液质联用技术在药物体内代谢研究中的应用论文

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1、液质联用技术在药物体内代谢研究中的应用论文【摘要】目的：探讨液质联用(LCMS)接口技术研究及其在药物代谢中的应用。方法：查阅文献、综述液质联用接口技术研究及其在药物代谢中的应用。结果：随着各种新型接口技术，特别是电喷雾电离和大气压化学电离的引入，LCMS技术对高极性化合物的分析具独特优势，在药物体内代谢研究中发挥着日趋重要的作用。结论：LCMS技术在中药、抗菌药物等多种药物及其代谢物的分析检测中广泛的发挥着重要作用。【关键词】液质联用技术;药物代谢;接口技术色谱分离模式多，适用范围广，是解决复杂体系中混合物分离分析的高效手段。但色谱对化合物的定性

2、常常需要借助于标准品的对照才能进行保留值的定性和定量，因此色谱和各种光谱手段的联用技术一直是研究重点。液相色谱质谱联用是20世纪70年代发展起来的分析技术。高效液相色谱是以液体溶剂作为流动相的色谱技术,一般在室温下操作,可以直接分析不挥发性化合物、极性化合物和大分子化合物(包括蛋白、多肽、多糖、多聚物等),分析范围广,而且不需衍生化步骤。据统计,在已知化合物中有70%是不挥发性的,所以在生命科学、医药领域等方面有广阔的应用潜力1。质谱是强有力的结构解析工具,能为结构定性提供较多的信息,是理想的色谱检测器,不仅特异,而且具有极高的检测灵敏度。液质联用技术

3、将液相色谱分离技术与质谱检测手段相结合，集液相色谱(LC)的高分离能力和质谱(MS)的高灵敏度、极强的定性专属特异性于一体.freelosphericpressurechemicalionization,APCI)两种方式，都是非常温和的离子化技术，其区别主要在于大气压下产生气相离子的方式不同。ESI是目前为止“最软”的电离技术，在常压下使样品溶液通过雾化气等辅助手段的帮助，产生高度带电荷的雾状液滴，沿着压力梯度进行迁移，在此过程中液滴由于溶剂蒸发或库仑爆炸而体积逐渐减小，最后产生完全脱溶剂的离子1。基于以上作用原理，ESI多用于极性、不挥发性、质量数较

4、大、热不稳定的化合物，尤其适用于生物分子聚合物的分析3。而在APCI接口中，样品溶液由具有雾化气套管的毛细管端流出，被氮气流雾化，通过加热管时被气化，在加热管端进行电晕尖端放电，溶剂分子被电离形成溶剂离子，之后这些溶剂离子和雾化气与气态的样品分子反应，得到样品分子的准分子离子。由于要求样品分子气化，因而大气压化学电离的对象为极性较弱的小分子化合物1。2药物体内代谢产物的样品的获得和预处理技术代谢产物可以在给药后由血、尿、粪便等体液及排泄物中获得，或用含药物的营养液灌流离体脏器与组织切片，以及药液与肝微粒体酶等药物代谢酶温孵获得。药酶温孵法可以获得较大量的

5、代谢物，但花费较大。药物离体脏器灌流与组织切片法中的灌流液含内源性物质很少，较易分离制取代谢产物4。自血、尿中获得代谢产物方法较简单，但所得样品的量较少。体内药物分析的样品成分复杂，对分析测定干扰严重，因此，样品的预处理是做好体内药物代谢研究的重要前提。液液萃取(LLE)和沉淀蛋白质是目前常用的方法。液液萃取常用的溶剂有氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯等。对于弱酸和弱碱性药物及其体内代谢物，通常需要加入缓冲液调节样品的酸碱性，使药物及其代谢物成为游离的酸或碱，以便能为溶剂所萃取。而沉淀蛋白质法操作非常简便，对于水溶性较大的药物及其代谢物尤为重要。沉淀剂可以是

6、某些阳离子、阴离子、中性盐及有机溶剂。固相萃取(solidphaseextraction,SPE)是近10年迅速发展起来的一种样品预处理技术，它是以液相色谱分离机理为基础，建立起来的分离与纯化以及富集的方法。SPE处理样品有许多引人注目的优点：首先是其安全性，可以避免使用毒性较强或易燃的溶剂;其次是不会发生LLE中经常出现的乳化问题，萃取回收率高，重现性好;第三，SPE操作简便、快速，可同时进行批量样品的预处理。基于上述优点，SPE在体内药物及其代谢物的分析中应用极其广泛1。3在各类药物及其代谢产物分析中的具体应用LCMS在药物代谢研究中除了可确定分

7、子量之外，还可以根据特异性断裂规律推导出重要部分结构甚至是完整的结构。其根据是由于多数药物的代谢物保留了原形药物分子的骨架结构，因此，代谢物可能与母体药物具有相似的裂解规律，即失去一些相同的中性碎片或形成一些相同的特征离子，利用LCMS可以迅速找到可能的代谢物，并鉴定出结构。3.1中药中药成分复杂，各组分之间的结构往往非常相似，且其在体内常发生代谢变化或复杂的相互作用，使中药代谢研究更加困难。LCMS的联用技术可先采用色谱将中药的有效成分加以分离，再用质谱对其相关成分进行在线分析检测，给出丰富的化合物结构信息，且由于其选择性强、碎片离子重现性好，对推

8、测未知代谢物结构有重要意义。陈勇等5采用液相色谱电喷雾离子阱色谱(LCESI