超微百草粉对大鼠高脂血症及脂肪肝的防治作用论文

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1、超微百草粉对大鼠高脂血症及脂肪肝的防治作用论文赖华文,刘亿托,张雪勇,刘颖妍,蒋琼,张敏,尤婷婷,吴铁.freell混悬液;血清TC,TG和HDL检测试剂盒(北京中生生物工程高技术有限公司),ALT,AST试剂盒(长春汇力生物技术有限公司),梅特勒-托利多AE240电子天平(梅特勒-托利多仪器公司上海分公司)。UV-3010紫外分光光度计(日本岛津)。2方法2.1动物模型的建立与分组刚断乳SD大鼠32只,雌雄各半,适应性基础饲料饲养1周后随机分为两组:正常组8只,继续基础饲料饲养(基础饲料由广东医学院动物中心提供);造模组24只,饲养给予高脂

2、饲料(基础饲料+10%猪油+0.5%胆固醇+0.3%胆酸钠+5%蛋黄+5%花生+10%三鹿全脂奶粉),至第12周末,剪尾采血测空腹血脂,TG或TC测定较正常组P0.05为高脂造模成功。剔除部分未造模成功大鼠并从造模组中随机抽取大鼠处死,取肝脏做HE染色,肝脏出现轻度脂肪变性为脂肪肝造模成功,再饲养4周后将造模成功大鼠随机平分为两组,即模型组和治疗组。治疗组给予超微百草粉水体液5ml/(kg·d)灌胃,模型组和正常组给予等体积蒸馏水灌胃。模型组和治疗组继续给予高脂饲料4周,正常组继续给予基础饲料4周。2.2血清和组织标本的采集第31天隔夜禁食以

3、3%戊巴比妥钠1ml/kg麻醉后,心脏取血处死大鼠,血液静置2h后3000r/min离心取上清液,4℃保存待检(ALT,AST,TG,TC,HDL);分离并取出肝脏,滤纸吸干肝脏水分后称重。以波氏液固定24h后,梯度酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜观察。2.3观察指标和测定方法①一般情况:每周测体重1次,观察食欲、行为、毛发等情况;②肝重和肝指数(肝湿重/体重×100);③生化指标:利用比色法测定ALT,AST的活性及TG,TC,HDL含量;④肝组织HE染色:观察肝组织脂肪变性程度。2.4统计学处理采用SPSS14.0统计

4、软件处理,各指标以±s表示。组间数据比较用t检验。3结果3.1超微百草粉对大鼠体重与肝重的影响结果见表1。表1各组大鼠体重、肝重和肝指数(略)从表1结果可见,模型组与正常组相比较,实验前体重、实验后体重和肝重均显著升高(P0.001),肝指数升高(P0.05);超微百草粉给药后,治疗组与模型组相比较,实验后大鼠体重显著降低(P0.001),肝重显著降低(P0.001),肝指数有降低,但无统计学意义。3.2超微百草粉对大鼠血脂的影响结果见表2。表2超微百草粉对大鼠血脂的影响(略)从表2结果可见,模型组与正常组比较,TC显著升高(P0.001),

5、TG无升高,HDL显著降低(P0.001);超微百草粉给药后,治疗组与模型组比较,TC显著降低(P0.001),TG有所降低,但无统计学意义,HDL显著升高(P0.001)。3.3超微百草粉对大鼠肝功能的影响结果见表3。表3超微百草粉对大鼠AST,ALT的影响(略)从表3结果可见,模型组与正常组比较,AST,ALT显著升高(P0.001),超微百草粉给药后,治疗组与模型组比较,AST,ALT显著降低(P0.001)。3.4超微百草粉对大鼠肝脏组织病理学的变化肉眼观察(见图1):正常组肝脏颜色鲜红,边缘锐利,质软;模型组肝脏明显增大,呈黄色,有

6、少量白色花斑,边缘圆钝,质脆,切面油腻;超微百草粉治疗组肝脏较正常组略大,色暗红,边缘锐利,切面有光泽。肝脏组织病理学观察:低倍镜下观察(见图2),正常组大鼠肝小叶结构正常,以中央静脉为中心呈放射状排列,肝细胞索排列正常,肝细胞内无脂滴堆积;模型对照组大鼠肝细胞结构模糊,肝细胞索紊乱,多数肝细胞内可见大量的脂滴空泡;治疗组肝小叶、肝细胞索和肝血窦结构尚清晰,细胞排列未破坏,肝细胞内有极少脂滴空泡。高倍镜下观察,正常组大鼠肝细胞正常,无水肿,无脂肪堆积;模型对照组肝细胞存在不同程度水肿和脂肪堆积,细胞核被挤压到一边。有炎症细胞浸润,部分出现点状

7、或灶性坏死;治疗组肝细胞基本正常,只有少数出现轻度水肿和脂肪堆积。4讨论本实验根据文献[1,2],以长期高脂饲料复制大鼠高脂血症及脂肪肝模型,于实验16周,剪尾取血测大鼠空腹血脂,此时大鼠血清TC显著升高(P0.001),..毕业HDL显著降低(P0.001),TG未见升高,根据本教研室以往的经验以及多次的预试验,本实验的所造的高血脂模型属血脂异常临床简易分型中的高TC型高脂血症,相当于蛋白血症分型的Ⅱa型高脂血症[3,4](Ⅱa型以LDL增高为主,Ⅱb型LDL和VLDL均增高)。取模型组大鼠肝脏作病理切片,镜下可见肝脏轻度脂肪变性,可见大小

8、不等、数量不一的脂滴空泡,胞核被挤到周边,证明脂肪肝模型复制成功。超微百草粉是我院科技开发中心研制的新配方(已获国家发明专利,专利号:ZL00101247.9),其

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