平白术多糖与氨基酸提取及含量测定研究论文

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1、平白术多糖与氨基酸提取及含量测定研究论文陈文，李丽立，张平，姜曼花，邱细敏【摘要】目的为开发利用平白术的药用价值提供理论依据，分别提取分离平白术中有效成分多糖和氨基酸，并分别测定平白术多糖和氨基酸的含量。方法采用L9（34）实验因素设计实验，苯酚-硫酸法测定白术多糖的含量。以茚三酮为衍生试剂.freelg·g-1。结论方法简单、有效、快速、准确、灵敏，适合于分析测定白术中多糖和氨基酸的含量。【关键词】平白术；多糖；氨基酸Abstract:ObjectiveToextractpolysaccharideandaminoacidanddeterminetheircontentsi

2、nordertoofferthebasisforusingAtractylodesmacrocephalaKoidzfromPingjiang.MethodsUsingL9（34）orthogonaltest，PhenolsulfuricmethodacrocephalaandtoassayaminoacidusingmethodofNinhydrinpost-columnderivation.ResultsTheanalysisofAtractylodesmacrocephalaKoidzshoinoacids，thetotalcontentg·g-1.Conclusio

3、nTheestablishedmethodisquitesuitableforidentificationandquantificationofpolysaccharideandaminoacidsinAtractylodesmacrocephalaKoidz.Itissimple，effective，rapid，accurateandsensitive.KeyacrocephalaKoidz；Polysaccharide;Aminoacid白术是传统中药，《中国药典》收载的白术为菊科植物AtractylodesmacrocephalaKoidz的干燥根茎，白术具有健脾益气、

4、燥湿利水、止汗安胎之效［1］。《中国药典》2005年版第一部记载含白术的处方有91个。近几年以来，中国对白术的需求量大增，居全国大宗常用中药材之首。由于其含有白术多糖、挥发油、氨基酸等多种有效成分而倍受药物研究工作者的关注，使白术的临床应用日趋广泛［2］，其研究也更为深入、更为多元化。然而，迄今为止，对白术中营养成分氨基酸研究甚少。为了开发利用白术的药用价值，本文对湖南平江产白术——平白术进行研究，提取平白术多糖、氨基酸，采用正交实验选择多糖显色条件，用苯酚-硫酸法测定多糖含量。以茚三酮作衍生试剂，采用柱后衍生法测定氨基酸含量。1材料1.1仪器UV2150型分光广度计（日本

5、岛津），日立L8800全自动氨基酸自动分析仪1.2试剂无水乙醇、硫酸锌、氢氧化钡、硫酸、苯酚、茚三酮、柠檬酸。三钠、醋酸钠（均为分析纯）,平江白术（由湖南药材公司提供）、果糖标准品（市售）、氨基酸标准品（中国科学院亚热带农业生态研究所提供）。2方法与结果2.1显色条件的考察2.1.1苯酚浓度对显色单因素的影响吸取标准溶液1ml于10ml具塞试管中，精密加入1ml不同浓度的苯酚和5ml浓硫酸，混匀，放置5min。移入25℃的水浴中保温20min。冷却。以蒸馏水1ml加相应的试剂作空白，测定吸收度。见图1，表1。表1苯酚浓度的考察（略）实验结果表明,苯酚浓度在4%～7%范围内所

6、得吸收值相近,.freell，浓硫酸4ml，水浴温度25℃，水浴放置时间30min。2.2测定波长的选择精密称取一定量多糖样品置小烧杯中，加水溶解，定量转移至100ml量瓶中，加水至刻度，混匀。吸取该样品2ml于试管中，加5%苯酚水溶液1.2ml混匀，迅速加入4ml浓硫酸，振摇10min，在25℃水浴保温放置30min，取出冷却，以苯酚-硫酸溶液为空白，于400～800nm范围扫描，选择最大吸收波长488.4nm为测定波长。2.3标准曲线精密称取105℃干燥至恒重的标准果糖18.70mg，加水溶解至250ml，配成74.8μg/ml的标准储备液。取10ml具塞试管，分别加上述

7、标准液0.0，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50，0.60，0.70ml，加水稀释至1ml，摇匀，每个试管各加5%苯酚水溶液1.2ml混匀，再迅速加入4ml浓硫酸，振摇10min，在25℃水浴保温放置30min。以水作空白在488.4nm处测定各标准液的吸收度，得回归方程A=0.0983C+0.0.0926（r=0.9994）。其在1～20.6μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系。2.4换算因素测定精密称取干燥的平白术多糖20mg，用蒸馏水溶解后定容至100ml，作为多糖储备液。精确量取多