补阳还五汤对全脑缺血模型大鼠再灌不同时点皮层神经元钙浓度的影响论文

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1、补阳还五汤对全脑缺血模型大鼠再灌不同时点皮层神经元钙浓度的影响论文关莉，丁胜元，罗铭，闫福曼，李小英，周乐全，罗荣敬【摘要】目的采用钙离子图像分析技术,研究补阳还五汤预干预对全脑缺血大鼠皮层神经元内Ca2+浓度的影响，探讨Ca2+信号异常参与缺血性神经元损伤的机制及补阳还五汤抗脑缺血的分子机制.freelessageofglobalcerebralcorticalneuronsofratsiaandreperfusionatdifferenttimepoints【Abstract】ObjectiveApplicationtheion-imageanalyticaltechn

2、iquetosimultaneouslystudytheeffectsofBuyanghuanicrats’cerebralcorticalneurons,intensivelydiscussthemechanismthattheabnormalityoftheneuronalCa2+messagejoinsintheischemicneuronalinjuryandthemolecularmechanismofcerebralanti-ischemiaethodsfortheresearchontheplexprescription.MethodsConsultedthe

3、modifiedPulsinelli’stetra-vesselocclusiontopreparetheglobalcerebralischemicrats.Therat’scerebralcorticalcellethod.AndtheCa2+concentrationofasingleneuronage-formingsystem.ResultsThepreinterventionbyBuyanghuaniaandreperfusionatalltimepointsexcept12h,andobviouslyinhibitthetulationsafterischem

4、iaandreperfusion.Itainmechanismsofthecerebralanti-ischemiaiaandreperfusionatdifferenttimepoints.ConclusionThepreinterventionbyBuyanghuanentoftheischemicneuronalinjury.【Keyiaandreperfusion;globalcerebralcorticalneurons;differenttimepoints;Ca2+concentrations脑缺血在祖国医学中属于“中风”范畴，气虚血瘀是致病的重要因素，故治则

5、应为益气活血［1］。补阳还五汤具有补气活血化瘀之功，临床用于治疗缺血性脑血管疾病及其后遗症取得了卓越的疗效，对其保护缺血性损伤机制的研究也越来越受到人们的关注［2］。在有关其作用机制的实验研究方面，补阳还五汤对缺血脑组织中Ca2+代谢的影响日益受到关注，有学者对补阳还五汤对Ca2+的可能影响作了有益的探讨［3］，但尚未见从单细胞角度研究该方对Ca2+影响的报道。本研究从单细胞和离子通道角度对本方影响缺血性损伤神经元内Ca2+代谢的机制进行深入研究，为揭示该方保护缺血性损伤的机制、指导该方的临床应用提供实验依据。中药复方是祖国医药学的重要组成部分，是中医临床用药的主要形式和手

6、段。目前从整体水平对中药复方进行研究较多见，而从细胞、分子水平对中药的研究多见于对中药单体的研究。但中药应用以复方为主，多味中药往往协同作用，且中药复方在体内代谢复杂，纯粹单体的研究并不能很好地说明复方的作用机制。因此，本研究也从细胞、分子水平对中药复方的作用机制进行深入研究，为中药复方的研究探索新的思路和方法。1材料与方法1.1实验动物健康成年SD大鼠，雌雄不限，体重200～250g，由广州中医药大学实验动物中心提供，实验动物合格证号：SCXK（粤）2003-0001，动物实验环境设施合格证号：粤检证字2003C017。1.2实验器材与药品1.2.1试剂和药物细菌蛋白酶、

7、TEA、HEPES、HBSS、EBSS，上述产品均购自Sigma公司；Fura-2购自Biotium公司。1.2.2实验器材M752－振动切片机（美国）、ZEISS正置显微镜（美国）、小型三用水箱（国产）、BS210S电子天平（国产）、PHS-3C酸度计（国产）。1.3实验方法1.3.1实验分组实验随机分为11组：（1）假手术组；（2）缺血再灌模型2h、12h、24h、48h、72h等5个时间点共5组；（3）补阳还五汤组预干预的缺血再灌模型2h、12h、24h、48h、72h等5个时间点共5组。实验前假手术组、模型