三七皂苷r1在大鼠体内的代谢产物分析论文

《三七皂苷r1在大鼠体内的代谢产物分析论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、三七皂苷R1在大鼠体内的代谢产物分析论文【摘要】目的研究三七皂苷R1在大鼠体内的代谢情况，阐述三七皂苷R1在大鼠体内的代谢产物。方法以三七皂苷R1的微生物转化产物为对照品；采用LC-ESI-MS/MS方法，检测大鼠体内的代谢产物。结果在大鼠体内共检测到8个代谢产物，并利用对照品鉴定了它们的结构分别为：20(S)-三七皂苷R2，20(R)-三七皂苷R2，20(S)-人参皂苷Rh1，20(R)-人参皂苷Rh1，人参皂苷Rh4.freeletabolitesofnotoginsenosideR1inrats.Methods

2、ThemicrobialtransformationmetabolitesofnotoginsenosideR1etabolismstudiesofnotoginsenosideR1inrats.ResultsThestructuresofeightmetabolitesofnotoginsenosideR1inratfecesbiotransformation.Theirstructuresmar-E-20(22)-24-diene-6-O-β-D-xylopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyra

3、noside.ConclusionNotoginsenosideR1isextensivelymetabolizedinratandhasthesamemetabolicpathicroorganismstosomeextent.KeyLC-MS(SanJose，CA，USA)，使用FinniganXcalibur数据处理系统。Thermo液相色谱仪，AgilentZorbaxSB-C18反相色谱柱(5μm，250mm×4.6mm)，AgilentZorbaxSB-C18保护柱(5μm，20mm×4mm)。1.2药品

4、与试剂色谱纯乙腈(Merck,Darmstadt,Germany)，去离子水经过Milli-Q系统纯化(Millipore,.freelg·kg-1剂量灌胃给予三七皂苷R1，置于代谢笼中，继续禁食，于给药后24，48，60和72h收集粪便，冷冻保存，待处理。将1g粪便称重后研磨，加入2ml甲醇超声提取30min后于3000r/min离心10min，上清液经0.45μm滤膜过滤，续滤液备用。1.4HPLC-DAD分析条件流动相为乙腈-水，梯度洗脱程序为0～30min，由15％的乙腈线性升至22％；50min，升至30％

5、；80min，升至40％；120min，升至60％。流速为1.0ml·min-1，柱温为30℃，检测波长为203nm。进样量20μl。1.5LC-MS分析条件流动相为乙腈-0.2%醋酸水，梯度洗脱程序为0～10min，由20％的乙腈线性升至22％；20min，升至30％；50min，升至40％；70min，升至60％。电喷雾离子化(ESI)源，正离子模式；质谱条件经过反复优化，最终确定为：鞘气流速为40arb；助气流速为10arb；喷雾电压为4.5kv；毛细管温度为300℃。2结果2.1代谢产物HPLC分析取粪便样品

6、溶液，在“1.4”项色谱条件下进行HPLC-DAD检测分析。共检测到底物三七皂苷R1和7个代谢产物M1～M7的色谱峰。见图2。经与对照品进行比对确定代谢产物的结构分别为：20(S)-三七皂苷R2(M1)、20(R)-三七皂苷R2(M2)、20(S)-人参皂苷Rh1(M3)、20(R)-人参皂苷Rh1(M4)、人参皂苷Rh4(M5)、原人参三醇(M6)和人参皂苷F1(M7)。同时记录所测的底物和4个主要的代谢产物的色谱峰面积，与时间作图，记录粪便中的含量变化。见图3。2.2代谢产物LC-MS/MS分析样品经LC/MS/

7、MS分析，进行全离子和选择离子扫描，检测到了底物及8个代谢产物M1～M8。其LC/MS选择离子流图见图4。分别对8个代谢产物进行MS和MS/MS分析，将所得的碎片离子与对照品的相比较。在MS谱中，M1和M2均显示m/z771［M+H］+的准分子离子峰，比三七皂苷R1的m/z933［M+H］+少162amu，提示均为脱去一分子葡萄糖基的代谢产物。在MS/MS谱中上述两个代谢产物均显示了3个主要的碎片离子峰m/z441、423和405，提示代谢产物结构中含有一个葡萄糖基和一个木糖基。将对照品20(S)-三七皂苷R2和20

8、(R)-三七皂苷R2进行LC-MS/MS分析，所得到的MS和MS/MS数据及色谱保留时间与代谢产物相比较。分别与代谢产物M1和M2一致，所以这2个代谢产物的结构分别鉴定为20(S)-三七皂苷R2和20(R)-三七皂苷R2。在MS谱中，M3、M4和M7均显示m/z639［M+H］+的准分子离子峰，比三七皂苷R1的m/z933［M+H］+少294a