紫草对尖锐湿疣患者皮损中bcl2、survivin及vegf表达的影响

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1、紫草对尖锐湿疣患者皮损中Bcl2、survivin及VEGF表达的影响作者：陈天雷,王丹丽,张弦,范飞翔,黄尾全【摘要】目的探讨中药紫草治疗和防止尖锐湿疣(CA)复发的机制。方法结果治疗组经紫草治疗后，CA皮损中Bcl2、survivin、VEGF的表达水平均明显低于治疗前(P<0.05)。治疗组的治愈率高于对照组(P<0.01)，复发率低于对照组(P<0.01)。结论紫草可能通过下调凋亡抑制因子Bcl2、survivin的表达，促进感染细胞凋亡，同时下调VEGF的表达，抑制疣体供血血管的增生，起到清除病毒、使疣体缩小乃至消退的作用。【关键词】尖锐湿疣;Bcl2

2、;生存素/survivin;血管内皮细胞生长因子　Abstract:ObjectiveToexplorethemechanismofdecoctionofgromentandpreventionoftherecurrenceofgenitalizedintotreatmentgroupandcontrolgroup,entgroupsskinlesionsof30patientsmunohistochemistry,thelesionsthesamesiteofthepatientsbeforeandafterthetreatmentent,theexpressionsofBcl2an

3、dsurviving,VEGFfromskinlesionsaftertreatmentententgroupentgroupislooteapoptosisof.theinfectedcells,inhibittheangiogenesisoftheaacuminatum，CA)是当今流行最广的性传播疾病之一，居性传播疾病第二位，仅次于淋病，并呈逐年升高的趋势[1]。该病传染性大，治疗后易复发，根治难度大，严重影响患者的身心健康。外用中药治疗经济、副作用小、无创伤，可较长时间大范围抑制病毒，在降低复发率方面取得较好疗效。紫草是研究较多且疗效较好的一种，现代药理研究已证实其体外具有较强的

4、杀灭人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus，HPV)作用[2]。本研究采用免疫组织化学技术，从细胞凋亡和血管生成角度观察紫草局部治疗CA前后皮损中凋亡抑制因子Bcl2、生存素(survivin)和促血管生成因子——血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgro，近1月内未接受系统治疗、2周内未接受局部治疗，无其他皮肤性病及系统性疾病。均为男性患者，年龄16～52岁，平均26.4岁。病程1周至1年不等。随机分为治疗组(紫草组)和对照组各30例，2组患者的年龄、病程、发病部位、疣体数目及大小比较差异无显著。　　1.2治疗方法　　治疗组用中药紫草煎剂浸泡外洗

5、治疗。紫草煎剂制作方法：中药紫草50g加500mL水浸泡1h后武火煮沸，然后文火煮40min，去渣取滤液。治疗前局部常规消毒、局麻，严格病理取材法取皮损标本，然后局部用紫草煎剂浸泡外洗，浸泡疣体处每天2次，每次15min,连续2周后，再同前法留取标本，标本用10%(φ)甲醛溶液固定，石蜡包埋，连续4～5μm切片。同时观察疣体情况，予电灼去除全部疣体，伤口予外涂百多邦软膏，根据创面大小适量服用少量抗生素，术后2周皮损伤口基本愈合后，再予紫草煎剂浸泡1周，每日2次，每次15min。　　对照组30例，予电灼去除疣体，伤口外涂百多邦软膏，根据创面大小适量服用少量抗生素。　　2组均随访1个月、3个

6、月、6个月，观察复发情况，复发患者按上述2组治疗方案重复治疗相关疗程。　　疗效判断标准：痊愈指疣体去除后随访6个月期间未发现原发部位或其他部位出现疣体皮损，复发指随访6个月期间无论是原发部位或是新发部位出现疣体皮损均视为CA复发[4]。　　1.3实验材料与试剂　　抗人VEGF克隆抗体(1∶100稀释)购自博士德公司，抗人Bcl2克隆抗体购自DAKO公司，抗人survivin克隆抗体及二步法PV9000试剂盒均购自中杉金桥公司。　　1.4实验方法　　免疫组织化学二步法主要过程：切片常规脱蜡水化，3%(φ)过氧化氢溶液10min阻断内源性过氧化物酶，抗原修复液于微波炉中抗原修复10min;

7、加入一抗孵育，其中VEGF、survivin37℃孵育2h，Bcl2于4℃冰箱过夜;加二抗工作液A液、B液分别37℃孵育20min;DAB显色，苏木精复染，脱水、透明、封片。每次实验用已知阳性片作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。　　1.5结果判定　　参照Kraje.　　2.2Bcl2的表达　　Bcl2阳性反应定位于胞膜及胞浆，主要是胞浆。主要表达于CA组织表皮的基底层及棘层中下层，呈灶状分布，多呈棕黄色，少数呈棕褐色(见