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1、麦冬指纹图谱研究论文.freelicalponentsofmaidong(rootofOphiopogonjaponicus)intaincultivateregionsofChina,Sichuan(Chuanmaidong)andZhejiang(Hangmaidong).MethodsAnHPLC-UVanalyticalmethodsplesfromSichuanandZhejiangprovince,.freelilarityevaluatingsystemforTCM”issuedbyPharma
2、copoeiamitteeofP.R.Chinailaritiesallofthesamples.ResultsThefingerprintsrevealedthatthesimilaritiesplesfromthesamecultivateregion,andplesfromdifferentregionsofabovetaidongandHangmaidongostimportantprooffordistinguishingthematerialmedicaofChuanmaidongandHangm
3、aidong,butalsoinpatentmedicineofTCM.Keyaidong；Hangmaidong；fingerprints；HPLC麦冬来源于百合科(Liliaceae)沿阶草属植物麦冬Ophiopogonjaponicus(Thunb.)Ker-GaasilC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)。样品来源与编号见表1。乙腈为色谱纯,水为纯净水,其它试剂均为分析纯。表1药材来源（略）2方法与结果2.1提取方法的选择我们对《中华人民共和国药典》、《卫生部药品标准》、《新药转正标准》等国
4、家药品标准中含麦冬的中成药复方进行了统计,结果表明：目前我国200余种中成药制剂处方中含有麦冬,这些中成药制剂对麦冬药材的提取处理工艺基本使用同一种方法,即水煎煮-乙醇沉淀法。为使药材指纹图谱对含麦冬的中成药质量控制具有一定的借鉴作用,理论上药材样品的提取方法也应该采用水提-醇沉方法,为简化制样方法,我们选择采用70%乙醇直接提取。本课题比较了用70%乙醇冷浸(24h)、超声(30min)和回流(1h)3种方法,结果表明：3种方法的提取效率基本一致,但回流提取的样品由于加热后糖分溶解度增大,以至于溶液相对很难
5、滤过,因此,确定采用70%乙醇冷浸24h的制样方法。2.2检测波长的选择取MD01细粉1g,精密称定,置10mL容量瓶中,加70%乙醇至刻度,冷浸24h,期间振摇数次,微孔滤膜滤过,制得供试品溶液。进样10μL,用不同检测波长检测,比较在230、254、280、300、330nm波长条件下,色谱峰的信息给出情况。结果表明：检测波长为280nm和300nm时,色谱峰给出信息最多,但检测波长为300nm时,各色谱峰的峰高更高。确定选择300nm作为指纹图谱检测波长。2.3流动相的选择取“2.2”项下的供试品溶液,
6、以乙腈(A)-0.3%磷酸水(B)溶剂系统,在表2所列的3种梯度条件下,分别进样10μL,比较其分离效果。结果表明：流动相3的分离效果最好。表2麦冬药材指纹图谱流动相A梯度表(略)2.4色谱柱的选择取“2.2”项下的供试品溶液,用流动相3进行洗脱,分别比较了erckLiChroCATR(4.0mm×250mm,5μm)和Kromasil(4.6mm×250mm,5μm)3种C18反相色谱柱的分离效果,结果表明：Kromasil色谱柱对各色谱峰分离效果相对较好。因此,本实验选择Kromasil色谱。2.5进样精
7、密度试验取“2.2”项下的供试品溶液,连续进样5次,每次10μL。以峰面积之和大于90%的20个色谱峰为共有峰,以第19号峰甲基麦冬黄烷酮A为S峰,计算各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积。结果表明,各色谱峰相对保留时间和相对峰面积的比值基本一致,RSD均小于5%,符合指纹图谱的要求。2.6稳定性试验取“2.2”项下的供试品溶液,每隔4h进样1次,每次10μL,共进样5次。测定结果表明,各共有峰相对保留时间基本一致,各共有峰单峰面积RSD均小于5%,符合指纹图谱要求。2.7重复性试验取MD01细粉1g,5份,精
8、密称定,分别置10mL容量瓶中,加70%乙醇至刻度,冷浸24h,期间振摇数次,微孔滤膜滤过,制得供试品溶液。各进样10μL,检测指纹图谱。结果表明,各色谱峰的相对保留时间和峰面积的比值基本一致,RSD均在5%以内,符合指纹图谱的要求。2.8麦冬药材指纹图谱标准的制定取不同来源的麦冬药材细粉1g,精密称定,分别置10mL容量瓶中,加70%乙醇至刻度,冷浸24h,期间振摇数次,微孔滤膜滤过,制得供试品溶
