岩黄连生物总碱对肝纤维化大鼠 tgf

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1、岩黄连生物总碱对肝纤维化大鼠TGF作者：梁永红贾杰PeterS.Spencer毛宇昂覃崇举【摘要】目的观察岩黄连生物总碱对肝纤维化大鼠TGF-β1及MMP-9表达的影响，并探讨其抗纤维化的可能机制。方法MP-9的表达较模型组明显下降。结论岩黄连生物总碱对慢性肝纤维化大鼠具有肝保护作用及抗肝纤维化作用,可能通过抑制TGF-β1和MMP-9表达而促进肝纤维化的逆转。【关键词】岩黄连生物总碱四氯化碳肝纤维化肝纤维化是各种慢性肝脏疾病向肝硬化发展的必经阶段。阻断肝纤维化的发生和发展，对防治肝硬化和慢性肝病具有重要意义。我国是病毒性肝炎的高发区，目前肝纤维化的发病率呈上升

2、趋势，严重危害人们健康。将肝脏病变终止于纤维化阶段或逆转之，是当前医学界关注的热点之一。岩黄连是一种纯中药制剂，实验研究已表明其对甲、乙、丙型肝炎病毒均有不同程度的抑制和杀灭作用。本实验旨在观察岩黄连生物总碱对CCl4所致大鼠慢性肝纤维化的肝保护作用及抗纤维化作用，并初步探讨其作用机制。1材料1.1动物DA，SOD，Hyp试剂盒，南京建成生物工程研究所；TGF-β1，MMP-9免疫组化染色试剂盒，北京中杉生物工程有限公司。2方法2.1动物分组及处理DA，SOD，Hyp指标的测定。2.3肝组织病理学观察末次给药24h后处死大鼠，取肝大叶相同部位的一小块肝组织固定于

3、10%甲醛溶液，常规脱水，石蜡包埋，制作组织切片，HE染色，普通光镜下观察。2.4免疫组织化学观查取出肝组织用10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，切片机切片，按照试剂盒说明进行免疫组化染色，普通光镜观察。免疫组化染色以汇管区、中央静脉及细胞浆膜或间质有棕黄色颗粒或线状条索状沉积为阳性。免疫组化图像分析：每张切片随机选5个视野，利用病理图像分析软件(RGB)计算其灰度值，取其平均值，并加以统计学分析。2.5统计学分析数据以±s表示，采用SPSS12.0进行统计学分析，组间比较采用t检验，P<0.05说明差异具有显著性。3结果3.1一般状况纤维化模型组大鼠毛色暗淡、

4、精神萎靡，进食进水减少，易受惊，体重增长缓慢。处死后取肝组织可见模型组肝脏表面粗糙有结节，颜色灰暗，用手触摸感觉发硬，治疗组大鼠毛色较好，食欲尚可，肝组织损害较模型组轻，肝脏质地软，表面较光滑。3.2CSA对慢性肝纤维化大鼠血清ALT，AST，TP，ALB的影响与正常组相比，模型组的ALT、AST明显升高，TP，ALB明显降低，P<0.01；与模型组相比，联苯双酯组和CSA高、中剂量组的ALT，AST明显降低，TP，ALB明显升高，P<0.01；CSA低剂量组与模型组相比，P<0.05。表1CSA对CCl4所致大鼠慢性肝纤维化血清中ALT，AS

5、T，TP，ALB的影响与正常对照组比较aP<0.01；与模型组比较bP<0.01,cP<0.053.3CSA对慢性肝纤维化大鼠肝组织MDA，SOD，Hyp的影响与正常对照组相比，模型组MDA，Hyp明显升高，SOD明显降低，P<0.01；与模型组比较，联苯双酯组和CSA高、中剂量组MDA、Hyp明显降低，SOD明显升高，P<0.01；CSA低剂量组与模型组比较，P<0.05。表2CSA对CCl4所致大鼠慢性肝纤维化肝组织中MDA、SOD、Hyp的影响与正常对照组比较aP<0.01；与模型组比较bP<0.01,cP&

6、lt;0.053.4CSA对慢性肝纤维化大鼠肝组织病理学的影响正常对照组肝小叶及汇管区结构正常，肝细胞呈条索状以肝小叶中央静脉为中心向周围呈放射状排列，未见纤维化或变性、坏死；模型组大鼠肝组织正常结构被破坏，肝索排列紊乱，肝细胞肿胀变性，其中多为脂肪变，部分呈气球样变，窦旁细胞增生明显，胶原纤维大量增生，呈较宽的条索状分割肝小叶，弥漫分布，形成假小叶,有炎性细胞浸润；经CSA治疗各组病变程度较模型组轻，窦旁细胞轻度增生，纤维间隔略细，假小叶形成有所减少，汇管区及纤维间隔中有少量慢性炎细胞浸润；联苯双酯组病变程度较模型组明显减轻，纤维间隔细，假小叶形成减少。3.5

7、CSA对慢性肝纤维化大鼠TGF-β1、MMP-9的影响与正常对照组比较，模型组TGF-β1、MMP-9表达量均明显升高，P<0.01；与模型组比较，联苯双酯组两者表达量明显降低，P<0.01；CSA高剂量组与模型组相比TGF-β1、MMP-9的表达量也降低，分别为P<0.01和P<0.05；CSA中剂量组与模型组相比两者表达均降低，P<0.05；CSA低剂量组与模型组比较无统计学意义。表3CSA对肝纤维化肝组织TGF-β1、MMP-9水平的影响与正常对照组比较aP<0.01；与模型组比较bP<0.01,cP<0.0

8、54讨论肝纤维化是肝硬化