青翘提取物的抑菌活性研究论文

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1、青翘提取物的抑菌活性研究论文薛慧清，马雪梅，马文兵，赵平【摘要】目的研究青翘提取物的抑菌活性。方法以金色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌为代表菌种，用K-B纸片扩散法对青翘提取物的抑菌活性进行研究。结果青翘不同提取物对供试菌均有一定的抑菌活性，其中醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物具有较强的抑菌活性。提取物对金色葡萄球菌的抑菌活性与提取物浓度呈正比，对大肠杆菌和白色念球菌的抑菌活性与提取物浓度不呈简单的正比关系。结论青翘不同提取物对金色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌均有抑制作用。【关键词】青翘；提取物；抑菌活性连翘

2、为木犀科(Oleaceae)连翘属(Forsythia)植物连翘Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl的干燥果实。连翘药材商品分为“青翘”和“老翘”。果实初熟尚带绿色时采收蒸熟，晒干.freelm，置于干燥洁净的试管内，放入压力蒸气灭菌器中经121℃，20min高压灭菌，干燥。分别取干燥后的不同待试样品0.5，1.0，2.0mg，用合适的溶剂溶解，将滤纸片放入溶液中，反复吸取、晾干，直至将溶液吸干，备用。2.2.2培养基的制备固体培养基：用天平准确称取36g营养琼脂，加入蒸馏水1000m

3、l，加热并不断搅拌，使琼脂完全溶解。然后放入压力蒸气灭菌器中经121℃，20min高压灭菌，取出趁热倒入经过高压灭菌的培养皿中，厚度约3～5mm,冷却凝固后备用。液体培养基［7］：用天平准确称取牛肉膏0.3g，蛋白胨1g，氯化钠0.5g，加入蒸馏水100ml，加热并不断搅拌，用1%NaOH溶液调节pH7.2～7.4，然后放入压力蒸气灭菌器中经121℃，20min高压灭菌，分装于试管中，备用。2.2.3菌悬液的制备用接种环分别取各菌种一环，接种于液体培养基中，放入37℃培养箱中培养24h，用灭菌生理盐水分别稀

4、释至1×10-5CFU/ml浓度，备用。2.2.4药物抑菌作用测定采用K-B纸片扩散法［8］，用无菌移液管吸取稀释好的菌悬液0.1ml，置于培养基中央，用涂布棒涂布均匀。用无菌镊子夹取含药滤纸片贴在培养基表面，以含药量为10μg的庆大霉素细菌药敏试纸为阳性对照。放入37℃培养箱中培养24h后，观察抑菌圈，并用十字交叉法测量抑菌圈直径,结果以毫米(mm)表示,.freelg时抗菌活性最强，氯仿提取物在含药量为1.0mg时抗菌活性最强，而其它提取物含药量为2.0mg时抗菌活性最强。这与文献报道的连翘乙醇提取物的

5、浓度与抑菌作用强弱之间并不呈简单的正比关系［6］相一致，提示我们多种成分同时存在时可能仅存在“最适抑菌浓度”。从表3可知，青翘不同提取物对白色念珠菌均有一定抑制作用。总体来看，醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物对白色念珠菌的抑制作用较强，其次为95%乙醇提取物。所有提取物的抗菌作用受含药量改变的影响不大，并且，纸片含药量为0.5mg时，显示出略强的抗菌活性。与青翘提取物对大肠杆菌的抑菌作用一样，说明了浓度与抑菌作用强弱之间并不呈简单的正比关系。4讨论本研究表明，青翘不同提取物对3种菌株均表现了不同程度的抑菌作用，

6、抑菌作用的顺序为金黄色葡萄球菌﹥大肠杆菌﹥白色念珠菌。金黄色葡萄球菌是目前引起上呼吸道感染的常见菌，这与中医药认为连翘具有清热解毒功效，以及连翘治疗呼吸道感染的临床应用基本吻合，临床上一些感染性疾病的最终治愈还是依赖清热药的抗病原体作用，因此抗菌是这类药物的主要药理作用［6］。对于金黄色葡萄球菌和白色念珠菌，抑菌活性成分集中于正丁醇和醋酸乙酯提取物中；而对于大肠杆菌，抑菌活性成分集中于醋酸乙酯和氯仿提取物中。这说明青翘中极性较大的成分具有较强的抑菌活性，是其发挥清热解毒功效的物质基础。青翘提取物对大肠杆菌的

7、抑菌作用研究表明，95%乙醇、石油醚与氯仿提取物浓度与抗菌作用强弱之间不呈正比关系，查阅相关资料［5］，推测其原因可能是青翘提取物中的某些极性小的成分提供了菌体生长所需的“营养物质”，或是这些极性小的成分刺激了菌体的生长。由于中药成分的复杂性和各种成分性质的差异性，使药物作用过程和机理更加复杂。因此，以往参照抗生素求最小抑菌浓度(MIC)的方法很难准确地反映青翘的抑菌活性，应该寻求它的“最适抑菌浓度”。研究结果可以指导青翘中抑菌活性成分的分离纯化，为更好地发挥青翘抗菌作用奠定基础。【