多糖含量测定的几种不同方法比较

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1、淮北煤炭师范学院信息学院2012级学士学位论文多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:20081853021姓名:姜玉龙指导教师:查岭生指导教师职称:讲师2012年5月10日II多糖含量测定的几种不同方法比较姜玉龙(淮北师范大学信息学院生物系)指导老师:査岭生摘要:本文综述了多糖含量测定的几种常用方法,主要有苯酚-硫酸法、3,5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考,并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。关键词:多糖;含量;测定;方法9Are

2、viewofdifferentmethodstothedeterminationofpolysaccharidesJIANGYulong(DepartmentofBiology,SchoolofInformation,HuaibeiNormalUniversity)TutoredbyZHALingshengAbstract:Paperreviewedsomedifferentmethodstothedeterminationofpolysaccharides,initphenol-vitriolmethod,3,5-twonitrosalicylicacid(DNS)method,anthro

3、ne-vitriolmethod,chromatography,infraredspectrumquantitativeanalysisandetchadbeendealedwith.Andtheadvantagesanddisadvantagesofthesemethodsareanalyzedandcompared.Itprovidedsomerelatedinformationandbasedtheoriestothedeterminationofpolysaccharidescontent.Keywords:polysaccharides;content;determination;m

4、ethods9目录中文摘要I英文摘要II1前言12化学法测定多糖含量12.1苯酚-硫酸法12.23,5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)22.3蒽酮-硫酸法23色谱法测定多糖含量的研究33.1气相色谱法(GC)33.2液相色谱法(HPLC)33.3薄层色谱法(TLC)44其他方法44.1红外光谱定量分析多糖法44.2生物传感器法55结论56展望6参考文献6致谢991前言多糖(polysaccharides,PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。多糖包含均多糖(homosaccharide)和杂多糖(heterosaccharide)。前者是由同一种单糖组成,后者则是由两种以上不同

5、的单糖组成。多糖除含有单糖外,还含有糖醛酸、氨基糖、糖醇、脱氧糖等基团。多糖按来源可分为动物多糖、植物多糖、微生物多糖和藻类多糖;按酸碱性可分为酸性多糖、中性多糖及碱性多糖;按溶解性可分水溶性多糖、水不溶性多糖、酸性多糖和碱性多糖等[2]。多糖的研究是现代药学研究的热点之一,多糖具有多种功效,经研究表明其在免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗溃疡、降低胆固醇、降血压以及抗血栓等多方面具有良好的药理活性。在多糖工业生产过程中,常需对多糖的含量进行测量和监控,由于多糖的种类繁多,多糖含量和存在形式也多变。因此,选择适当的多糖分析方法十分重要。传统的多糖含量测定方法为苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法,但这两种方法测

6、定步骤繁琐,而且只能测定样品中总糖的含量,若样品中含有单糖,则会使测定结果偏高;再者硫酸具有严重的腐蚀性,苯酚极易氧化,给实验操作带来极大不便。3,5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)具有操作简便、快速、灵敏度高、杂质干扰较小等优点,近年来逐渐被应用于植物药、中成药、海洋生物药等药物中多糖含量的测定[3-5]。本文综述了多糖测定的几种常用方法,并对其优缺点进行了比较。这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考,并为多糖的更深入研究提供部分理论基础。2化学法测定多糖含量2.1苯酚-硫酸法在多糖的定量分析中,苯酚-浓硫酸法是被广泛应用的方法之一[6]。其原理是多糖在浓硫酸作用下水解成单糖并迅速脱水生成糠

7、醛衍生物,与苯酚缩合成有色化合物,以葡萄糖为标准品,然后用紫外分光光度计在约490nm处测定光吸收值与糖浓度的线性关系,进而对样品定量,所得的测定结果是以葡萄糖含量计的多糖含量。该方法具有操作简单、快速、重复性好,显色后稳定性较好等优点,但对有色样品结果易偏高。苯酚-硫酸比色法主要用于甲基化的糖、戊糖、寡糖类以及多聚糖的测定。甚至可以用于糖肽和糖蛋白的测定[7-8]。此法优势在于可以进行大量样品的

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