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1、匙羹藤提取物体外抑菌活性的观察论文.freelnemasylvestreextractant,GE)的体外抑菌活性。方法采用琼脂稀释的实验方法,分别测定匙羹藤提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌以及绿脓杆菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果匙羹藤提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌以及绿脓杆菌的MIC分别为0.625、1.25、1.25、2.5mg/mL。结论匙羹藤提取物对多种细菌具有抑菌作用。【关键词】匙羹藤提取物；体外抑菌活性；最低抑菌浓度Keynemasylvestreextractant；invitroantibacte
2、ralactivity；minimuminhibitoryconcentration匙羹藤(Gymnemasylvestre)系萝摩科植物,主要分布在我国广东、广西、福建、台湾和云南等省区。全株可药用,民间用于治疗风湿性关节痛、糖尿病、疥痈肿毒、毒蛇咬伤、枪弹伤及杀虱等1。近年来,匙羹藤引起了国内外学者的高度重视,对其化学成分和药理作用进行了大量的研究,但仅限于降血糖、抗龋齿和抑制甜味反应等作用。本研究主要对匙羹藤提取物的抑菌效果进行了实验观察,现将试验结果报道如下。1材料1.1仪器微量多点接种仪：北京医科大学昆仑药物发展研究所生产。微
3、量移液器：德国Eppendorf公司。1.2培养基Mulele-Hrint琼脂：法国生物梅里埃公司生产,.freelL的菌悬液3。2方法2.1纸片琼脂扩散法抑菌试验42.1.1菌片的制备5将定性滤纸制成6mm直径的圆片,经高压蒸汽灭菌后,干燥保存备用。取处理好的滤纸片放入无菌平皿中,用10μL移液器把含匙羹藤提取物浓度为50%的提取液滴加在无菌滤纸片上,阴性对照片滴加10μL的生理盐水,置无菌室晾干,阳性对照选用已制好的标准的药敏头孢塞肟纸片。2.1.2步骤首先在M-H琼脂平板表面均匀的涂抹试验菌悬液,置室温干燥5min,在每个平板表面
4、周边距贴3个试验和1个阴性对照纸片,中心贴1个阳性对照纸片。然后将贴好纸片的平板放在37℃温箱中培养24h,观察结果。用数显游标卡尺测量数据。2.1.3判定标准抑菌环直径大于7mm者判为有抑菌作用,抑菌环直径小于或等于7mm为无抑菌作用,阴性对照应无抑菌环产生,否则试验无效,抑菌环越大说明抑菌效果越好。2.2最低抑菌浓度的测定2.2.1步骤用蒸馏水将匙羹藤提取物配制成5%的提取液,排列无菌试管(6支编序),在1－6支试管中分别加入10mL的M-H液体培养基,于第1支试管中加入10mL5%匙羹藤提取液,混匀,然后取出的10mL5%匙羹藤提
5、取液加入第2支试管中,混匀,依次类推,第5支试管中取出10mL弃掉,而第6支试管不加药物作为阴性对照。最后在每个试管中加入0.1mL试验菌悬液,混匀,阳性对照取西药抗生素头孢三代头孢米诺钠,用同样的方法依次稀释相对应的浓度。然后在37℃温箱中培养24h,观察结果。2.2.2判定标准含药物的试管中以及阳性对照的试管中液体清亮判断为该药物有抑菌作用,阴性对照的试管中液体浑浊判断为该药物无抑菌作用,倍比稀释后有抑菌作用的最低药物浓度判为该中药提取物的最低抑菌浓度(MIC)。3结果(见表1、表2)表1匙羹藤提取物对不同试验菌抑菌环直径的影响(略
6、)注：表中对照为阳性对照表1显示,匙羹藤提取物浓度为50mg/mL,在M-H琼脂平板上对金黄色葡萄球菌、变形杆菌及大肠杆菌标准菌株的抑菌环直径均大于7mm,显示出其抑菌作用,但对绿脓杆菌抑菌效果较差,抑菌圈直径小于或等于7mm。所有阴性对照无抑菌环产生。表2匙羹藤提取物的抑菌作用（略）注：“+”表示有菌生长,“-”表示无菌生长表2结果表明,匙羹藤提取物对金黄色葡萄球菌最为敏感,而对大肠杆菌和变形杆菌的抑菌效果也可。匙羹藤提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌标准菌株的MIC分别为0.625、1.25、1.25、2.5mg/
7、mL。4讨论目前,国内外对匙羹藤的化学成分和药理作用研究非常活跃。匙羹藤主要含有皂苷、萜类、黄酮、多肽、果胶、生物碱等成分,其提取物的有效成分主要是匙羹藤酸(gymnemicacide)。为观察中药匙羹藤是否有抑菌作用以及抑菌作用如何,首先我们对匙羹藤的有效成分进行了提取,然后对临床常见多种细菌的标准菌株进行预试验,发现匙羹藤提取物对金黄色葡萄球菌、变形杆菌及大肠杆菌的抑菌环直径均大于7mm,显示出抑菌作用,而对绿脓杆菌抑菌效果较差,其抑菌环直径等于或小于7mm。我们又对匙羹藤提取物进行了进一步研究,其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆
8、菌及绿脓杆菌的MIC分别0.625、1.25、1.25、1.25mg/mL。通过研究发现匙羹藤提取物对多种细菌有抑制效果,说明其抑菌谱范围较广。本试验仅为标准菌株的体外抑菌实验,但匙羹藤对临床菌株抑菌作用如
