不同生长期白术多糖的含量测定论文

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1、不同生长期白术多糖的含量测定论文【摘要】目的比较不同生长期白术多糖含量的动态变化，确定白术的最佳采收时期，为白术多糖的开发利用提供依据。方法用乙醇去杂和水回流提取白术多糖，于489nm波长处用苯酚-硫酸比色法测定其含量。结果不同生长期白术多糖变化较大，其中9月底到10月底时期白术多糖的含量最高。结论以白术多糖含量为指标，不同生长期白术的最佳采收期为9月底到10月底。【关键词】白术;不同生长期;多糖;含量测定白术(RhizomaAtractylodisMacrocephalae)为菊科(positae)植物白术AtractylodesmacrocephalaKoidz的干燥根茎。白术为多年

2、生草本,栽培历史悠久,主产中国浙江省东阳、磐安一带,是著名的道地中药材“浙八味”之一1，分布于浙江、江西、湖南、湖北、陕西，亦多栽培2。近几年以来,中国对白术的需求量大增,居全国大宗常用中药材之首。其含有白术多糖、挥发油、氨基酸等多种有效成分3～6.freell→静置→上清液加乙醇调至70%静置→抽滤→沉淀加蒸馏水溶解，在上清液中加乙醇调至70%，静置→抽滤，沉淀用无水乙醇洗涤→60℃真空干燥，即得精制多糖。2.2样品溶液的配制准确称取0.2g白术药材粉末加70%乙醇50ml置锥形瓶中→冷浸2h→超声20min→抽滤→药渣挥干后加50ml蒸馏水，置烧瓶中→回流提取1h，滤液转移至100m

3、l容量瓶定容，摇匀→精密移取10ml于100ml容量瓶定容，摇匀→即得供试品溶液。2.3标准溶液的配制精密称取葡萄糖对照品10mg，加蒸馏水，定容至100ml容量瓶，摇匀→用移液管分别移取该溶液2，4，6，8，10ml，并分别加蒸馏水，定容至10ml，摇匀，即得不同浓度的对照品，标1，标2，标3，标4，标5→再分别移取1ml于试管中，加入5%苯酚1ml和硫酸5ml,摇匀，放置5min，于40℃水浴加热20min，测定吸光度。2.4检测波长的确定以水为空白，葡萄糖标准品溶液在390～590nm波长范围内测吸光度，在489nm处有最大吸收度。见图1。2.5方法学考察2.5.1苯酚-硫酸法标准

4、曲线在489nm处测定各标准液的吸收度，得回归方程A=0.0145C+0.0039,r=0.9985，表明葡萄糖对照品溶液在20～100μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系。2.5.2稳定性实验取样品溶液在8h内每隔1h测定一次吸光度，在6h内稳定，RSD为1.31%。图1葡萄糖吸收光谱2.5.3重复性实验取白术平行样5份，结果显示RSD=2.91%，表明样品重复性好。2.5.4加样回收率实验在样品溶液中精密加入葡萄糖标准液(n=5)，并适当稀释，以样品液为空白，测定吸光度，计算回收率，平均回收率为100.24%，RSD为4.5%。2.6换算因子的测定精密称取粗制多糖100mg于容量瓶中

5、，加蒸馏水溶解→定容，摇匀→移取上述溶液5ml于100ml的容量瓶中，加蒸馏水→定容，摇匀。精密移取上述制备的溶液1ml于试管中，加苯酚和硫酸显色，重复3次，测定每次的吸光度，从回归方程中计算出多糖供试液中葡萄糖计的浓度。按下列公式计算：换算因子f=l);D为多糖的稀释倍数。结果显示：换算因子f平均=1.22。2.7样品测定结果称取每批药材粉末各0.2g，按“2.2”项制备样品溶液，精密移取样品溶液于试管中，测定吸光度，根据公式计算出样品中多糖的含量，求平均值。多糖含量(%)=CDf/l);D为多糖的稀释倍数;f为换算因子;W为样品重量(g)结果见表1，图2。表1不同生长期白术多糖的含量

6、测定结果由图2可知从4月21日到6月3日白术多糖含量的变化较小呈递减;从6月17日到7月7日白术样品中白术多糖含量呈急速递增趋势;从7月24日到9月10日这段时期白术样品中多糖含量呈现缓慢递增趋势;9月25日开始到10月26日白术药材中白术多糖含量变化幅度较小且比较稳定，其中样品中白术多糖含量达到最高。以白术多糖成分为指标，综合考虑认为从9月底到10月底这段时间为白术的最佳采收期。从4月到6月初的多糖变化认为可能与白术抽薹，以地上部分生长为主;从6月份到7月份白术多糖含量递增，认为此时光照、温度适宜，光合作用增强，认为与白术这个时期以长根为主;从9月底开始到10月底白术多糖含量变化较稳定

7、，其中含量达到最高。3讨论本次试验用白术多糖含量作为指标来考察，可以为白术药材质量控制提供一定的依据，为白术多糖的开发应用提供参考。以白术多糖成分为指标，认为在9月底到10月底这段时期为白术的最佳采收期。本试验分别对同一栽培基地不同采收时期的白术样品中白术多糖进行比较研究,而保证栽培时间和各项田间管理措施一致,能有效地避免了因产地和各项田间管理措施不同而引起的白术多糖成分含量的差异,使试验结果合理、可信。【