海木提取物对小鼠学习记忆功能的影响论文

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1、海木提取物对小鼠学习记忆功能的影响论文李家洲,卢海啸,李金弟,黎建玲【摘要】目的探讨海木提取物对小鼠学习记忆功能的影响。方法运用避暗法、跳台法、Morris水迷宫法等方法检测海木枝叶不同萃取物对正常小鼠及盐酸氯丙嗪、亚硝酸钠、乙醇所致记忆障碍小鼠学习记忆能力的影响,并筛选出最高活性部位。结果①海木各提取部位均能延长小鼠避暗实验的潜伏期,减少错误次数,其中氯仿部位活性最高(P<0.01);②氯仿萃取物的中、大剂量组与对照组比较,能显著缩短正常小鼠定位航行实验中的逃避潜伏期.freelg∕2ml,上海禾丰制

2、药有限公司,生产批号:080502);亚硝酸钠(北京益利精细化学品有限公司,生产批号:991116);无水乙醇(分析纯)(广东光华化学厂有限公司,生产批号:20090115)。1.3仪器BA—200小鼠避暗仪,DT—200小鼠跳台测试箱,MT—200Morris水迷宫视频跟踪分析系统,均由成都泰盟科技有限公司提供,RE—200旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),SHZ—D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩仪市予华仪器有限责任公司),电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)等。2方法2.1海木萃取物的制备称取海木

3、干枝叶适量,加入适量的无水乙醇,加热回流2h,用四层纱布过滤,得到的上清液提取液,重复提取3次,合并提取液,减压回收溶剂,得膏状物,将此膏状物用乙醇∶水=1∶3的比例除去叶绿素,回收溶剂至干,即得粗提部分。将所得粗提物分成两份,一份备用,另一份依次用石油醚、氯仿、正丁醇、水进行固-液萃取,即得到石油醚部分、氯仿部分、正丁醇部分、水提部分。将各部分分别减压回收溶剂至干,最后得到的膏状物即是石油醚萃取物、氯仿萃取物、正丁醇萃取物和水提物。2.2动物分组在各项实验分组之前均用相应的仪器对小鼠进行神经行为学测试

4、和筛选,剔除与其他小鼠具有较大差异的,再将其余的小鼠随机分组,每组10只。2.3海木对正常小鼠学习记忆功能作用的活性部位筛选(避暗法)将小鼠分为正常组、粗提物组、石油醚组、氯仿组、正丁醇组、水提物组和阳性对照组共7组。各给药组按100mg/kg剂量灌胃1ml,正常对照组灌胃等容量的生理盐水,阳性对照组按16mg/kg剂量灌胃等容量银杏叶片溶液,1次/d,连续给药10d,于给药第9天进行避暗训练,第10天给药后30min按文献[5]方法测定小鼠在避暗仪中30min内的错误次数(进入暗室受到电击的次数)和潜

5、伏期(每只小鼠放入明室从开始测试到第一次进入暗室的时间)。2.4海木氯仿萃取物对正常小鼠空间记忆功能的影响(Morris水迷宫法)将小鼠分为正常组、氯仿萃取物小、中、大剂量组和阳性对照组共5组。给药组分别按50,100,150mg/kg剂量灌胃海木氯仿萃取物1ml,正常对照组灌胃等量生理盐水,阳性对照组按16mg/kg剂量灌胃等量银杏叶片溶液,1次/d,连续给药10d。于给药第5天进行1次定位航行训练,于末次给药后30min按文献[6]方法测定小鼠寻找平台潜伏期及撤除平台后经过原平台的次数及在原平台象限

6、停留的时间。2.5海木氯仿萃取物对盐酸氯丙嗪所致记忆获得障碍小鼠的影响(避暗法)动物分组和给药与“2.4”同,除正常对照组外,实验小鼠于给药第9天皮下注射盐酸氯丙嗪注射液(4mg/kg),30min后进行避暗训练,第10天末次给药30min后测定小鼠在避暗箱中30min内的错误次数和潜伏期。2.6海木氯仿萃取物对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍小鼠的影响(跳台法)动物分组和给药与“2.4”同,除正常对照组外,实验小鼠于给药第9天进行跳台训练后立即皮下注射亚硝酸钠水溶液(120mg/kg),第10天末次给药30m

7、in后按文献[5]方法测定小鼠在跳台测试箱中30min内的错误次数及潜伏期。2.7海木氯仿萃取物对乙醇所致记忆再现障碍小鼠的影响(跳台法)动物分组和给药与“2.4”同,实验小鼠于给药第9天进行跳台训练,第10天除正常对照组外,在末次给药后灌胃40%乙醇(0.1ml/10g),30min后测定小鼠在跳台测试箱中30min内的错误次数及潜伏期。2.8数据处理所有数据以±s表示,数据统计分析采用SPSS13.forin的潜伏期均有增大,其中大剂量组的潜伏期最长,有非常显著性差异(P<0.01),其次是中剂量组

8、的,有显著性差异(P<0.05);各剂量组错误次数均明显减少,差异非常显著(P<0.01)。表3海木氯仿萃取物对盐酸氯丙嗪所致记忆获得障碍小鼠的影响(略)3.4海木氯仿萃取物对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍小鼠的影响结果见表4。与模型组比较,大、中、小3个剂量组在30min的潜伏期均有增大,其中,大、中剂量组的潜伏期相对较长,有显著性差异P<0.05);各剂量组错误次数均明显减少,有非常显著性差异(P<0.01)。表4海木氯仿萃取物对亚硝酸钠所致

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