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时间:2018-11-13
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1、血塞通滴丸中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1含量的高【关键词】血塞通滴丸高效液相色谱法人参皂苷Rg1三七皂苷R1 血塞通滴丸为血塞通的新剂型,其主要成分为人参皂苷Rg1,三七皂苷R1。本实验采用高效液相色谱法测定血塞通滴丸中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量。 1仪器与试药 SSI公司PC-3000高效液相色谱仪,热电300紫外分光光度计,人参皂苷Rg1,三七皂苷R1对照品(中国药品生物制品检定所),血塞通滴丸(批号:20080409,20080401,20080402)本所自制。甲醇为色谱纯,水为纯化水。 2方法与结果 2.1检测波长
2、确定称取人参皂苷Rg1,三七皂苷R1对照品适量,用甲醇配制成20μg·ml-1的溶液,在200~300nm波长处扫描,结果人参皂苷Rg1,三七皂苷R1均在203nm波长处有最大吸收。 2.2色谱条件色谱柱为岛津KromasilC18(4.6mm×25cm);流动相为甲醇-水(58∶42);流速为1.0ml·min-1,检测波长为203nm;理论板数按人参皂苷Rg1,三七皂苷R1峰计算不低于10000,分离度大于2.0。 2.3含量测定 2.3.1标准曲线的绘制 人参皂苷Rg1:精密称定人参皂苷Rg1对照品约60mg,置50ml量瓶中,
3、加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取1.0,3.0,5.0,7.0,9.0,10.0ml分别置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。结果表明人参皂苷Rg1在浓度0.116~1.160mg·ml-1范围内与峰面积呈良好线性关系,其回归方程Y=-99466+3257868X,r=0.9992。 三七皂苷R1:精密称定三七皂苷R1对照品约60mg,置50mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0ml分别置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色
4、谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。结果表明三七皂苷R1在浓度0.232~0.812mg·ml-1范围内与峰面积呈良好线性关系,其回归方程Y=11772+2495523X,r=0.9987。 2.3.2重复性与稳定性试验取标准曲线测定中心浓度点连续进样6次,量取峰面积计算RSD分别为人参皂苷Rg11.11%,三七皂苷R11.09%,重现性良好,可准确用于含量测定。该溶液放置6h后重复进样,峰面积基本不变,RSD分别为1.05%和0.99%。 2.3.3精密度测定取样品6份,精密称定,按样品含量测定方法测定RSD为2.5%。 2.3.4
5、加样回收率测定取血塞通滴丸10粒,精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇适量,超声10min使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。精密量取5.0ml置10ml量瓶中,精密加入人参皂苷Rg1,三七皂苷R1对照品适量,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。测定结果见表1。表1加样回收率测定结果(略) 2.3.5样品测定取血塞通滴丸10粒,精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇适量,超声10min使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。测定结果见表2。表2血塞通滴丸测定结果(略) 2.3.
6、6血塞通原料测定精密称取血塞通原料约100mg,置25ml量瓶中,加甲醇适量,超声10min使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。测定结果见表3。表3血塞通原料测定结果(略) 3讨论 血塞通滴丸的辅料为聚乙二醇6000。经测试聚乙二醇6000的甲醇溶液无紫外吸收峰,对样品的测定无干扰。本方法简便、准确,可作为控制血塞通滴丸中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量测定方法。
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