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时间:2019-03-02
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1、河北医科大学硕士学位论文不同频率电针对血管性痴呆小鼠脑保护作用的比较研究姓名:刘晓红申请学位级别:硕士专业:针灸推拿学指导教师:张会珍201203中文摘要不同频率电针对血管性痴呆小鼠脑保护作用的比较研究摘要目的:观察2Hz、80Hz和2/80Hz三种不同频率电针对血管性痴呆(VascularDementia,VD)模型小鼠的治疗效应并进行比较,探讨电针治疗VD的适宜频率及其作用机制,为针灸临床治疗VD提供科学的电针刺激参数。方法:1不同频率电针对血管性痴呆小鼠行为学及海马CAl区神经细胞病理形态学的影响将昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、电针2Hz组、电针80Hz组
2、、电针2/80Hz组六组,以反复阻断双侧颈总动脉加尾部放血法复制缺血再灌注VD模型。假手术组小鼠分离颈总动脉,不阻断血流,尾部不放血。术后第4d开始进行治疗。电针组选取“百会”、“大椎”、“膈俞"、“足三里”穴,毫针刺入,接电针仪,分别施以连续波,频率2Hz、80Hz及疏密波2/80Hz,每次10min,每日1次。尼莫地平组灌胃30mg/kg/日。于治疗15d后,进行跳台实验和水迷宫实验检测学习成绩,次日检测记忆成绩。行为学测试结束后,颈椎脱臼处死小鼠,冰盘上快速取脑。将左脑视交叉至乳头体组织浸入4%多聚甲醛固定,常规HE染色,光镜下观察小鼠脑组织海马CAl区锥体细胞的形态学改
3、变。2不同频率电针对血管性痴呆小鼠海马组织CGRP、NOS、MDA、SOD及TChE的影响分组、造模及治疗方法均同1。小鼠处死后,冰盘上快速取脑,分离出右侧海马组织,加入生理盐水制成10%的组织匀浆,于4℃下,4000r/min离心20min,取上清液,用双缩脲法测定蛋白含量,采用放射免疫分析法测定海马组织CGRP含量,分光光度法测定NOS、Teb.E活性,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫代巴比妥酸比色分析法测定MDA含量。3不同频率电针对血管性痴呆小鼠海马CAl区神经细胞促凋亡蛋白酶Caspase.3阳性表达及平均光密度值的影响中文摘要分组、造模及治疗方法均同l。行为学测试结
4、束后,颈椎脱臼处死小鼠,冰盘上快速取脑,将左脑视交叉至乳头体组织浸入4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,冠状切片,厚5um,每个标本切片5张,随机取3张,采用免疫组织化学SABC法检测Caspase.3在海马CAl区神经细胞中的阳性表达,并观察不同频率电针对其阳性表达及平均光密度值的影响。所有数据均采用SPSS软件进行分析处理。结果:1不同频率电针对血管性痴呆小鼠行为学及海马CAl区神经细胞病理形态学的影响1.1行为学检测结果小鼠跳台实验结果显示:模型组小鼠反应时间延长,潜伏期缩短,错误次数增加,与假手术组比较差异具有显著性统计学意义(P<0.01);电针和尼莫地平治疗均可缩短反应时间
5、,延长潜伏期,降低错误次数,与模型组比较,差异有统计学意义(P6、异(尸<0.05或P<0.01);2Hz组与2/80Hz组比较无差异(胗O.05);尼莫地平与80Hz组比较无差异(胗O.05)。1.2不同频率电针对VD模型小鼠海马CAl区神经细胞病理形态学的影响海马CAl区HE染色,光镜下一般形态学观察示:模型组小鼠锥体细胞脱失严重,排列紊乱,形状欠规则,细胞核质不均匀,核固缩严重;各治疗组病变较模型组均有改善,尼莫地平组与80Hz组,细胞脱失减轻,排列仍欠规整,细胞近似圆形,细胞核质不均匀;2Hz组细胞排列紧密,稍欠规整,细胞近似圆形,细胞核质较均匀;2/80Hz组仅见少量细胞脱失,排列致密规整,细胞圆形,细胞核清晰,核质均匀。2不同频率7、电针对血管性痴呆小鼠海马组织CGRP、NOS、MDA、SOD中文摘要及TchE的影响模型组CGRP含量降低,与假手术组比较有显著统计学差异(P<0.01);各治疗组CGRP含量较模型组均有提高衅O.05或P<0.01);其中2Hz组、2/80Hz组作用较明显,与尼莫地平组、80Hz组比较有显著统计学差异(户
6、异(尸<0.05或P<0.01);2Hz组与2/80Hz组比较无差异(胗O.05);尼莫地平与80Hz组比较无差异(胗O.05)。1.2不同频率电针对VD模型小鼠海马CAl区神经细胞病理形态学的影响海马CAl区HE染色,光镜下一般形态学观察示:模型组小鼠锥体细胞脱失严重,排列紊乱,形状欠规则,细胞核质不均匀,核固缩严重;各治疗组病变较模型组均有改善,尼莫地平组与80Hz组,细胞脱失减轻,排列仍欠规整,细胞近似圆形,细胞核质不均匀;2Hz组细胞排列紧密,稍欠规整,细胞近似圆形,细胞核质较均匀;2/80Hz组仅见少量细胞脱失,排列致密规整,细胞圆形,细胞核清晰,核质均匀。2不同频率
7、电针对血管性痴呆小鼠海马组织CGRP、NOS、MDA、SOD中文摘要及TchE的影响模型组CGRP含量降低,与假手术组比较有显著统计学差异(P<0.01);各治疗组CGRP含量较模型组均有提高衅O.05或P<0.01);其中2Hz组、2/80Hz组作用较明显,与尼莫地平组、80Hz组比较有显著统计学差异(户
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