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时间:2018-11-21
《慢性应激抑郁模型大鼠脑内去甲肾上腺素转运体基因表达的变》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、慢性应激抑郁模型大鼠脑内去甲肾上腺素转运体基因表达的变作者:唐建军,张印南,张金玲,许崇涛[摘要]目的:探讨慢性不可预见性应激抑郁模型大鼠脑内去甲肾上腺素转运体()基因表达的变化。方法:40只SD雄性大鼠随机分为正常对照组和抑郁模型组。在建立慢性不可预见性应激抑郁模型后,应用动物行为分析系统记录大鼠自主活动的变化,用逆转录_聚合酶链反应法测定mRNA的含量。结果:实验后第21d,抑郁模型组的活动时间、总路程明显减少(P<005),休息时间明显延长(P<005),脑桥基因表达明显下降(P<005)
2、。结论:抑郁模型大鼠脑桥基因表达下降可能与抑郁障碍发病有关。 [关键词]抑郁障碍;慢性应激;去甲肾上腺素转运体;逆转录_聚合酶链反应法 [Abstract]Objective:Toinvestigatetheexpressionchangeofbrainnorepinephrinetransporter()mRNAinratstreatedildstress.Methods:MaleSprague_Dalydividedintonormalcontrolgroupanddepressionmodelgroup
3、.Chronicstressdepressionratmodelicbehavioreasuredbyanimalbehavioranalysissystem.TheexpressionofmRNAcodingforerasechainreaction.Results:Afterunpredictedmildstressors,themotivetimeanddistanceeRNAinpontinetissueodelgroup,paredalcontrolgroup.Conclusion:Thedecreas
4、edexpressionofmRNAinpontinemightbeassociatederasechainreaction 随着对抑郁障碍的深入研究,发现除5_羟色胺(5_HT)系统功能不足外,去甲肾上腺素(NE)系统的功能低下也是构成抑郁障碍的病理生理基础之一。NE再摄取位点即NE转运体()位于神经末梢突触前膜,其功能是重摄取突触间隙的NE进入突触前膜,终止NE对突触后膜受体的作用。是多种抗抑郁药物的作用靶点,抗抑郁药物可通过阻断以提高胞外NE浓度,延长NE对神经元突触后膜受体的作用时间而达到抗抑郁效果[1
5、]。因此对去甲肾上腺素能神经传递起着重要作用,它的基因表达变化有可能与抑郁障碍的发病机制有关。本实验在建立慢性不可预见性应激的抑郁大鼠模型基础上,采用逆转录_聚合酶链反应法(RT_PCR),观察抑郁模型大鼠脑内mRNA表达的变化。 1材料与方法 11动物 成年Sprague_Dain、禁食、禁水各24h、夹尾1min、明/暗颠倒24h、电击足底5min、鼠笼倾斜45°24h、潮湿垫料10h、空瓶放置1h和45℃高温5min),连续21d[2]。正常对照组不接受任何应激,自由进食、饮水。实验期间,每周称重大鼠
6、。 122 自发活动测定 用DigBehv动物行为视频跟踪分析系统(上海吉量软件科技有限公司,中国)测定实验前和实验后第21d大鼠的自发活动(检测在9∶00~11∶00AM进行,时程5min)。自发活动在开放场(40cm×40cm×65cm)进行,由摄像系统和视频合成器记录大鼠的活动情况,计算机分析系统分析大鼠的运动轨迹,监视、分析休息及活动时间、总路程、线性度、平均速度、中央区域活动时间及路程、四周活动(四角和四边)时间及路程的行为改变。 123脑内mRNA测定 用RT_PCR测定①总RNA抽提。实验后
7、(第21d)两组同时断头取脑,冰上分离出下丘脑、海马、额叶和脑桥,抽提组织总RNA,用40μL无核酸酶的水稀释RNA沉淀。用BioPhotometer蛋白核酸定量测定仪(Eppendorf公司,德国)测吸光度值(A260/A280)和RNA浓度。②引物合成。由上海生工公司根据 23RT_PCR产物确认 用RT_PCR扩增产物作琼脂糖凝胶电泳分析,所得片段大小与
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