双光气致急性损伤对兔肺泡ⅱ型细胞形态学的影响论文

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1、双光气致急性损伤对兔肺泡Ⅱ型细胞形态学的影响论文【关键词】肺泡/细胞学【Abstract】AIM：TostudythechangesofpulmonaryalveolartypeⅡepithelialcellsinrabbitlunginjuredbydiphosgeneacutelyandtofindoutthemechanismofthelunginjurybydiphosgene.METHODS：Japaneserabbitsentalanimalsandlydividedintosixgroups:Negati

2、vecontrolgroup(n=10)and0,2,4,8and12hgroupsafterdiphosgeneexposure(n=5ineachgroup).FolloonaryalveolartypeⅡepithelial(PATE)cellsonaryalveolartypeⅡepithelialcellsicroscope.RESULTS：ThePATEcellschangedmorphologicallyingroupsexposedtodiphosgene.Afterexposuretodiphosge

3、ne,thecontentofphospholipidinPATEcellsintheexposedgroupsarkablyloalcontrolgroup(P001).paredonaryalveolartypeⅡepithelialcellsbyinjuringPATEcellsurfactantandcellshapes.Theinjuryprocesscanbedividedintofourphases:nonlethalphase,pensatoryphase,depensatoryphaseandleth

4、alphase.【Keyonaryalveoli/cytology【摘要】目的：通过对日本大耳兔双光气肺损伤后肺泡Ⅱ型细胞内磷脂和形态学变化的观察，探讨双光气对肺Ⅱ型细胞的损伤及其机制.方法：将纯种日本大耳白兔35只随机分为对照组（n=10）、染毒即刻组（n=5）、染毒2h组（n=5）染毒4h组（n=5）、染毒8h组（n=5）、染毒12h组（n=5）；采用浓度―时间法动态式染毒，染毒后按不同时间点对实验动物进行颈总动脉插管放血处死，取肺并用肺灌洗液对支气管肺泡进行灌洗，然后取肺组织作冰冻切片，进行电镜观察，并测定细胞内

5、磷脂含量.结果：肺Ⅱ型细胞内磷脂含量在染毒即刻开始时较正常组含量下降（P001）；在染毒2h时降到最低，之后上升（P005）.freelL与700mLL-1过氯酸(AR)65mL用蒸馏水配成1000mL溶液），显色剂（钼酸铵(AR)25g和无水醋酸钠(AR)82g溶于蒸馏水中并稀释至100mL，并与100mLL-1的抗坏血酸按91混合），储备液（将04393g磷酸二氢钾配成100mL溶液之后加入1mL氯仿(AR)作为储存液保存），磷应用液（将储备液2mL稀释至50mL备用），固定液（取甲醛（AR400gL-1）20mL

6、与100gL-1氯化钙10mL溶于80mL蒸馏水中），媒染剂（重铬酸钾(AR)5g加氯化钙1g溶于100mL水中）染色液（酸性苏木精溶液由50mg苏木精(AR)溶于48mL蒸馏水中，再加入10gL-1的高碘酸钠(AR)溶液1mL煮沸后加入冰醋酸1mL即可）灌洗液（4℃生理盐水）.1.2方法将动物置于染毒柜中，温度为30℃，采用浓度时间法动态式染毒，毒剂浓度为（300±20）μgL-1,染毒时间为20min.染毒后，各实验组动物分别于0，2，4，8和12h行颈总动脉插管放血处死.处死后立即剖开胸腔，取出肺脏，用肺灌洗液按

7、30mLkg-1的剂量，对支气管肺泡分3次充分灌洗.所得的灌洗液混匀后离心，800rmin-1，10min，取上清备用；肺组织用甲醛-钙溶液固定，作冰冻切片备用.1.2.1肺灌洗液中磷脂总量的测定取肺灌洗上清液3mL，加2倍体积的氯仿甲醇（21）混合液，充分混旋，静置12h后离心（100rmin-1，10min）分相，吸取下相液1mL，放入试管中，沸水浴至溶剂挥发干，加入消化液02mL，另取2个试管作为标准管及空白管，分别加入消化液02mL，在标准管中再加入磷应用液01mL.将测定管、标准管及空白管都置于电炉上消化（1

8、000ed，2002;112(5):133-140.［2］TangL,DengL.Dynamickiicresolutionviadualfunctioncatalysisofmodifiedcinchonaalkaloids:Asymmetricsynthesisofalpha-hydroxycarboxylicacids［J］