八角中的莽草酸体外抗肝癌作用及其机制初步研究

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1、分类号R285.5学校代码10601密级公开编号Y1001021硕士学位论文八角中的莽草酸体外抗肝癌作用及其机制初步研究学科专业病理学与病理生理学:天然药物抗肿瘤研究方向:研究生姓名顾小文:学号Y1001021:学位类型科学学位:导师姓名朱开梅教授:二O一三年四月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我

2、一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日----------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术

3、期刊（光盘版）电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日目录八角中莽草酸对人肝癌HepG-2细胞体外作用及其机制的研究………1中文摘要………………………………………………………………1ABSTRACT……………………………………………………………3英汉缩略词对照表…………………………………………………6前言……………………………

4、………………………………………7第一部分微波辅助提取八角中莽草酸的工艺研究1、实验材料与仪器……………………………………………………102、实验方法…………………………………………………………103、结果………………………………………………………………124、讨论………………………………………………………………17第二部分莽草酸对人肝癌HepG-2细胞体外增殖与凋亡的研究1、实验材料与仪器……………………………………………………192、实验方法…………………………………………………………203、结果……………………………………………

5、…………………244、讨论………………………………………………………………27第三部分八角中莽草酸对人肝癌HepG-2细胞周期的影响1、实验材料与仪器……………………………………………………292、实验方法……………………………………………………………313、结果…………………………………………………………………324、讨论………………………………………………………………33第四部分八角中莽草酸对人肝癌细胞株HepG-2细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响1、实验材料与仪器……………………………………………………352、实验方法……

6、……………………………………………………373、结果…………………………………………………………………394、讨论…………………………………………………………………41全文结论…………………………………………………………44参考文献………………………………………………………………45综述……………………………………………………………………51八角中的莽草酸体外抗人肝癌HepG-2细胞作用及其机制初步研究中文摘要目的：研究八角中的莽草酸对人肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡作用的影响。观察不同浓度的莽草酸对人肝癌HepG-2细胞的增殖与凋

7、亡、细胞周期及凋亡因子Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。初步探讨莽草酸抗肿瘤作用机制，为临床开发新型的抗肿瘤药提供参考。方法：1、采用微波辅助提取法，提取八角中莽草酸，将提取物进一步进行分离测定。2、应用噻唑蓝（methylthiazolyltetrazolium,MTT）法测定不同浓度的莽草酸作用不同时间（24h、48h、72h）对人肝癌HepG-2细胞的生长抑制率。3、在倒置显微镜下观察不同浓度的莽草酸作用人肝癌HepG-2细胞后的形态学变化。4、采用hoechest33342荧光染色观察不同浓度莽草酸作用于人肝癌HepG-2细

8、胞48h后细胞凋亡形态变化。5、FCM分析不同浓度莽草酸对人肝癌HepG-2细胞周期的影响。6、免疫组织化学方法检测人肝癌HepG-2细胞经莽草酸作用后Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果：1、微波辅助提取八角中莽草酸，经过分离纯化后