一种新的肿瘤标志物lygdi在卵巢癌中的表达论文

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时间:2018-11-20

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1、一种新的肿瘤标志物LyGDI在卵巢癌中的表达论文甄红英王淑玲吴后男张小为【摘要】目的确定LyGDI是一种新的卵巢恶性肿瘤标志物。方法将受试人群分为卵巢癌、良性卵巢疾病和正常人群组,ELISA技术检测各组人群血清中LyGDI的蛋白表达水平,并通过组织免疫化学技术验证lyGDI的表达。结果血清中lyGDI水平的平均值和中位数在卵巢癌患者为3.10mg/L和2.31mg/L,明显高于良性卵巢疾病人群1.10mg/L和0.97mg/L(P0.05)及正常人1.17mg/L和0.55mg/L(P0.001),良性卵巢疾病和正常人群组比较,差异无统计学意义;组织化学染色,l

2、yGDI在卵巢癌组织中高表达,在良性卵巢组织中不表达。结论lyGDI在卵巢癌中可作为一种新的肿瘤标志物。【关键词】肿瘤标志物;卵巢癌;lyGDI【Abstract】ObjectiveToverifyiflyGDIisanovelserumbiomarkerforovariancarcinoma.MethodsSerumlyGDIeasuredbyenzymelinkedimmunosorbentassayfor76healthycontrol,26patientssubsequentlydiagnosedbenignovariandisease.Intrace

3、llulardistributionoflyGDImunohistochemistryinbenignandmalignantovariandisease.ResultsSerumlyGDIlevelongovariancancercasesthanamongbenigndiseaseandhealthycontrols(P0.001).ImmunohistochemicalanalysisdemonstratedlyGDIallymphocytes,allymphocytesinbenignovariandisorders.ConclusionLyGDImay

4、displayanovelbiomarkforscreeningovariancancer.Itsdistributionintumortissueimpliesitmayplayanimportantroleincancinogenesis.【Keyorbiomark;OvarianCancer;LyGDI卵巢癌是妇科最常见的肿瘤之一.freelin,转速1500r/min于4℃离心15min,血清分装后于-70℃贮存,直至测试。卵巢肿瘤患者的组织切片固定于10%的甲醛中并石蜡包埋,HE染色用于组织学诊断。2.酶联免疫吸附(enzymelinkedimmun

5、osorbentassay,ELISA)法血清中lyGDI水平的测定采用双抗体三明治夹心法,多克隆兔抗人和羊抗人(购于SantaCruz公司)lyGDI抗体分别用作捕获和检测抗体。50μl捕获抗体(1∶400稀释于0.05M的Na2CO3包被液)用于包被96孔酶标板,4℃过夜。于室温用250μl的磷酸盐缓冲液(phosphatebuffersolution,PBS)和3%牛血清白蛋白(beefserumalbumin,BSA)封闭3h,50μl不同浓度的重组人的lyGDI蛋白加入到各孔中,室温孵育20h后,洗板3次,并将100μl检测抗体稀释(1∶500)于0.

6、05%PBST(0.05%Tine,OPD),孵育30min。最后加入100μlH2SO4.终止反应,酶标仪测定吸光值后计算浓度。所有样品为双孔平行。3.免疫组化染色:免疫组织化学染色用于评价在卵巢癌和良性卵巢肿物组织切片中lyGDI的分布。甲醛固定和石蜡包埋的5μm厚度的切片,脱蜡和水,然后用3%H2O2,和5%牛血清白蛋白处理后,加入第一抗体(1∶500多克隆兔抗人的lyGDI)于切片中,孵育1h后,PBS洗片3次,加入生物素标记的羊抗兔IgG(1∶1000);孵育30min后,加入生物素标记辣根过氧化酶孵育30min。用DAB过氧化物底物显色切片,苏木精

7、复染。4.统计学处理:将所有数据应用SPSS13.0软件进行处理,把lyGDI的数值经对数转换后,OneRNA表达水平上调及过度表达lyGDI的蛋白的结果相一致。免疫组织化学染色结果进一步确定lyGDI表达于卵巢癌细胞,但在良性疾患的卵巢上皮细胞中不表达。这些结果表明,lyGDI作为一种新的肿瘤标志物表达于卵巢癌中。本研究中良性卵巢疾病的样本数相对较少,可能与真实分布情况有误差,对于其临床应用价值需要通过扩大样本量做进一步研究。【

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