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1、动物生物化学实验技术一、生物大分子的制备技术二、电泳技术三、层析技术四、基因重组技术与分子生物学鉴定技术一、生物大分子的制备技术l1.材料的选择与预处理l2.细胞的破碎l3.提取l4.分离纯化l5.浓缩l6.结晶l7.干燥l8.保存1.材料的选择与预处理l选材的原则:l含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低、注意动物的生理状态和微生物生长期之间的差异。l预处理的方法：l动物组织要先剔除结缔组织、脂肪组织等非活性部分，洗去血污等，微生物需将菌体和发酵液分离开。2.细胞的破碎l1）机械法l高速组织捣碎机、匀浆器、研磨器等l2）物理法l反复冻融法、冷热
2、交替法、超声波处理法、加压破碎法l3）化学及生物化学法l自溶法、溶菌酶法、表面活性剂（十二烷基磺酸钠、氯化十二烷基吡啶、去氧胆酸钠）l无论哪一种方法破碎细胞，均需在一定的稀盐溶液或缓冲溶液中进行3.提取theCommunistPartyofChina,andadeepunderstandingoftheparty'snature,purpose,guidingprinciples,goals,organization,goodstyle,deeplyunderstandtheconditions,rightsandobligationsofmem
3、bers,codeofconduct,bearinginmindthatoath,clearMembersofthestandardsandconditions,enhancerespect,abidebytheConstitution,maintainingthepartyConstitutionconsciousnessofthepartyConstitution.Readthroughthefamiliarwiththecodeofself-disciplineoftheCPC,theCPCdisciplinaryregulations,m
4、embersoftheCommunistPartyofChinapartyregulationsonrightsprotectionOrdinance,masteringself-disciplinestandardsof"fourmust",the"fourupholdings",masteringvarioustypesofdisciplinaryoffenceandpunishmentprovisionsandclearwhatyoucando,whattheycan'tdo.2.speechunderstandinglearningser
5、iesXIseriesthebasicspiritofanimportantspeechbyGeneralSecretary,learntounderstandthePartyCentralCommitteeongovernanceofthenewconceptofbasicelementsofnewideasandnewstrategies,masterandstrengthenthepartyspirit,fulfillsthepurposeideas,moralcharacter,conservationrelatedtothebasicr
6、equirements.LearningoftheXIseriesreadtheimportantspeechbyGeneralSecretary(2016),XIHenanworkresearchguide,GeneralSecretary'simportantspeech.Learningseriesspeech,mainunderstandmasterfollowingaspectscontent:(1)idealfaith23l提取（抽提）：指制备物与细胞固体成分或其它结合成分的分离，是由固相转入液相或从细胞内生理状态转入外界特定溶液环境
7、的过程l1）水溶液提取l2）有机溶剂提取1）水溶液提取l球状蛋白质的提取一般以水溶液为主，以盐溶液及缓冲液提取蛋白质和酶时常需注意以下几个因素：l盐浓度：常用等渗溶液，如0.02-0.05mol/L磷酸盐缓冲液、l0.15mol/L氯化钠溶液lpH值：保证蛋白质在稳定的范围内，选择在偏离等电点的两l侧，常为pH3-6。l温度：0-5°Cl其它：加入保护剂、底物、辅酶等2）有机溶剂提取l一些与脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶，常用有机溶剂提取，如丁醇提取法（pH3-10，-2~40°C）4.分离纯化l分离纯化：在抽提的基础上，去除
8、多种同类或异类物质的过程l1）盐析法l2）有机溶剂沉淀法l3）等点沉淀法l4）选择性变性法l5）吸附法l6）离心沉淀法l7）透析法l8）
