生物化学实验技术简介

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1、实验一生物化学实验技术简介第一节　实验误差与数据处理一、误差真实值与测量值之差就叫做误差，通常用准确度和精密度来评价误差的大小，测量的准确度表示测量的正确性；测量的精密度表示测量的重复性。（一）准确度：准确度是指测量值与真实值相接近的程度。测量值与真实值越接近，误差越小，准确度越高。误差可分为绝对误差和相对误差：绝对误差＝测量值－真实值×100％相对误差＝绝对误差　　　　　真实值例如：用分析天平称得两种蛋白质物质量为2.1750克和0.2175克，假定两者的真实值各为2.1751克和0.2176克，则称量的绝对误差分别为：2.1750－2.1751＝0.

2、0001（克）0.2175－0.2176＝0.0001（克）它们的相对误差应分别为：×100％＝－0.005%－0.00012.1751×100％＝－0.05%－0.00010.2176由此可见，两种蛋白值称量的绝对误差虽然相等，但当用相对误差表示时，就可以看出第一份称量的准确度比第二份的准确度大10倍，因此，测量的准确度常用相对误差表示。因为真实值是并不知道的，所以人们习惯把一个误差很小的值作为“真实值”来进行计算。（二）精密度精密度是一组测量值彼此符合的程度。精密度一般用偏差来表示。偏差是测量值与平均值之差，它分为绝对偏差和相对偏差。绝对偏差＝测量值

3、－算术平均值×100％相对偏差＝　　　　　绝对偏差　　　　　算术平均差和误差的表示方法一样，用相对偏差来表示实验的精密度比用绝对偏差更有意义。在实验中，对某一样品进行多次平行测定，可求得其算术平均值。对结果的精密度有多种表示方法，这里介绍常用的两种方法。1．平均绝对偏差和平均相对偏差表示法：例：五次测得某种蛋白质制剂的含氮量为：16.1％，15.8％，16.3％，16.2％，15.6%，用平均偏差表示。分析结果　　　　　　　算术平均值　　　　　　　绝对偏差（不计正负）16.1％　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　0.1%15.8％　　　　　　　　　

4、　　　　　　　　　　　　0.2％16.3％　　　　　　　　　16.0％　　　　　　　　0.3％16.2％　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　0.2％15.6％　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　0.4％-66-平均绝对偏差＝=0.2％　　　　　　　0.1％＋0.2％＋0.3％＋0.2％＋0.4%　　　　　　　　　　　　　　5×100%=1.25%平均相对偏差＝　　　　　　　　　0.2%　　　　　　　16.0％测定结果可用数字16.0%±0.2％表示。2．标准差法：例：六次测定血清钙含量为：9.90mg％，9.96mg％，9.94mg％，9.9

5、6mg%，9.92mg％，9.90mg％，求标准差。①首先求其算术平均值。平均值＝＝9.93mg％　　　　9.90%＋9.94%＋9.96%＋9.92%＋9.90mg％　　　　　　　　　　　　　6②求绝对偏差：d1＝9.90－9.93＝－0.03d2＝9.96－9.93＝＋0.03d3＝9.94－9.93＝＋0.01d4＝9.96－9.93＝＋0.03d5＝9.92－9.93＝－0.01d6＝9.90—9.93＝－0.03⑧求出标准差（S.D）S.D＝±　　　　　∑d2　　　　n－1n为测定次数。结果表示用“平均值±标准差”：（9.93±0.03）mg％

6、。应该指出，误差和偏差具有不同的含义。误差以真实值为标准；而偏差以平均值为标准，用平均值代替真值来计算误差，得到的结果是偏差，还应该指出，用精密度来评价分析的结果是有一定的局限性的。分析结果的精密度很高（即平均相对偏差很小）并不一定说明实验准确度也很高。如果分析过程中存在有系统误差，可能并不影响每次测得数值之间的重合程度，即不影响精密度。但此分析结果却必然偏离真实值，也就是分析的准确度并不一定很高，当然，若是精密度也不高，则无准确度可言。二、产生误差的原因和校正直接测量误差主要由下面三种原因产生：1．测量方法本身的优劣；2．测量仪器的精度；3．测量者本人

7、的习惯及熟练程度。根据以上原因，可按误差性质和来源分为三类。（一）系统误差也叫可定误差，是由确定原因引起，服从一定函数规律的误差，一般有一定的方向，即测量值总是比真值大或比真值小。常反复出现，多数情况可由对分析方法有透彻理解的人发现而清除。这种误差多因测量方法错误、仪器或试剂不合格、操作不正规等原因造成。为减少系统误差常采取下列措施：1．空白试验：在不加样品情况下，而按与样品测定完全相同的操作和完全相同的条件下进行分析，得到空白值。将样品分析的结果扣除空白值，可以得到比较准确的结果。2．回收率测定：取一定量标准物质，添加到待测的未知样品中，与待测的未知样

8、品同时做平行测定。-66-×100%测定值＝　　　　　实际测定值　　　　　　理论