非小细胞肺癌中elf1的表达及意义论文

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1、非小细胞肺癌中Elf1的表达及意义论文孔丽君项锋钢杨东霞【摘要】目的探讨转录因子Elf1在非小细胞肺癌中表达的意义。方法收集72例非小细胞肺癌组织，应用组织芯片仪制备组织芯片，采用免疫组化Poallcelllungcancer(NSCLC)anditsclinicalsignificance.MethodsTissuemicroarrayfrom72casesofNSCLCmunohistochemistrystainingethod.ResultsElf1ostlyexpressedinnucleusandin

2、cytoplasm.PositiveElf1phnodemetastasisthanthatorsizeandhistologicaltype(P0.05).ConclusionElf1mayplayaroleinNSCLC,andmayserveasanimportantparameterforevaluatingitsmalignancy,invasionandmetastasis.［KEYarker）。两个蜡块阵列设计均为6行×8列，分别包含48和26个组织芯，组织芯之间的间距为1mm。N1包含1例Mark

3、er和47例NSCLC组织，N2包含1例Marker和25例NSCLC组织。应用组织芯片制作仪制备48（6×8）点阵列的NSCLC组织芯片蜡块2个，即由72例NSCLC标本组成的组织芯片一套。1.3.2PV9000免疫组化检测方法石蜡切片脱蜡，系列乙醇水化至蒸馏水；体积分数0.03过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，微波修复，1∶100兔抗人Elf1抗体依次滴加试剂Ⅱ、Ⅲ孵育，DAB显色，镜下观察，自来水终止显色。Mayer苏木精复染，中性树胶封片。阴性对照省略Ⅰ抗，以PBS代替；阳性对照用已知阳性片按上述步骤操作。1

4、.4结果判定以肺癌细胞核及胞质内呈棕黄色颗粒状着色为Elf1表达阳性；每张切片随机选取10个高倍（400倍）视野，每个高倍视野计数100个癌细胞，观察阳性细胞染色强度，并计数阳性细胞。首先按染色强度计分：无染色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，深棕黄或棕褐色为3分。再按阳性细胞百分率计分：≤5％为0分；6％～30％为1分；31％～70％为2分；≥71％为3分。以阳性细胞百分率计分和强度计分相加所得总分进行结果判断，0分为阴性（-），1～2分为弱阳性（+），3～4分为中阳性（），5～6分为强阳性（）。2结果2.

5、1组织芯片质量组织芯片排列整齐，无缺损现象，苏木精伊红染色的组织点阵排列整齐。2.2Elf1在NSCLC中的表达Elf1在细胞阳性染色为棕黄色，颗粒状，定位于NSCLC细胞核及胞质。Elf1在72例NSCLC中，19例表达为(－)，25例为(+)，19例为()，9例为()。Elf1阳性表达率为73.61%。2.3Elf1表达与NSCLC病人临床病理特征间的关系不同组织学分级的NSCLC组织中Elf1的表达强度差异有显著性（χ2=8.274，P0.05）。其中Ⅰ、Ⅱ级，Ⅰ、Ⅲ级间比较差异有显著性（P=

6、0.046、0.013），而Ⅱ、Ⅲ级间差异无显著性（P=0.299）。Elf1的表达增强与NSCLC易发生淋巴结转移有关，淋巴结有转移组Elf1的表达强度显著高于淋巴结无转移组（Z=-3.316，P0.01）。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期NSCLC组织中Elf1的表达强度差异有显著性(χ2=-4.556～-2.501，P0.01)。Elf1的表达与病人的年龄、性别、原发瘤大小及组织病理学类型均无关。见表1。表1Elf1在NSCLC中的表达与病人临床病理特征间的关系（略）3讨论组织芯片技术又称组织微阵列（TMA），是近年来发

7、展起来的以形态学为基础的分子生物学新技术，是在一张切片上高通量获取组织学、基因和蛋白表达信息的新方法。SCHRAML等曾在一张切片上完成了来自人体的17类397例不同组织学类型肿瘤3个基因扩增的FISH检测。目前国内已有应用TMA对前列腺癌、乳癌、食管癌、结直肠癌等不同肿瘤进行研究的报道，也无不体现出它平行、高效、节约病理资源的特点［2］。TMA与传统的病理学技术、组织化学及免疫组织化学技术相结合，具有广阔的应用前景。本实验应用组织芯片技术检测72例NSCLC组织中Elf1的表达水平，以阐明其可能的病理作用。Elf

8、1具有复杂的结构和功能，其活性是通过与Rb蛋白结合的相互作用来调控，并且这种相互作用反过来能调控细胞周期依赖方式，Elf1可能是一个在特定细胞周期基因表达中的重要调控因子［3］，通过调节尿苷酰基磷酸腺苷uPA和Tie2启动子基因在肿瘤浸润和血管生成发育过程中起重要作用。研究表明，Elf1在子宫内膜癌组织中、前列腺癌组织中均有表达，而在正常