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1、三七皂苷R1体外透皮吸收累计渗透量的研究论文汪新芳，汪冰，王平，龚彦胜，韩莉，孙虎，曲永胜【摘要】目的综述近年来三七皂苷R1研究进展，阐述三七皂苷R1透皮吸收的可能性.freelg·ml-1,累计透皮率约为4.35%。结论三七皂苷R1可以透过皮肤被吸收，本实验为研制三七皂苷R1的新型透皮制剂打下了实验基础。【关键词】三七皂苷R1;透皮吸收;累计渗透量透皮吸收制剂是无创伤性给药的新途径1，不仅能够避免口服给药等可能发生的不良反应，降低毒副反应，而且使用方便,近年来透皮吸收制剂的开发研究日益受到重视。三七皂苷R1是从中药三七中提取的有效活性物质2，现代药理学研究证明三七
2、皂苷在心脑血管系统方面具有较好的生理活性,近年来出现了一些三七的新剂型，与传统的剂型相比具有方便、安全、见效快、易于携带等优点,但目前尚未见到透皮吸收制剂的上市。本试验研究三七皂苷R1体外透皮吸收累积渗透量，为新型透皮吸收制剂的研制打下了实验基础。1仪器与材料1.1仪器自制franz扩散池，高效液相色谱仪。1.2药品及试剂受试药物：三七透皮制剂。三七皂苷R1对照品(中国药品生物制品检定所,批号：07452200007,纯度98%,分子式C48H82O18,相对分子质量947112)。1.3动物昆明种小鼠,体质量(20±2)g,雌雄各半,购自山东大学实验动物中心，合格
3、证号：2004003004号。2方法2.1色谱条件LabAlliace高效液相色谱仪：LichrospherC18(4.6mm×150mm，10nm5μm);流动相:乙腈-水-磷酸(25∶75∶0.05);流速:1.0ml·min-1;进样量:20μl;检测波长:205nm。2.2三七皂苷R1标准曲线的测定三七皂苷R1对照品储备溶液：精密称取三七皂苷R140.2mg置10ml容量瓶中,加甲醇适量超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。三七皂苷R1对照品溶液：分别精密取三七皂苷R1对照品储备溶液0.5ml置10ml容量瓶中,.freell分别置于10ml容量瓶中,加
4、甲醇稀释至刻度，摇匀，精密吸20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图(见图1)。峰面积与进样量关系结果如下:三七皂苷R1线性方程:A=2037498C-4226.57,r=0.9988,线性范围:0.00402～0.4020mg·ml-1。结果表明在各自的线性范围内三七皂苷R1的峰面积与溶液浓度线性关系良好。2.3精密度实验精密吸取标准品对照液20μl，在上述色谱条件下连续进样6次，计算相对标准偏差，结果表明RSD不超过3%,符合规定标准，说明仪器系统的精密度良好。结果见图1。图1三七皂苷R1的标准曲线2.4回收率实验取三七皂苷R1对照品储备溶液(浓度：4.002mg
5、·ml-1)0.02，0.10，0.50ml各三份，分别置10ml容量瓶中;加0.9%氯化钠溶液稀释至刻度，摇匀，并标记为1.2.3号样品，精密吸20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法计算回收率。结果见表1。表1三七皂苷R1的加样回收率实验2.5三七皂苷R1透皮吸收累计渗透量的测定2.5.1准备透皮吸收装置3按照改良franz扩散池的图纸自制透皮吸收装置，将三七皂苷透皮制剂平铺于吸收池上方，中间为小鼠皮肤，下层为接受液。2.5.2制备小鼠角质层皮肤取体质量为18～22g昆明种小鼠，雄性，用眼科手术剪沿鼠毛根部将腹部的鼠毛清理干净，然后脱颈椎处死后,马上将鼠皮浸
6、泡于生理盐水中，15min后捞出，贴于小烧杯外壁，用脱脂棉快速将鼠皮皮下组织和脂肪擦去，作为受试皮肤。受试皮肤每次试验现用现制。2.5.3样品的制备准备好经过改良franz扩散池,将处理后的小鼠皮角质层皮肤向上夹在顶盖和接收器之间，用橡皮筋固定好扩散池边缘四周，将扩散池横放，从取样门加入0.9%生理盐水，直至液面到达取样支管长度一半的地方，再将扩散池竖起，置于磁力搅拌器之上，与超级恒温水浴相连，温度保持在(37±0.5)℃。将配好的三七透皮吸收药液倾倒在小鼠皮角质层上，开启磁力搅拌器，于0.5，1.0，1.5，2.0，4.0，6.0，8.0，16.0，18.0，20
7、.0，22.0，24.0h分别取生理盐水作为接受液。平行进行3次实验，将3次实验收得的接受液,用水饱和正丁醇和正丁醇饱和水进行处理，残渣用甲醇溶解至5ml,摇匀，用0.45nm微孔滤膜过滤，即得样品。2.5.4三七皂苷R1含量的测定精密吸取样品0.25ml,依上述供试品溶液制备方法,用甲醇定容至5ml,进样10μl，高效液相法测定其中三七皂苷R1的吸收峰面积并记录结果。2.5.5结果处理方法累计渗透量M:M'=C'n×V池A3结果透皮吸收结果：测定除盐后样品中三七皂苷R1的含量。以单位面积累计渗透量为纵坐标，时间为纵坐标，绘制曲线，将渗透曲线尾部直线部分的M-t
