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1、水芹提取物对小鼠学习记忆促进作用的影响作者：张红英张顺兴秦孝智【关键词】水芹；,,学习记忆；,,回避反应；,,超氧化物歧化酶；,,丙二醛；,,小鼠 摘要：目的：研究探讨水芹提取物对小鼠学习记忆及超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的影响。方法：采用跳台和避暗法及测定SOD活性、MDA含量的方法，观察水芹提取物对小鼠学习记忆以及SOD活性、MDA含量的影响。结果：水芹提取物可明显改善东莨菪碱、氯霉素、乙醇3种化学药物所致记忆障碍，亦可提高红细胞中SOD活性，降低肝脏组织中MDA含量。结论：水芹提取
2、物具有一定改善学习记忆的作用，其作用可能与提高SOD活性，降低MDA的含量有关。 关键词：水芹；学习记忆；回避反应；超氧化物歧化酶；丙二醛；小鼠水芹为伞形科植物，全草性味甘辛、凉，功能清热利水［1］。主治黄疸性肝炎，水肿［2］，对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用［3］，并有抗脂质过氧化作用［4］，该实验进一步探讨了水芹提取物（以下简称Sf-E）对小鼠学习记忆及超氧化物歧酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的影响。 1材料与仪器 1.1动物 昆明种小鼠，体重（21±2）g，雌雄兼用，由延边大学医学部实验
3、动物科供应，合格证号（10-1022），训练前在实验室适应环境1d以上。 1.2药品与试剂水芹OenantheStolonifera(Roxb)DA含量测定取小鼠30只，随机分为对照组，Sf-E（10g/kg）组和Sf-E（5g/kg）组，每组10只。连续ig25d，1次/d。末次给药1h后取血，测定SOD的活性［7］和MDA的含量［7］。 2.2行为实验模型采用一次性被动回避反应（Onetriapassiveavoidanceresponcse）-跳台法和避暗法［5］。 2.2.1跳台法实验装置为小鼠跳
4、台反应箱，体积为30cm×12cm×30cm，分为3室，底面为可通电的铜栅。训练时置小鼠于反应箱内适应3min，然后通以36V连续电刺激5min，小鼠受到电击后的正常逃避反应为跳上橡皮台（安全区）。记录5min内动物跳下橡皮台的次数作为训练期错误次数。24h后在底部铜栅通电的情况下，依前法将动物轻置于橡皮台上，记录3min内的电击次数作为测验期错误次数，为主要观察指标。 2.2.2避暗法小鼠避暗箱大小为36cm×12cm×12cm，分为前部明室和后部暗室两部分，两室间有直径3cm的空洞相通。底部为铜栅，后半部
5、暗室通以40V电压。训练时将小鼠背对洞口放入明室。开始计时，从小鼠放入至钻进暗室触电的时间，为训练时潜伏期，同时观察小鼠5min内进入暗室的次数。24h后进行测验，记录每只小鼠第1次进入暗室的潜伏期和5min内进入暗室的次数。 2.3红细胞中SOD活性的测定取小鼠血50μl放入（50u肝素）刻度试管内，2000r/min，离心3min，用玻璃吸管吸取上清液，然后加入双蒸水0.2ml混匀,再加入95％乙醇0.1ml振荡30s，加入三氯甲烷0.1ml置旋涡混匀器，抽提1min,3000r/min，离心3min，上
6、层为SOD抽提液，中层为血红蛋白沉淀物，下层为三氯甲烷，记录上层液体，取10μl做SOD活力测定［7］。 2.4肝脏组织中MDA含量的测定取5％肝组织匀浆液0.2ml，加入8.1％十二烷基硫酸钠（SDS）0.2ml，pH3.5的20％醋酸1.5ml。0.8％TBA1.5ml,加双蒸水至4.0ml，置95℃水浴箱加热1h，自来水冷却后再加蒸馏水1.0ml,然后加入正丁醇-吡啶（15：1,v/v）混合溶剂5.0ml．振荡1min，离心取上层有机液相，于532nm波长测定吸收度。计算组织中MDA含量（F:TEP标准
7、应用液的吸收度，f:样本的吸收度）。 3结果 3.1Sf-E对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍的影响 3.1.1跳台法Sf-E（10g/kg）组可对抗训练前10min，ip东莨菪碱（3mg/kg）所造成的小鼠学习记忆获得障碍，表现为跳台法错误次数与东莨菪碱组相比显著减少，经统计有显著性差异(P＜0.05)．结果见表1。表1跳台法实验观察结果(略) 3.1.2避暗法Sf-E（10g/kg，5g/kg）连续ig9d，可对抗训练前10min，ip东莨菪碱（3mg/kg）所造成的小鼠学习记忆获得障碍，表现为避暗法的
8、错误次数显著减少,并且潜伏期显著延长．结果见表2。表2避暗法实验观察结果(略) 3.2Sf-E对氯霉素所致小鼠记忆巩固不良的影响 3.2.1训练前10min，ip氯霉素（200mg/kg）使小鼠在避暗法中的错误次数显著增加，Sf-E（10g/kg）组连续ig9d，可对抗氯霉素所致的记忆巩固障碍。结果见表3。表3Sf-E对氯霉素所致小鼠记忆巩固不良的影响(略) 3.3Sf-E对40
