硒蛋白p在结肠癌组织中的表达及其意义论文

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1、硒蛋白P在结肠癌组织中的表达及其意义论文鲁建国，王青，马庆久，宁力，房青，褚延魁，杜锡林，杨媛.freelatissues.METHODS:Samples30casesofcoloncarcinoma，and30correspondingnormalcolontissuesatissuesmuohistochemicalstain.RESULTS:TheexpressionrateofselenoproteinPincoloncarcinoma(60.0%)altissues（80.0%,P0.05).TheexpressionrateofselenoproteinPinhighand

2、moderatedifferentiationcases（86.7%）atissues,a,butnotor.【Keys/pathology;proteins/analysis;selenium;immuohistochemistry【摘要】目的：研究结肠癌组织中硒蛋白P的表达及其意义.方法：选用手术切除结肠癌组织30例，同时另取30例正常结肠组织作为对照，用免疫组化的方法观察硒蛋白P在结肠癌组织中的表达.结果：硒蛋白P在结肠癌组织中的阳性表达率(60.0%)低于其在正常结肠组织中的表达率（80.0%），二者相差有统计学意义(P0.05)；硒蛋白P在高、中分化病例中表达率(86.7%)

3、高于低分化例病例中表达率(33.3%)，二者相差有统计学意义(P0.05)；硒蛋白P在Ⅰ~Ⅱ期病例中表达率为58.8%，Ⅲ期病例中表达率为61.5%，二者相差无统计学意义(P0.05).结论：硒蛋白P在结肠癌组织中为低表达，与肿瘤的分化程度有关，与肿瘤的TNM分期无关.【关键词】肿瘤/病理学；蛋白质类/分析；硒；免疫组织化学硒是哺乳动物必需的一种微量元素，缺硒会导致多种病理状态.硒蛋白是微量元素硒发挥生物学功能的主要形式.为了进一步探讨硒蛋白P在肿瘤中的作用，我们利用免疫组化技术观察该抗体在结肠癌中的表达.1对象和方法1.1对象结肠癌30例，为第四军医大学唐都医院普通外科200310/

4、200505手术切除标本,男17例，女13例.年龄45~79(平均61.4)岁；高分化10例，中分化5例，低分化15例；肿瘤TNM分期：I期8例，II期9例，III期13例.另取30例原发器官正常结肠组织作为对照.兔抗人硒蛋白P多克隆抗体，由中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室先期制备保存.免疫组化试剂盒购自北京中杉公司.1.2方法①将组织蜡块切片，常规脱腊：70℃烤片2h，二甲苯10min×2次.水化：PBS洗3min×2次.②30mL/LH2O2溶液室温处理10min，双蒸馏水洗3min×3次.③在0.01mol/L枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）92~98℃水浴中处理25

5、min修复抗原，自然冷却到室温.缓冲液洗3min×2次.④分别用正常山羊血清和卵白素室温封闭2h.⑤滴加稀释的一抗SelP多克隆抗体（1∶50），37℃孵育4h.PBS洗3min×3次.⑥生物素结合的羊抗兔IgG二抗和ABC复合物室温分别孵育2h.⑦滴加DAB溶液显色，注意观察颜色变化，及时终止，冲洗.⑧苏木素复染，梯度乙醇脱水，封片.以免疫组化试剂盒中的阳性片作阳性对照，以0.01mol/LPBS（pH7.4）和正常羊血清分别替代一抗和二抗作为阴性对照.阳性染色为棕黄色，定位于细胞胞质和细胞膜.染色阳性细胞数量评分：0分（全片未见着色或少于5%细胞散在着色），1分（5%~25%细胞着

6、色），2分（25%~50%细胞呈阳性），3分（50%~75%细胞染色阳性），4分（75%细胞染色阳性）.染色强度评分：0分（阴性），1分（弱阳性），2分（中等阳性），3分（强阳性）.染色阳性细胞数量评分与染色强度评分之积为最终染色评分标准：0分（阴性），0~4分（弱表达），4~8分（中等表达），8~12分（强表达）.统计学处理:采用SPSS10.0统计软件包，用非参数检验，两个独立样本P的增加，抑制DNA,RNA及蛋白质的合成；抑制肿瘤病变中新生血管生成［4-6］.A:结肠癌组织;B:正常结肠组织.图1硒蛋白P的表达ABC×200表2硒蛋白P在结肠癌组织中的表达与临床病理学因素的关系现

7、认为血浆中硒蛋白P水平和肿瘤的发生呈负相关，PerssonMoschos等［7］发现对应于硒蛋白P浓度的5个水平，从低到高，发生肿瘤的相对危险度分别为5.2,2.3,2.9,2.2和1.0，硒蛋白P水平最低组发生呼吸道和消化道肿瘤的概率分别是硒蛋白P高水平组的6倍和3.4倍，表明随着硒蛋白P浓度增高，肿瘤发生的危险度降低.Mork等［2］发现，结直肠腺瘤较邻近正常黏膜硒蛋白PmRNA表达下降，并认为在结直肠腺瘤硒蛋白PmRNA表达下调可能是腺瘤