人微小病毒b19感染与kikuchi病的相关性论文

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1、人微小病毒B19感染与Kikuchi病的相关性论文【关键词】病毒RelationshipbetanparvovirusB19infectionandKikuchiFujimotodisease【Abstract】AIM:Toexploretherelationshipbetotodisease(KFD).METHODS:Tissueblocksfromlymphnodesof32idiopathicKFDpatientsandfromnormallymphnodesof13normalcontrolsmunohistochemicaltechniqu

2、esinadoubleblindmanner.Insituhybridizationandimmunohistochemicaldoublestaininginethetypeofvirusinfectedcells.RESULTS:InsituhybridizationandimmunohistochemistryrevealedthatthepositiveratesofB19DNAandviralproteinsainlylymphocytesandasmallnumberofhistocytes.CONCLUSION:Lymphnodesfr

3、omidiopathicKFDpatientshavehigherparvovirusB19infectionratesthanthosefromcontrols.ParvovirusB19infectionmayplayanimportantroleinthepathogenesisofidiopathicKFD.【Keyphadenitis;parvovirusB19;insituhybridization;immunohistochemistry【摘要】目的：研究人微小病毒B19感染与组织细胞性坏死性淋巴结炎(KFD)的相关性.方法：采用双盲法

4、在32例KFD患者及13例正常对照淋巴结活检组织中用原位杂交和免疫组织化学染色方法检测B19病毒基因组DNA和病毒蛋白.并采用原位杂交和免疫组化双标记法确定病毒感染的细胞类型.结果：在32例KFD患者淋巴结中，B19病毒DNA和病毒蛋白阳性率分别为71.9%和59.4%，而在对照淋巴结中，二者阳性率分别为30.8%和23.1%.统计学分析显示B19病毒基因组DNA和病毒蛋白在KFD中有更高感染率(P值分别为0.011和0.027).病毒感染的细胞大部分为淋巴细胞，少数组织细胞也是病毒感染的靶细胞.结论：微小病毒B19在KFD中有更高的感染率，微小病毒

5、B19与KFD的发病有密切关系.【关键词】组织细胞性坏死性淋巴结炎；微小病毒B19；原位杂交；免疫组织化学0引言组织细胞性坏死性淋巴结炎(KikuchiFujimotoDisease,KFD)由Kikuchi和Fujimoto于1970年首先报道.是一种主要累及淋巴结的自限性全身性疾病，世界各地均有报道，但以东方青年女性多见.其病理特征主要为淋巴组织散在灶片状坏死.freelAb（英国Novocastra公司）；CD68mAb（DAKO公司）；染色HistostainSAP试剂盒（北京中山分装，德国Zymed公司）；显色用NBT/BCIP（Roche

6、公司）.图1组织细胞性坏死性淋巴结炎HE×2001.2方法1.2.1探针的制备以PCR扩增所得173bp大小的B19病毒基因组DNA片段(对应于病毒基因组序列的3400～3572bp)，经测序验证后作为标记探针的模板.PCR引物依据文献［4］由上海生工生物工程合成，所用标记方法依据试剂盒说明书.1.2.2原位杂交操作方法依据说明书及文献［5］.石蜡切片经二甲苯脱蜡，逐级乙醇脱水，0.2mol/L盐酸酸化10min，0.01g/L蛋白酶K37℃消化10min.0.01mol/LPBS洗后逐级乙醇脱水，空气干燥.预杂交30min后每张切片加15μLB19

7、特异性探针，95℃变性10min，聚冷10min后于湿盒中42℃过夜.逐级2×SSC,1×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,0.1×SSC振洗.封闭缓冲液37℃封闭30min，加入碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体置37℃，3h.eyer等［1］在3例伴发于系统性红斑狼疮的KFD患者血清中发现了B19特异性抗体IgM和IgG.此后，Yufu等［2］先后在噬血细胞综合征患者血清及淋巴结活检组织中发现了B19抗体、B19基因组DNA和病毒蛋白，这些患者的淋巴结活检发现类似于KFD的特征.但都继发或伴发于其它疾病或疾病过程，并不是真正的原发性KFD.Chi

8、u等［3］用免疫组化的方法检测了10例原发性KFD患者的淋巴结活检标本，未得到阳性结果，不过他当时的研究并不