胰岛素在大鼠深慢波睡眠调节中的作用

《胰岛素在大鼠深慢波睡眠调节中的作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、胰岛素在大鼠深慢波睡眠调节中的作用作者：张瑾李春华汪凯尹豆王烈成赵乐章张景行【摘要】目的探讨胰岛素对大鼠睡眠特别是深慢波睡眠的影响。方法根据SD大鼠海马CA1区注射试剂及剂量的不同，分为对照组、0.05IU胰岛素组、0.1IU胰岛素组和0.2IU胰岛素组；采用脑立体定位、核团插管、微量注射和多导睡眠描记技术观察海马CA1区微量注射胰岛素对大鼠睡眠觉醒周期的影响。结果海马CA1区微量注射0.05IU的胰岛素对大鼠睡眠觉醒周期及睡眠的深度无明显影响。微量注射0.1IU的胰岛素后，觉醒时间减少，总睡眠时间增

2、多；与对照组比较，慢波睡眠时间增加18.1%（P<0.05），且主要是浅慢波睡眠成分增加22.0%（P<0.01）。微量注射0.2IU的胰岛素后，觉醒时间减少，总睡眠时间增多，睡眠加深；与对照组比较，慢波睡眠时间增加29.8%（P<0.01），其中浅慢波睡眠时间增加21.6%（P<0.01），深慢波睡眠时间增加53.2%（P<0.05）。结论胰岛素在海马参与睡眠的调节且具有促眠作用，胰岛素对大鼠睡眠深度的影响与注射的剂量呈正相关。【关键词】胰岛素；海马；睡眠；多导睡眠描记术多

3、导睡眠图研究发现老年人、原发性失眠症和精神障碍引起的睡眠紊乱，其特征均表现为深慢波睡眠时间减少甚或缺如，可见深慢波睡眠在正常睡眠和睡眠障碍中起着极为重要的作用。Valatx等〔1〕报道表达人胰岛素基因的转基因小鼠慢波睡眠明显增加，提示胰岛素可能为调节睡眠的物质之一。中枢神经系统中广泛存在胰岛素受体，但胰岛素参与睡眠调节的具体机制目前尚不清楚。胰岛素在海马内参与学习、记忆功能的调节〔2〕，海马又是与睡眠调节密切相关的脑区。本研究通过脑立体定位技术、多导睡眠描记技术和海马微量注射等方法，探讨胰岛素在大鼠睡眠调

4、节特别是深慢波睡眠调节中的作用。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1动物SPF级雄性成年SD大鼠43只，体重200～250g，由安徽医科大学实验动物中心提供。大鼠随机分为对照组、0.05、0.1和0.2IU胰岛素组，每组9只。单独饲养，活动不受限制，自由摄食与饮水。所有大鼠均置于明/暗各12h（光照06∶00～18∶00）的通风环境中，室温维持在20℃～24℃，安静环境下饲养适应环境7d。　　1.1.2仪器及试剂SN2型脑立体定位仪（日本TokyoNarishige科学仪器实验室生产），ND8

5、2B型八导脑电图仪（上海医疗器械厂生产），XSD02型光学显微镜（上海光学仪器厂生产）。戊巴比妥钠（上海化学试剂采购供应站分装厂进口分装），用蒸馏水配置成8g/L溶液。生物合成人胰岛素注射液（100IU/ml，丹麦诺和诺德公司）。　　1.2方法　　1.2.1大鼠海马CA1区插管及记录电极安装大鼠经戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔注射麻醉后，将头部固定于脑立体定位仪上，暴露颅骨，双氧水清洁颅骨表面，将外径为0.6mm的不锈钢引导管按Paxinos和m、L/R:±5.0mm、H:7.0mm），引导管顶端距海

6、马CA1区1mm，供海马内微量注射药物和毁损用。在冠状缝前1mm及人字缝前1mm与颅骨中线两侧旁开1mm交叉点处分别安装铜质螺丝钉，穿透颅骨接触到硬脑膜，用于记录皮层脑电活动。在双侧颈肌内插入银丝电极用于记录肌电活动。插管与记录电极均以牙科水泥固定于颅骨上，并将脑电和肌电电极通过电线连接到微型插座上，大鼠术后置隔音、自动控制光照记录室中休息1in，期间模拟将药物微量注射入引导管的操作（只是在引导管中插入空的微量注射器），适应训练每天上午09∶00进行，连续7d。　　1.2.3药物微量注射方法在清醒待记录状

7、态下进行微量注射，注射时间为上午09∶00。用尖端外径为0.3mm的微量注射器通过引导管向大鼠双侧海马内注射生理盐水1μl（对照组）和0.05、0.1、0.2IU的胰岛素（实验组），在20s内注射完毕，留针1min以防药液溢出。　　1.2.4多导睡眠图记录方法记录电极通过微型插座连接到ND82B型八导脑电图仪上，用于同步记录脑电和肌电活动。记录前1d进行连接以适应记录状态。为了尽可能避免大鼠24h睡眠觉醒周期的影响，每次描记均从10∶00开始，连续记录4～6h。　　1.2.5资料分析采用30s为一分段

8、时间，将睡眠觉醒周期分为3期：(1)觉醒期（m的单极不锈钢电极插入引导管，通以2.5mA阳极直流电10s电损毁被注射的核团，2in和（61.8±15.1）min，与对照组〔（103.9±29.0）min〕比较，分别减少23.8%和40.5%，有显著性差异（P＜0.05或P<0.01）；0.1IU胰岛素组和0.2IU胰岛素组TST为（160.8±16.3）min和（178.2±15.1）min，与对照组〔（124.9±4