胎儿肠道cajal间质细胞的发育

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1、胎儿肠道Cajal间质细胞的发育作者：吴小红，王宝西，王茂贵【关键词】Cajal间质细胞DevelopmentofinterstitialcellsofCajalinfetalintestines　　【Abstract】AIM:TostudythedevelopmentanddistributionofinterstitialcellsofCajal(ICC)infetalintestines.METHODS:TplesofgestationICCfrom3-4monthsmunohistochemistryent.RESULTS:①ICCusclelayer,longitudin

2、almusclelayerandthemyentericplexus.②ThedistributionofICCvariedthroughouttheintestinesberofICCincreasedyentericplexus,theninmusclelayerandthenindeepmuscularplexus.④edentofICCvariesthroughouttheintestinesarilyinthemyentericplexusofAuerbach.ThenumberofICCincreasesandICCformo胎儿标本12份，采用酪氨酸激酶受体（ckit

3、）抗体免疫组织化学方法标记胎儿肠道ICC.结果:①ICC分布于肠肌间神经丛、纵肌和环肌层面；②不同胎龄胎儿标本，不同层面ICC分布存在差异，随胎龄增加，ICC数目增多；③ICC的呈现按一定时间顺序，肠肌间神经丛，ICC呈现最早，肌内次之，深肌丛较晚；④ICC胞体逐渐增大，足突延长并互相连接，形成细胞间网络结构.结论：胎儿肠道ICC主要分布肠肌间神经丛周围，不同胎龄ICC分布及发育存在差异，不同层面ICC分布不同，随着胎龄增加，ICC数目增多，逐渐形成网络结构.　　【关键词】Cajal间质细胞；肠；分布；胎儿　　0引言　　Cajal间质细胞（interstitialcellsofCa

4、jal，ICC)来源于间充质远祖细胞，该细胞表达kit和平滑肌球蛋白重链，在妊娠后期ICC和纵形平滑肌谱系开始分叉［1］.ICC为分布于消化道自主神经末梢与平滑肌细胞之间的特殊类型细胞，其细胞膜表面存在许多神经递质受体如ckit，CD34等.ICC功能既由其数目、分布、免疫活性决定，又受神经，肌细胞功能影响.ICC与肌细胞间的缝隙连接对其功能发挥起重要作用.ICC分布异常、数目减少、功能降低可能是引起慢传输型便秘，慢性假性肠梗阻等胃肠动力性疾病的主要因素.目前缺乏对ICC发育研究的资料，我们拟探讨胎儿ICC发育、分布，对明确胃肠动力性疾病病因，可能具有重要意义.　　1材料和方法　　

5、1.1材料　　12份中止妊娠之胎儿标本,根据胎龄分为3组:3～4mo3份、5～6mo3份、7～8mo6份.主要试剂为兔抗人ckit抗体，生物素标记的羊抗兔IgG，由santscruz提供，ABC复合物Dako提供.　　1.2方法　　1.2.1组织处理由西安仁和医院妇产科提供中止妊娠手术后胎儿标本，取胎儿不同肠管各一段，经生理盐水冲洗，置入bouin液24h固定，石蜡包埋，制成5μm厚切片，将同一胎龄不同部位石蜡切片贴于涂有AES同一载玻片，37℃温箱烘干备检.　　1.2.2ABC免疫染色法石蜡切片二甲苯脱蜡，梯度乙醇脱水；3mL/L甲醇H2O2室温孵育30min；抗原修复标本于柠檬

6、酸缓冲液（10mmol/LpH6.0）微波炉加热10~15min；10mL/L正常羊血清30min，封闭背景；加兔抗人ckit抗体，4℃冰箱孵育过夜；生物素标记的羊抗兔IgG，室温孵育2h；ABC复合物，室温孵育1h；显色、水洗、脱水、透明，DPX封片.上述每一步完成后均10mmol/LPBS（pH7.4）漂洗10min×3.　　免疫组化对照实验：分别以10mmol/LPBS和正常山羊血清取代一抗进行孵育作为空白对照和替代对照.　　统计学处理：采用SPSS10.0统计软件，配对t检验处理数据，检验水准α＝0.05.　　2结果　　3~4mo胎龄儿小肠，结肠各段ICC分布相似，纵肌层面

7、ICC单层与纵肌平行分布（Fig1A），细胞胞体呈梭形或椭圆形肠肌间神经丛，ICC围绕肠肌间神经丛形成不连续的层面（Fig1B）；5~6mo龄胎儿小肠，结肠各段ICC分布无明显差异，但肠肌间神经丛和纵肌ICC数目明显多于环肌、和浆膜层.ICC围绕肠肌间神经丛形成连续的层面（Fig1C），纵肌ICC数目增加且与纵肌走行一致.环形肌开始出现少量的ICC，平行于环形肌分布（Fig1D）.黏膜，黏膜下层无ICC.浆膜层有少量的ICC；纵肌形成稠密的网络结构（Fig1E），7~