蜂胶活性提取物抑菌效果的研究

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1、万方数据第39卷第4期2009年8月工业微生物IndustrialMicrobiologyVd．39No．4Aug．2009doi：10．39691j．ism．1001—6678．2009．04．0010蜂胶活性提取物抑茵效果的研究周小理1，王正1”，俞苓1，张正强3，祝青1(1．上海应用技术学院，上海200235；2．上海海洋大学，上海200090；3．上海师范大学，上海200234)摘要采用超声波乙醇浸提法和超临界CQ萃取法制备蜂胶活性提取物，分别以70％乙醇、丙三醇、聚乙二醇400作为溶剂将蜂胶活性提取物制成溶液。并通过超声波和

2、加热方式对蜂胶活性提取物溶液进行预处理，观察其对常见食品致病茵的抑茵和延长鲜牛肉的保鲜期效果。结果表明：两种蜂胶活性提取物溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球茵、枯草杆茵、蜡样芽孢杆茵、黑曲霉、产黄青霉均有不同程度的抑茵效果，其中对金黄色葡萄球茵、蜡样芽孢杆菌抑茵效果较好。同时发现两者都能较好地延长鲜牛肉的保鲜期。关键词：蜂tt；超临界cch萃取；超声波；抑茵；保鲜蜂胶(Pmpolis)素有“紫色黄金”之称[1】，是蜜蜂从胶源植物的新生芽条和愈伤组织处采集的分泌物，加入腺体如蜜蜂舌腺、蜡腺等腺体的分泌物及花粉等混合转化而成的一种具有芳香气味的

3、胶粘状物质[2】。其抗氧化、抗病毒、抗溃疡、抗炎、局部麻醉、抗血压和增强免疫力等生物学和药理作用越来越引起人们的重视【3]。本文对超声波乙醇浸提法和超临界C02萃取法提取蜂胶活性物，采用滤纸片抑菌圈法初步确认其抑菌效果并探索其在牛肉保鲜上的应用前景。1材料与方法1．1材料1．1．1蜂胶市售。1．1．2鲜牛肉上海清真食品有限公司提供。1．1．3供试菌种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、蜡样芽孢杆菌、黑曲霉、产黄青霉，均由本院微生物实验室提供。1．1．4培养基牛肉蛋白胨琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基。1．2方法1．2．1蜂胶活性提取

4、物的制备超声波乙醇浸提法提取蜂胶活性物：以1：15(v／v)的无水乙醇浸提蜂胶12h，然后采用超声波(S00w)提取3次，每次15min。蜂胶活性提取物得率为32．63％。超临界CQ萃取法提取蜂胶活性物：采用无水乙醇为夹带剂，在萃取压力为25MPa，萃取温度50℃，萃取时间3．5h，固液比6：1的条件下萃取蜂胶活性提取物，得率为31．96％。1．2．2溶剂对蜂胶活性提取物溶液抑茵效果的影响称取超声波乙醇浸提法和超临界cch萃取法提取的蜂胶活性物，分别以70％乙醇、食用级丙三醇、食用级聚乙二醇400为溶剂，将其配制成浓度为0．5％、1．

5、0％、1．5％的蜂胶溶液，待用。1．2．3蜂胶活性提取物溶液预处理方式对抑茵效果的影响通过加热10min(40℃、60℃、80℃)、超声波(功率600W，2min、4min、6min)等进行预处理，观察比较不同预处理方式对蜂胶活性提取物抑菌效果的影响。以未经任何预处理的蜂胶活性提取物为对照组。1．2．4蜂胶海出良取物溶液的抑茵效果实验1．2．4．1菌种的培养大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、蜡样芽作者简介：周小理(1957～)，女，教授。E—mBil：zh伽xl@sit．edu．cn。·-——47·-——万方数据第4期工业微生物第3

6、9卷孢杆菌用牛肉蛋白胨琼脂培养基培养，培养条件为37℃，24h；黑曲霉、产黄青霉用马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养，培养条件为28℃，48h。采用斜面接种法[4]在无菌条件下对以上菌种进行纯化培养。1．2．4．2抑菌效果实验【5】选择吸水性强的滤纸，用打孔器打成若干直径为6ml-rl的圆形滤纸片，经干热灭菌后，浸在两种蜂胶活性提取物溶液后，取出沥干，备用。无菌条件下分别挑取菌苔，用无菌生理盐水配制成含菌数约109cfu／mL的菌悬液，备用。在供试平板上，分别加入O．2mL供试菌，涂布均匀。将制备好的滤纸片在每个平皿内以一定间隔贴3片，并以空

7、白溶剂滤纸片作对照。在适宜的条件下培养(细菌在37℃下培养24h，霉菌、真菌在28℃下培养48h)后，比较其抑菌圈直径的大小，初步确定两种蜂胶活性提取物溶液的抑菌效果。1．2．5蜂胶活性提取物溶液延长牛肉保鲜期的效果实验1．2．5．1肉样的处理上海清真食品有限公司提供的新鲜牛肉，在洁净条件下切成50g左右的小块，随机分成5组，每组20块，分别在70％乙醇溶液(I)、以70％乙醇为溶剂的浓度为1．5％的超声波提取蜂胶活性提取物溶液(Ⅱ)、聚乙二醇400溶液(IlI)、以聚乙二醇400为溶剂的浓度为1．5％的超临界CQ萃取蜂胶活性提取物溶

8、液(Ⅳ)中浸渍30S后取出，置于洁净的瓷盘中，沥水5min，然后用真空包装袋包装，于7℃±O．5℃温度下冷藏保存。1．2．5．2牛肉保鲜期内细菌总数的测定采用G吲T4789．2—94，食品卫生微生物学检验，菌落总数测tj