慢性哮喘小鼠egfr的表达及地塞米松对其的影响

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1、慢性哮喘小鼠EGFR的表达及地塞米松对其的影响【关键词】哮喘　　Expressionofepidermalgroamiceandtheinfluenceofdexamethasone　　【Abstract】AIM:Toinvestigatetheeffectofepidermalgroontheasthmaticairodeling.METHODS:Thechronicasthmamicemodelin(OVA)immunization.Miceethasoneof2mg/kg1hbeforethesensitiza

2、tionandsacrificedbycervicaldislocation24hafterthelastchallenge.Conventionalpathologicalslidesonaryinflammationandthethicknessofairoothmuscles.TheconcentrationofTGFαinbronchoalveolarlavagefluid(BALF)RNAexpressionofEGFRinthelungs.PulmonaryEGFRprotEinmunohistochem

3、icalstainingandER）；FLUORSTMMultimager多功能图像分析仪（BioRAD）；LeicaQ500MC图像分析系统（德国）；卵白蛋白干粉（GradeⅤ）（美国Sigma公司）；氢氧化铝（上海生物制品有限公司）；地塞米松磷酸钠注射液（天津市氨基酸公司人民制药厂）；小鼠TGFαELISA试剂盒（上海生物晶美公司）；Trizol（GibcolBRL公司）；OneStepRNAPCRKit（TaKaRa公司）；EGFRmAb（CellSignalingTechnology）；磷酸化EGFRmAb（

4、CellSignalingTechnology）.　　1．2方法　　1．2．1动物模型及分组健康BALB/C小鼠40只，随机等分为4组，每组10只，A组为正常对照组，B组为慢性哮喘组，C组为地塞米松处理组，D组为生理盐水处理组.置于相对清洁恒温环境.予以标准饲料，自由取水.参照　　2结果　　2．1慢性哮喘小鼠肺组织病理变化及地塞米松的干预哮喘小鼠可见上皮细胞破坏,支气管、血管周围大量炎细胞浸润，以嗜酸粒细胞、淋巴细胞为主，地塞米松处理组炎症减轻，生理盐水处理组无变化.图像分析显示，哮喘组小鼠气道壁、内壁、气道平滑肌层

5、均增厚；地塞米松处理组小鼠气道壁总厚度、内壁、气道平滑肌层厚度明显薄于慢性哮喘组小鼠（P<0.01,表1）,与正常对照组相比，差别无统计学意义；生理盐水处理组与慢性哮喘组相比，差别无统计学意义.表1各组小鼠气道形态学参数比较(略)　　2．2慢性哮喘小鼠肺组织EGFRmRNA,EGFR蛋白、磷酸化EGFR蛋白的表达及地塞米松对其的影响慢性哮喘小鼠肺组织EGFRmRNA,EGFR蛋白、磷酸化EGFR蛋白的表达量较正常对照组明显增加（P<0.01）；地塞米松处理组小鼠肺组织EGFRmRNA,EGFR蛋白表达与慢

6、性哮喘组比较差别无统计学意义；地塞米松处理组小鼠肺组织磷酸化EGFR蛋白的表达较慢性哮喘组下降（P<0.01，图1，2，表2）.表2各组小鼠肺组织EGFRmRNA相对量比较(略)　　2.3各组小鼠肺组织免疫组化正常对照组小鼠气道黏膜上皮细胞、气道平滑肌细胞及血管平滑肌细胞可见较弱的磷酸化EGFR表达.慢性哮喘组磷酸化EGFR阳性细胞数明显增加，主要表达于气道黏膜上皮细胞、气道平滑肌细胞及血管平滑肌细胞.地塞米松处理组阳性表达的细胞数明显低于慢性哮喘组（P<0.01,表3）.表3各组小鼠磷酸化EGFR免疫组

7、化结果（略）　　2．4慢性哮喘小鼠BALF中TGFα含量变化及地塞米松的干预慢性哮喘小鼠BALF中TGFα含量（0.764±0.065）ng/L明显高于正常对照组（0.259±0.032）ng/L（P<0.01）.地塞米松处理组小鼠BALF中TGFα含量（0.282±0.024）ng/L明显低于慢性哮喘组（P<0.01），而与正常对照组差别无统计学意义.　　3讨论　　支气管哮喘是全球范围内严重威胁公众健康的慢性疾病.通过大量病理学的研究证明，慢性气道炎症和气道重建是哮喘的两个主要病理学特征［3］，其中气道

8、重建倍受学者关注.气道重建包括支气管上皮脱落、杯状细胞肥大、基底膜增厚及黏膜下组织和平滑肌增生、肥大，与临床症状、肺功能、气道高反应性密切相关［4］,因此研究哮喘气道重建及其防治措施具有重要意义.　　气道重建的发生机制尚未完全明确，许多研究［5］均表明炎症细胞、炎症因子及可溶性生长因子等在其中发挥重要作用，但引起气道重建的各种细胞因子、炎症介质