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1、湿热因素对大鼠胃黏膜水通道蛋白3、4基因表达的影响论文.freelalmodelofdamp-heatsyndrome(DHS)andexploretheexpressionofaquaporin(AQP)3,4geneingastricmucosa.MethodsThirtySDratsizedinto3groupsandobservedfor20days.GroupA(normalgroup,NG)ethod.GroupB(Pideficiencysyndromegroup,PDS)ethodandaquao
2、fcassiaangustifoliaVahl.GroupC(DHS)p-heatenvironment.TheexpressionofAQP3,4geneinthe3groupsinedbyfluorescencequantitativepolymerasechainreaction(FQ-PCR).ResultsThesymptomsandsignsinGroupCiartotheclinicalDHS.ExpressionofAQP3geneinDHSethodoffeedingfatandhoneyund
3、erdamp-heatenvironmentiseffectivetocopyDHS.AbnormalexpressionofAQP3genemaybeoneoftheDHSpathogenesis.Keyp-heatsyndrome；aquaporin；animalmodel；gastricmucosa通过对模型大鼠施加内湿、外湿因素的方法复制湿热证动物模型,模拟出临床湿热证的主要证候；通过测定模型大鼠胃黏膜水通道蛋白(AQP)3、4基因表达,.freelL水煎剂,4℃冰箱保存备用。TRIzolReagent(
4、美国Invitrogen公司)；琼脂糖凝胶Agarose(美因Sigma公司)；TaqDNAPolymerase(广州中山大学达安基因诊断中心)；MMLV逆转录酶(广州中山大学达安基因诊断中心)；dNTPs(上海华美生化试剂有限公司)；DEPC(美因Sigma公司)；逆转录buffer(德国Qiagen公司)；定量PCRbuffer试剂盒(美国ABI公司)。1.3仪器LRH-800-GS人工气候箱为广东省医疗器械厂产品；YC-DZOZ亚都超声加湿器为北京亚都科技股份有限公司产品。人工气候箱温度设定(32±2)℃,
5、相对湿度设定95%。RCR测定主要设备：PE7000全自动荧光定量PCR仪(美国PerkinElmer公司)；PE9600PCR基因扩增仪(美国PerkinElmer公司)；UNIVERSAL16R低温离心机(美国Hettich公司)；PCA-300多用垂直电泳仪(美国BIO-RAD公司)；UVmini1240紫外分光光度仪(日本SHIMADZU公司)；ABI3900台式高通量DNA合成仪(美国PerkinElmer公司)。2实验方法2.1分组SD大鼠30只,雌雄各半,分笼适应性喂养3d后,随机分为3组,即正常对
6、照组(对照组)、脾虚证组(脾虚组)、湿热证组(模型组),每组10只。2.2造模对照组正常喂饲20d；脾虚组隔日喂饲,非喂饲日灌喂番泻叶水煎液1mL/100g体重,喂饲日饲料量不限,造模20d。模型组20%蜂蜜水自由饮用,隔日灌服油脂1g/100g体重,造模开始后第16～20日每日20时～次日8时将大鼠置入人工气候箱中,造模20d。2.3标本采集处理实验结束,禁食12h后以乌拉坦腹腔注射麻醉,颈椎脱臼处死,心脏采血,剖腹,沿胃大弯侧剪开鼠胃,取胃体、胃窦组织黏膜各约0.5cm×0.5cm二块,-80℃冰箱保存。2.
7、4观察指标及检测方法观察大鼠外观、精神状态及食量、饮水量、体重、粪便,每日测大鼠体重、进食量、饮水量；
