扁担杆提取物体外抑菌活性研究论文

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1、扁担杆提取物体外抑菌活性研究论文刘建群，吴继梅，何志恒，寇晓莉，洪沁【摘要】目的研究药用植物扁担杆乙醇提取物的抑菌活性，寻找抗菌活性成分。方法制备扁担杆乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取物，采用液体两倍稀释法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、β-溶血性链球菌、表皮葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌进行体外抑菌实验。结果扁担杆乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取物对上述6种细菌生长均有一定抑制作用，其中对β-溶血性链球菌的抑制作用最强.freelGreethodinetheminimuminhibitoryconcentration(MIC)oftheextracts

2、ofGreonasaeruginosa,β-Hemolyticstreptococcus,StaphylococcusepidermidisandStaphylococcuscitreus.ResultsTheextractsofGreolyticstreptococcusandthen-butanolextractshoethod扁担杆Greonasaeruginosa,ATCC27853)和β-溶血性链球菌(β-Hemolyticstreptococcus,ATCC0604)均由江西省临床疾病检验中心提供。表皮葡萄球菌(Staphylococcu

3、sepidermidis)和柠檬色葡萄球菌（Staphylococcuscitreus）由本单位临床分离所得。1.2药物扁担杆的干燥根皮90%乙醇提取物及其醋酸乙酯、正丁醇和水萃取物；盐酸小檗碱（中国药品生物制品检定所）。1.3培养基营养肉汤（杭州微生物试剂有限公司）；琼脂粉（成都科龙化工试剂厂）；苯酚红（天津市大茂化学试剂厂）；无菌脱纤维绵羊血（江西省临床疾病检验中心）。2方法与结果2.1普通培养基的制备用蒸馏水将营养肉汤和琼脂粉溶解后，高压灭菌。趁热将培养基倾倒入培养皿中，冷却备用。2.2血平板培养基的制备［9］在普通营养琼脂培养基础上高压消毒后

4、,冷却至56℃时加5%～10%无菌脱纤维绵羊血混匀,倒入培养皿中备用。2.3菌液的制备将在低温保存的菌种活化2～3次，然后于肉汤蛋白胨琼脂培养基斜面37℃培养24h。再从斜面培养基上沾取一铂金耳菌苔，接种到灭菌的葡萄糖酚红肉汤培养基中，于37℃培养24h，取出作为原菌液。再用无菌生理盐水稀释至浓度为1∶1000做实验菌液。2.4实验药液的制备将扁担杆干燥根皮粉碎，用90%乙醇回流提取减压蒸干溶剂得总浸膏。将总浸膏混悬于水中，依次用醋酸乙酯、正丁醇萃取，减压蒸干溶剂得醋酸乙酯、正丁醇和水部位浸膏。总浸膏和各部位浸膏用蒸馏水配成40mg/ml水溶液作为供

5、试液，同时以盐酸小檗碱（4mg/ml）作药物阳性对照。2.5最低抑菌浓度（MIC）的测定取16支灭菌过带有棉塞的试管，每管均加入1ml灭菌的葡萄糖酚红肉汤培养基。取上述5种供试液各1ml，加入各自的第1管中，混匀，吸出1ml加至第2管中……如此稀释至第14管，取出1ml弃去。第15管不加药物（作阳性对照），第16管不加药物也不加菌液（作阴性对照）。随后第1～15管中分别用移液枪，按无菌操作加入稀释好的实验菌液各0.1ml，混合均匀。以上各实验用具及各种培养基均按要求事先灭菌，各步骤均按无菌操作进行实验。于37℃恒温箱中培养24h。观察结果，以完全没有

6、菌生长的最低药物浓度作为该药物对实验菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果见表1。表1扁担杆乙醇提取物和各萃取物对6种菌株的最低抑菌（略）3讨论结果表明扁担杆乙醇提取物及其醋酸乙酯、正丁醇和水萃取物对上述6种细菌均有一定的抑制活性，其中对β-溶血性链球菌的抑制作用最强，并以正丁醇萃取物的抑制作用最好，有的与阳性对照盐酸小