水龙骨体外抗肝癌作用研究论文

《水龙骨体外抗肝癌作用研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、水龙骨体外抗肝癌作用研究论文王玉亮吕晶张磊辛海量【摘要】目的研究水龙骨对人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721的生长增殖抑制作用。方法制备水龙骨含药血清，用MTT法观察细胞增殖情况。结果水龙骨含药血清在体外对人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721均有抑制作用，对HepG2的最高抑制率为87.4％，对SMMC7721的最高抑制率为85.9％，抑制肝癌细胞的效果优于含5-氟尿嘧啶血清。结论水龙骨对肝癌细胞的体外增殖有明显的抑制作用。【关键词】水龙骨；人肝癌细胞株；抗癌效应；大耳白免；含药血清Abstract：ObjectiveToobservetheinhibitoryactionofP

2、olypodiodesniponicaontheproliferationofHCCcelllineHepG2,SMMC-7721invitro.MethodsTheserologicpharmacologicalmethodandMTTassayeinhibitoryeffectontumorcellproliferationinvitro．TheproliferationofHepG2、SMMC-7721cellsaceuticserum水龙骨始载于《本草纲目拾遗》，以草石蚕名之《植物名实图考》名之水龙骨，列入石草类，来源为水龙骨科植物水龙骨Polypodiodesniponica(Met

3、t.)Ching的干燥根茎.freelg/kg灌胃给药；水龙骨组，每日按生药量计10g/kg灌胃。10d后，于最后1次灌药后1h(灌药前禁食12h)，乙醚麻醉，颈动脉采血，无菌分离血清，经过56℃，30min灭活后，置-20℃冰箱保存备用。2.2肿瘤细胞悬液制备将冻存的人肝癌细胞HepG2、SMMC-7721按常规方法复苏，接种于含10％小牛血清的DMEM培养液中，传代培养，至细胞呈指数生长期时，弃培养液，加入0.25％胰蛋白酶消化3min，用DMEM培养液中止消化后弃去，重新加入含10％小牛血清的DMEM培养液吹打，调整细胞数为1×10/ml，接种于96孔培养板，每孔加细胞悬液90μl。2.

4、3MTT法检测将培养的细胞接种于96孔的培养板中，置于饱和湿度的CO2培养箱中继续培养24h（37℃、5％CO2），弃去培养液，然后每孔加入DMEM培养液70μl，空白组加入不含药的空白兔血清30μl；阳性药组加入含5-氟尿嘧啶血清30μl；水龙骨组分3个剂量组：大剂量组加30μl兔含药血清，中剂量组加20μl兔含药血清及10μl的小牛血清，小剂量组加10μl兔含药血清及20μl的小牛血清。继续培养24h，每孔加入MTT溶液，37℃孵育4h，吸去每孔中的培养液，每孔加入二甲基亚砜(DMSO)，振荡后采用酶联免疫反应检测仪测定各孔OD值，测定波长为570nm，调零孔只含有DMSO。所得各孔平均O

5、D值按下述公式计算肿瘤细胞抑制率：抑制率(％)=(对照组平均OD值-给药组平均OD值)/对照组平均OD值×100％。2.4统计学方法数据以±s表示。进行t检验及方差分析。3结果3.1对人肝癌细胞HepG2的作用结果表明水龙骨对HepG2有明显的抑制作用，高、中、低浓度含药血清的OD值与空白血清组对照差异均有显著性意义，高浓度含药血清的抑制率可达87.4％，高于5-氟尿嘧啶血清组（见表1）。表1水龙骨对HepG2肝癌细胞的作用（略）与空白组比较，**P4讨论我国是一个肝炎大国，乙型肝炎病毒携带者超过1亿。研究表明乙型肝炎病毒是肝细胞癌变的主要原因［5］，原发性肝癌患者HBV感染率高达89.6％～

6、95％［6］。因此对肝癌的防治应兼顾对乙型肝炎的治疗。水龙骨在民间被广泛用于肝炎的治疗，效果显著，并对肝癌和肝腹水有一定的疗效。本研究采用了血清药理学方法，避免了将中药复方粗提物直接加入反应体系进行实验所得结果的偏倚，从而提高实验结果的可信度。实验结果证实水龙骨在体外能显著抑制肝肿瘤细胞的生长，提示水龙骨是一种很有潜力的抗癌药物，值得更深入地研究。【