不同年龄小鼠脑组织中谷胱甘肽系统的比较

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1、不同年龄小鼠脑组织中谷胱甘肽系统的比较作者：梁青宁夏玉叶盛雨辰闵旸蒋萍季莉莉【摘要】　　目的探讨不同年龄小鼠脑组织中谷胱甘肽(GSH)含量及相关酶活性的差异。方法比较3，8和24周龄小鼠脑组织中GSH含量及GSH合成酶(GCL)、GSH还原酶(GR)、GSH过氧化物酶(GSHPx)和GSH巯基转移酶(GST)活性的差异。结果不同年龄小鼠脑内GSH含量、GCL和GR活性无明显变化。8和24周龄小鼠脑内GSHPx明显低于3周龄组。24周龄小鼠脑内GST活力明显高于3和8周龄。结论小鼠脑内GSH含量及其合成相关的GCL和GR活性不

2、随年龄明显改变，而GSH依赖的抗氧化酶GST和GSHPx的活性则具有明显差异。【关键词】谷胱甘肽；谷胱甘肽合成酶；谷胱甘肽还原酶；谷胱甘肽过氧化物酶；谷胱甘肽巯基转移酶【Abstract】ObjectiveToinvestigatethedifferenceofglutathionecontentsandtheactivitiesofglutathionerelatedenzymesinmicebrainsofdifferentage.MethodsThemiceiceineachgroup.Theglutathioneco

3、ntents，andtheactivitiesofglutamatecystEineligase(GCL)，glutathionereductase(GR)，glutathioneperoxidase(GSHPx)，glutathioneStransferase(GST)icebrainsofdifferentage.ResultsThereice.Hoicebrainsesinmicebrainsofdifferentage，suchasGSTandGSHPx.【Keya；BioTekPoited)。　　1.2方法　　

4、1.2.1DTNB法测定脑组织内GSH含量　　小鼠脑组织在冰冷的加有偏磷酸的磷酸缓冲液中匀浆，4℃，10000r/min，离心10min，吸取上清用于GSH含量的测定。反应体系由磷酸缓冲液(pH7.0)，EDTA，NADPH，GR酶，DTNB和样品组成，25℃反应30min后在412nm处测定吸光值，代入已测定的标准曲线中获得GSH含量。应用考马斯亮蓝法测定检测样品中的蛋白浓度，以小牛血清白蛋白(BSA)为标准。结果以GSH含量/mg蛋白表示。　　1.2.2GCL活性测定　　小鼠脑组织在冰冷的PBS中匀浆，4℃，5000r/mi

5、n，离心5min，吸取上清用于GCL活力的测定。GCL活力测定参考　　2.2不同年龄小鼠脑组织中GSHPx活性变化　　3周龄组脑内GSHPx活力为（4.573±0.248）U/mg蛋白；8周龄组为（3.784±0.198）U/mg蛋白；24周龄组为（3.767±0.270）U/mg蛋白。8和24周龄小鼠脑内SHPx活力均明显低于3周龄组(P<0.05)，而8和24周龄组间无显著差异(P>0.05)。说明随着增龄，脑内GSHPx抗氧化酶活性逐渐降低。　　2.3不同年龄小鼠脑组织中GST活性的变化　　3周龄组脑内

6、GST的活力为（173.907±10.364）U/mg蛋白；8周龄组为（183.278±8.133）U/mg蛋白；24周龄组为（227.383±17.127）U/mg蛋白。24周龄组小鼠脑内GST活力明显高于3周龄组(P<0.01)；同时24周龄组与8周龄组相比也有显著差异(P<0.05)，说明随着增龄，脑内GST活性会有显著增加。　　3讨论大量的实验数据表明老年动物对某些毒性物质比较敏感，在相同剂量的外来毒物之下比较容易产生毒性〔7〕。这可能是由于老年动物对某些毒性物质的解毒能力、解毒速度以及脑组织的修复能力、细胞

7、增殖能力弱于成年和幼年〔8〕，其具体的机制目前还不是很清楚。机体内的氧化应激是导致脑部疾病的重要原因，有