水芹提取物对小鼠学习记忆促进作用的影响

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1、水芹提取物对小鼠学习记忆促进作用的影响作者:张红英张顺兴秦孝智【关键词】水芹;,,学习记忆;,,回避反应;,,超氧化物歧化酶;,,丙二醛;,,小鼠  摘要:目的:研究探讨水芹提取物对小鼠学习记忆及超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的影响。方法:采用跳台和避暗法及测定SOD活性、MDA含量的方法,观察水芹提取物对小鼠学习记忆以及SOD活性、MDA含量的影响。结果:水芹提取物可明显改善东莨菪碱、氯霉素、乙醇3种化学药物所致记忆障碍,亦可提高红细胞中SOD活性,降低肝脏组织中MDA含量。结论:水芹提取

2、物具有一定改善学习记忆的作用,其作用可能与提高SOD活性,降低MDA的含量有关。  关键词:水芹;学习记忆;回避反应;超氧化物歧化酶;丙二醛;小鼠水芹为伞形科植物,全草性味甘辛、凉,功能清热利水[1]。主治黄疸性肝炎,水肿[2],对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用[3],并有抗脂质过氧化作用[4],该实验进一步探讨了水芹提取物(以下简称Sf-E)对小鼠学习记忆及超氧化物歧酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的影响。  1材料与仪器  1.1动物  昆明种小鼠,体重(21±2)g,雌雄兼用,由延边大学医学部实验

3、动物科供应,合格证号(10-1022),训练前在实验室适应环境1d以上。  1.2药品与试剂水芹OenantheStolonifera(Roxb)DA含量测定取小鼠30只,随机分为对照组,Sf-E(10g/kg)组和Sf-E(5g/kg)组,每组10只。连续ig25d,1次/d。末次给药1h后取血,测定SOD的活性[7]和MDA的含量[7]。  2.2行为实验模型采用一次性被动回避反应(Onetriapassiveavoidanceresponcse)-跳台法和避暗法[5]。  2.2.1跳台法实验装置为小鼠跳

4、台反应箱,体积为30cm×12cm×30cm,分为3室,底面为可通电的铜栅。训练时置小鼠于反应箱内适应3min,然后通以36V连续电刺激5min,小鼠受到电击后的正常逃避反应为跳上橡皮台(安全区)。记录5min内动物跳下橡皮台的次数作为训练期错误次数。24h后在底部铜栅通电的情况下,依前法将动物轻置于橡皮台上,记录3min内的电击次数作为测验期错误次数,为主要观察指标。  2.2.2避暗法小鼠避暗箱大小为36cm×12cm×12cm,分为前部明室和后部暗室两部分,两室间有直径3cm的空洞相通。底部为铜栅,后半部

5、暗室通以40V电压。训练时将小鼠背对洞口放入明室。开始计时,从小鼠放入至钻进暗室触电的时间,为训练时潜伏期,同时观察小鼠5min内进入暗室的次数。24h后进行测验,记录每只小鼠第1次进入暗室的潜伏期和5min内进入暗室的次数。  2.3红细胞中SOD活性的测定取小鼠血50μl放入(50u肝素)刻度试管内,2000r/min,离心3min,用玻璃吸管吸取上清液,然后加入双蒸水0.2ml混匀,再加入95%乙醇0.1ml振荡30s,加入三氯甲烷0.1ml置旋涡混匀器,抽提1min,3000r/min,离心3min,上

6、层为SOD抽提液,中层为血红蛋白沉淀物,下层为三氯甲烷,记录上层液体,取10μl做SOD活力测定[7]。  2.4肝脏组织中MDA含量的测定取5%肝组织匀浆液0.2ml,加入8.1%十二烷基硫酸钠(SDS)0.2ml,pH3.5的20%醋酸1.5ml。0.8%TBA1.5ml,加双蒸水至4.0ml,置95℃水浴箱加热1h,自来水冷却后再加蒸馏水1.0ml,然后加入正丁醇-吡啶(15:1,v/v)混合溶剂5.0ml.振荡1min,离心取上层有机液相,于532nm波长测定吸收度。计算组织中MDA含量(F:TEP标准

7、应用液的吸收度,f:样本的吸收度)。  3结果  3.1Sf-E对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍的影响  3.1.1跳台法Sf-E(10g/kg)组可对抗训练前10min,ip东莨菪碱(3mg/kg)所造成的小鼠学习记忆获得障碍,表现为跳台法错误次数与东莨菪碱组相比显著减少,经统计有显著性差异(P<0.05).结果见表1。表1跳台法实验观察结果(略)  3.1.2避暗法Sf-E(10g/kg,5g/kg)连续ig9d,可对抗训练前10min,ip东莨菪碱(3mg/kg)所造成的小鼠学习记忆获得障碍,表现为避暗法的

8、错误次数显著减少,并且潜伏期显著延长.结果见表2。表2避暗法实验观察结果(略)  3.2Sf-E对氯霉素所致小鼠记忆巩固不良的影响  3.2.1训练前10min,ip氯霉素(200mg/kg)使小鼠在避暗法中的错误次数显著增加,Sf-E(10g/kg)组连续ig9d,可对抗氯霉素所致的记忆巩固障碍。结果见表3。表3Sf-E对氯霉素所致小鼠记忆巩固不良的影响(略)  3.3Sf-E对40

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