血必净对急性百草枯中毒大鼠肺病理改变的作用研究论文

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1、血必净对急性百草枯中毒大鼠肺病理改变的作用研究论文徐晓玲陈安宝胡强王刚赵群远陈嘉勇【摘要】目的通过研究血必净对急性百草枯（paraquat，PQ）中毒大鼠肺病理学改变的作用，探讨血必净对PQ中毒大鼠的肺损伤是否具有保护作用。方法取SD大鼠72只,随机分为3组：中毒组、血必净组、正常对照组。中毒组及血必净组用百草枯120mg/kg灌胃,一次性染毒；血必净组从染毒后2小时开始，腹腔内注射血必净10ml/kg，每日一次，至处死前；中毒组及正常对照组用等体积无菌生理盐水腹腔内注射，每日一次，至处死前。分3个不同时间点（6、24、72小时）处死大鼠（每

2、组每个时间点8只）并取肺组织。制备标本后分别在光镜及电镜下观察各组各时间点肺组织的病理学改变。结果中毒组大鼠肺的病理学改变为急性弥漫性肺损伤.freelacuteparaquatintoxication,andtoexploretheprotectingeffectsofXuebijinginjection.Methods72ratslydievidedinto3groups,toxicationcontrolgroup,Xuebijinggroup,negativecontrolgroup.120mg/kgparaquatinistrate

3、dforonceinbothtoxicationcontrolgroupandXuebijinggroup,10ml/kgofXuebijinginjectioninistratedonceadaytillexecution.Ratsent(8ratspertimepointpergroup)andlungtissuesamplesicroscopeandelectronmicroscopeatdifferentobservingpointrespectively.Acutediffuselunginjuryonaryalveolihemor

4、rage,effusion,inflammotorycellinfiltrationandinter-pulmonaryalveoli,.freelonaryalveolisinflammotorycellinfiltrationl。1.2方法1.2.1动物分组及百草枯中毒模型建立采用随机数字表述法,将大鼠随机分为3组,每组24只,中毒组及血必净组用百草枯120mg/kg灌胃,一次性染毒；血必净组从染毒后2小时开始，腹腔内注射血必净10ml/kg，每日一次，至处死前；中毒组及正常对照组大鼠用等体积无菌生理盐水腹腔内注射，每日一次，至处死前。

5、1.2.2标本采集与制备分别于中毒后6小时、24小时、72小时分批处死大鼠，每个时间点每组8只，摘取肺脏。用95%乙醇固定，包埋切片、行常规苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察；按电镜常规制备标本，染色，电镜下观察。2结果2.1光镜观察（HE染色）中毒组（6、24、72小时）见肺瘀血，表现为毛细血管扩张、充血；并可见肺泡腔内以中性粒细胞为主的炎性细胞的浸润。血必净组（6、24、72小时）可见局灶性肺泡隔内少量炎性细胞浸润。2.2电镜观察中毒组6小时出现Ⅰ型肺泡上皮细胞肿胀、Ⅱ型肺泡上皮细胞内板层小体减少，并可见空泡（板层小体内容物排空）；24

6、小时出现肺泡腔出血，Ⅰ型上皮细胞肿胀，Ⅱ型上皮细胞坏死；72小时出现Ⅰ型、Ⅱ型上皮细胞坏死、脱落，肺泡腔内出血,且有渗出液，并可见肺泡隔内增生的纤维组织。血必净组6、24、72小时均可见Ⅰ型上皮细胞完整，Ⅱ型上皮细胞无明显损伤，肺泡腔内无出血、渗出，肺泡隔内纤维组织增生不明显。3讨论PQ进入人体内后可引起多脏器受损，其中以肺受损最为严重，早期为急性弥漫性肺损伤，后期为肺纤维化，多数患者最终死于呼吸衰竭。近二十年来，关于PQ选择性染毒作用的主要靶器官是肺脏已被公认，但对PQ毒作用的原发靶细胞尚有不同的意见［3～5］，Smith［3］等报道PQ首

7、先直接损伤肺毛细血管和小静脉的内皮细胞。Smith［4］和Skillrud等［5］报道，PQ于染毒后3～4小时电镜下Ⅰ型上皮细胞最先出现损伤。本实验观察到：于染毒后6小时毛细血管内皮细胞损伤突出，表现为胞质小泡伸出和明显空泡形成；12～24小时，空泡增多增大，胞质电子密度消失，HRP颗粒出现在毛细血管基底膜内外，表明毛细血管通透性升高。由于毛细血管内皮细胞损伤及通透性增高，导致肺泡壁水肿，继而水肿液和大分子物质进入肺泡腔，从而揭示血-气屏障严重损伤。Ⅰ型上皮细胞对PQ也是较敏感的靶细胞，但其形态改变稍晚于内皮细胞，本实验在染毒12小时后，Ⅰ型

8、上皮细胞出现胞质水肿和空泡形成，3天后广泛退变伴部分崩解剥落。Ⅱ型上皮细胞也是PQ敏感靶细胞之一，染毒后24小时细胞线粒体肿胀，板层体空化和核质靠边。此外，肺泡巨噬