试验。2.3小鼠急性肝损伤模型制备及分组给药取小鼠90只，称重，按体重随机分为9组：即空白对照组、CCl4模型组、总生物碱水溶液组、正丁醇高剂量组、正丁醇低剂量组、正丁醇药渣组、醋酸乙酯高剂量组、醋酸乙酯低剂量组、醋酸乙酯药渣组，每组10只，雌雄各半。除空白对照组腹腔注射0.2ml生理盐水外，其余

3、各组于第1，4，7天在给药30min后，用0.2%CCl4花生油溶液按10ml/kg体重腹腔注射,.freell/10g。空白对照组和CCl4模型组按0.1ml/10g体重予以生理盐水灌胃（即0.1ml/10g），总生物碱水溶液组（35mg/kg）、正丁醇高剂量组（35mg/kg）、正丁醇低剂量组(5.8mg/kg)、正丁醇药渣组（35mg/kg）、醋酸乙酯高剂量组(35mg/kg)、醋酸乙酯低剂量组(4.6mg/kg)、醋酸乙酯药渣组（35mg/kg），0.25ml/10g，1次/d，连续7d。2.4取材全部小鼠于

4、末次给药24h后取材，采用摘眼球法取血，每只小鼠取血约1ml装入EP管中，于4℃3000r/min离心10min，取其上清液，于-20℃保存待测；取血完毕后颈椎脱臼处死小鼠，立刻剖开腹腔，暴露肝脏，剪取小块右中央叶肝脏组织，约0.5cm3，迅速投入10%福尔马林溶液中固定，常规切片，HE染色，光镜下作组织病理学检查。2.5指标检测各测定指标分别按相关的试剂盒操作说明书进行测试。肝组织病理学检查，在光镜下观察肝组织切片的病理形态学变化。肝组织病理学改变分为4级：(－)正常肝细胞，肝组织细胞无肿胀、坏死及炎性浸润；（＋）

5、肝细胞轻度肿胀，单个肝细胞坏死，或少许炎性细胞浸润，或点状坏死，肝小叶内散在的肝细胞坏死，坏死范围仅累及1至几个肝细胞；（＋＋）肝细胞中度肿胀，表现为脂肪变性和细胞水肿，肝细胞变性坏死明显或灶状坏死，或明显炎性浸润；（＋＋＋）表示重度肝细胞肿胀，或肝组织片状坏死，或大量炎性细胞浸润。2.6统计学处理用SPSS11.5版本统计软件处理，结果用±s表示，多组数据之间比较使用单因素方差分析；计数资料用秩和检验。P0.05为明显差别，P0.01为显著差别，均有统计学意义。3结果3.1粗叶悬钩子总生物碱不同极性部位对CCl4所

6、致小鼠急性肝损伤血清ALT、AST活性的影响模型组小鼠血清中的ALT和AST含量明显高于空白组(P0.05)，说明模型制作成功。各治疗组与模型组比较，除正丁醇低剂量组外，其余各组均可降低ALT的含量，且正丁醇高剂量组和醋酸乙酯低剂量组有显著差异（P0.05）；正丁醇低剂量组、正丁醇高剂量组和醋酸乙酯低剂量组均能不同程度地降低AST的含量，其中醋酸乙酯低剂量组差异显著（P0.05）。结果见表1。表1粗叶悬钩子不同极性提取物对小鼠血清中ALT、AST的影响(略)3.2粗叶悬钩子总生物碱不同极性部位对CCl4所致小鼠急性肝

7、损伤血清中SOD活性与NO含量的影响实验结果（见表2）显示，模型组小鼠血清中SOD含量明显低于空白组（P0.01），NO含量明显高于空白组（P0.01）。各治疗组均不同程度升高了SOD的活性，其中，生物碱水液组和正丁醇药渣组显著升高（P0.05），正丁醇高剂量组、醋酸乙酯低剂量组和醋酸乙酯高剂量组升高尤为显著（P0.01）；各治疗组均能不同程度降低了NO的含量，醋酸乙酯药渣组降低显著（P0.05），生物碱水液组、正丁醇药渣组、醋酸乙酯低剂量组、醋酸乙酯高剂量组降低非常显著（P0.01）。表2粗叶悬钩子不同极性提取物对

8、小鼠血清中SOD、NO的影响(略)3.3粗叶悬钩子总生物碱不同极性部位对小鼠肝组织病理学损伤的影响结果见表3及图1。结是表明，空白组小鼠肝组织未出现明显病理变化，肝组织以中央静脉为中心向四周呈放射状排列且吻合成网，肝细胞之间的肝窦亦吻合成网，可见多个肝小叶及结缔组织构成的汇管区；模型组小鼠肝细胞水肿，呈片状变性坏死，伴有大量炎性细胞浸润，呈（＋