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时间:2018-10-13
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1、人微小病毒B19感染与Kikuchi病的相关性【关键词】病毒RelationshipbetanparvovirusB19infectionandKikuchiFujimotodisease【Abstract】AIM:Toexploretherelationshipbetotodisease(KFD).METHODS:Tissueblocksfromlymphnodesof32idiopathicKFDpatientsandfromnormallymphnodesof13normalcontrolsmunohistochemicaltechniquesinadoubleblindman
2、ner.Insituhybridizationandimmunohistochemicaldoublestaininginethetypeofvirusinfectedcells.RESULTS:InsituhybridizationandimmunohistochemistryrevealedthatthepositiveratesofB19DNAandviralproteinsainlylymphocytesandasmallnumberofhistocytes.CONCLUSION:LymphnodesfromidiopathicKFDpatientshavehigherpar
3、vovirusB19infectionratesthanthosefromcontrols.ParvovirusB19infectionmayplayanimportantroleinthepathogenesisofidiopathicKFD.【Keyphadenitis;parvovirusB19;insituhybridization;immunohistochemistry【摘要】目的:研究人微小病毒B19感染与组织细胞性坏死性淋巴结炎(KFD)的相关性.方法:采用双盲法在32例KFD患者及13例正常对照淋巴结活检组织中用原位杂交和免疫组织化学染色方法检测B19病毒基因组DN
4、A和病毒蛋白.并采用原位杂交和免疫组化双标记法确定病毒感染的细胞类型.结果:在32例KFD患者淋巴结中,B19病毒DNA和病毒蛋白阳性率分别为71.9%和59.4%,而在对照淋巴结中,二者阳性率分别为30.8%和23.1%.统计学分析显示B19病毒基因组DNA和病毒蛋白在KFD中有更高感染率(P值分别为0.011和0.027).病毒感染的细胞大部分为淋巴细胞,少数组织细胞也是病毒感染的靶细胞.结论:微小病毒B19在KFD中有更高的感染率,微小病毒B19与KFD的发病有密切关系.【关键词】组织细胞性坏死性淋巴结炎;微小病毒B19;原位杂交;免疫组织化学0引言组织细胞性坏死性淋巴结炎(K
5、ikuchiFujimotoDisease,KFD)由Kikuchi和Fujimoto于1970年首先报道.是一种主要累及淋巴结的自限性全身性疾病,世界各地均有报道,但以东方青年女性多见.其病理特征主要为淋巴组织散在灶片状坏死,伴有大量组织细胞浸润,易与淋巴瘤混淆,病因尚不清楚.曾有研究者发现在系统性红斑狼疮和嗜血细胞综合症伴发KFD样淋巴结改变患者中检测到人微小病毒B19[1-2],但对于B19病毒与原发性KFD的关系,仅Chiu等[3]用免疫组化的方法检测了10例KFD患者的淋巴结活检标本,但未得到阳性结果.在此,我们观察了人微小病毒B19基因组DNA及病毒衣壳蛋白在原发性KFD
6、中的表达情况,以探讨二者的关系.1材料和方法1.1材料KFD组织活检标本32(男11,女21)例于第四军医大学西京医院及唐都医院病理科,均经HE及CD68免疫化学染色并结合临床表现确诊(图1).患者年龄10~69(中位年龄25)岁.31例(97%)于颈部淋巴结;16例(50%)发病时有发热.所有患者均无皮疹、关节炎等症状,自身抗体阴性.同时,以13例乳腺癌或胃癌患者未转移的淋巴结做为标本对照.所有活检标本均经常规固定,石蜡包埋.实验过程及结果观察均采用双盲法.地高辛标记及检测试剂盒(Roche公司);TaqDNA聚合酶和dNTP(TaKaRa公司);鼠抗微小病毒B19衣壳蛋白VP1/
7、VP2mAb(英国Novocastra公司);CD68mAb(DAKO公司);染色HistostainSAP试剂盒(北京中山分装,德国Zymed公司);显色用NBT/BCIP(Roche公司).图1组织细胞性坏死性淋巴结炎HE×2001.2方法1.2.1探针的制备以PCR扩增所得173bp大小的B19病毒基因组DNA片段(对应于病毒基因组序列的3400~3572bp),经测序验证后作为标记探针的模板.PCR引物依据文献[4]由上海生工生物工程合成,所用标记
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