肝癌微环境中cd4+cd25+treg细胞与肿瘤免疫细胞的关系论文

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1、肝癌微环境中CD4+CD25+Treg细胞与肿瘤免疫细胞的关系论文陈中晏建军，倪家连，刘鲁岳，黄亮，严以群【摘要】［目的］探讨肝癌微环境中Treg细胞的数量增多与HCC临床分期晚的可能原因。［方法］双重酶标免疫组织化学方法检测52例HCC组织中CD4+CD25+Treg细胞以及CD4+CD25-T（CD4+T）细胞分布，免疫组化EnVision法检测20例HCC组织中CD8+T细胞分布。［结果］正常肝脏组织中未发现Treg细胞，HCC组织中Treg细胞数量较癌旁组织明显增多（P=0.000），且肝癌组织中Treg细胞的数量与其浸润性C

2、D4+T淋巴细胞的数量以及CD4+T/CD8+T比值呈显著负相关（r＝-0.539.freelentofHepatocellularCarcinomaAbstract:［Purpose］ToexplorethecausesofanincreasedprevalenceofregulartoryT(Treg)cellsinmicroenvironmentofhepatocellularcarcinoma(HCC)arkedbyDouble-immunohistochemical,andCD8+Tcellsintheslidestissu

3、esof20casesallivertissues.ThenumberofTregcellsinthetissueofHCCorethanthatinthetissueofperi-cancer(P=0.000).ThenumberofTregcellsinHCCtissueannersothattumorcellscanescapeimmunesurveillanceandresultininvasionandprogression.Functionaldeletionoftumor-infiltratingTregcellsinm

4、icroenvironmentofHCCcanenhancetumor-specificimmunotherapy.Keya；tumorinfiltrating；lymphocytes肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)是指位于原发和继发肿瘤细胞周围的淋巴细胞，主要由T细胞组成。TIL具有杀伤肿瘤细胞、降低转移潜能的作用，因其与肿瘤细胞密切接触而被认为是机体对肿瘤识别的直接而特异的表现，肿瘤组织中浸润免疫细胞数量和功能的变化在一定程度上反映了机体抗肿瘤反应的强度和总体水平。本研究用双重酶标免疫组织化学的方法检测肝细胞癌(hepatocellul

5、arcarcinoma，HCC）微环境中CD4+CD25+（regulatoryT，Treg）细胞、CD4+CD25-T（CD4+T）细胞的数量分布以及两者真实浸润状态，用免疫组化方法检测HCC组织中浸润免疫活性细胞分布，探讨HCC微环境中Treg细胞的分布与肿瘤微环境浸润免疫活性细胞的关系，研究肿瘤发生的可能机制，为肿瘤的局部免疫治疗提供新的治疗思路。1材料与方法1.1研究对象东方肝胆外科医院2004年12月至2005年5月手术患者经病理学检查证实HCC标本52例（均包括肝癌组织以及癌旁组织），取材时癌旁组织为距癌结节2cm以内的肝

6、组织；避开坏死区，术前均未接受包括经肝动脉栓塞化疗在内的任何其它治疗。男性42例，女性10例，年龄29岁~71岁(平均49.2岁）。正常肝组织8例，取自肝血管瘤、肝囊肿的周围正常肝组织，男性3例，女性5例，年龄27岁~57岁(平均42.4岁)。所有研究对象均无糖尿病、类风湿、甲状腺功能亢进等自身免疫性疾病史以及免疫治疗史。1.2主要试剂小鼠抗人CD4单克隆抗体（DAKO公司生产），使用时用抗体稀释液稀释为1∶100；小鼠抗人CD25单克隆抗体（DAKO公司生产），使用时用抗体稀释液稀释为1∶200；即用型羊抗小鼠辣根过氧化物酶（HRP

7、）标记的EnVision二抗（DAKO公司生产）；生物素化羊抗兔IgG和链酶亲合素标记的碱性磷酸酶，使用时均稀释液稀释为1∶200（Zymed公司生产）；小鼠抗人CD8单克隆抗体（DAKO公司生产），使用时用抗体稀释液稀释为1∶100。1.3实验方法采用双重酶标免疫组织化学。苏木素衬染色，热水蓝化；吹干后，树脂封片；将切片置于显微镜下采用盲法进行观察，先在低倍镜下观察整张切片，随机选择5个高倍视野(×400)计数阳性细胞，并求平均值。1.4统计学处理对各种组织中的Treg细胞的分组计数结果以均数±标准差(x±s)表示，应用SPSS11

8、.0统计软件采用非参数检验方法Mann-ed,2005,201(5):779-791.