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《不同部位及生长年限云南红豆杉中紫杉醇含量的测定论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、不同部位及生长年限云南红豆杉中紫杉醇含量的测定论文.freel,比较云南红豆杉的树皮、针叶、小枝和树根中紫杉醇的含量,以及不同生长年限对云南红豆杉枝叶中紫杉醇含量的影响。结果云南红豆杉树皮中紫杉醇的含量最高,根中最少,小枝、针叶中含量较高；随着生长年限的增加,云南红豆杉枝叶中紫杉醇的含量逐渐增加。结论云南红豆杉枝叶的采摘以5年生以上为佳。【关键词】云南红豆杉紫杉醇高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTostudythecontentoftaxolindifferentpartsofTaxusYunnanensis
2、andtheeffectsofdifferentgroeontaxolcontent.MethodAHPLCmethodinationoftaxolcontentinbark,needle,tTaxusYunnanensi,.freele.ResultsTaxolcontentinbarkeinneedleandtneedleandtorethanfiveyearsgroe.KeyL)；固相萃取装置(美国JTBaker公司)。1.2药物药材均采自云南大理云龙县,经南方医科大学生药室鉴定为云南红豆杉(Taxusyunnanens
3、isChengetL.K.Fu)的树皮、根、枝叶。1.3试剂紫杉醇(批号100382-200203),中国药品生物制品检定所提供；甲醇、乙腈为色谱纯,水为高纯水；其余试剂均为分析纯。2方法及结果2.1色谱条件色谱柱：HypersilODS(4.6mm×150mm,5μm)；流动相：甲醇-乙腈-水(20∶30∶50)；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；检测波长：227nm；进样量：10μL。2.2对照品溶液的制备精密称取紫杉醇对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液,作为对照品贮备液。2.3线性关系考察精密量取以上
4、对照品储备液,加甲醇配成浓度为0.004、0.01、0.03、0.05、0.08、0.12、0.3mg/mL的对照品溶液。吸取上述对照品溶液各10μL,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件进行分离,测得峰面积。将峰面积对进样量进行回归,得紫杉醇的回归曲线为：Y＝2252.517X＋52.423(r＝0.9998),表明在0.04～3.0μg之间呈线性关系。2.4供试品溶液的制备供试样品自然干燥,粉碎成细粉,过60目筛,40℃减压干燥。称取药材细粉约2～4g,精密称定,置具塞三角瓶中,加入乙酸乙酯-丙酮(1∶1)30mL,25℃超
5、声提取40min,滤过,残渣再同法超声提取1次。合并上清液,减压蒸干,残渣加入石油醚(20mL×3次),超声洗涤3次,离心分离。弃去石油醚液,残渣挥干石油醚,加入氯仿(20mL×4次),超声振荡,离心分离。上清液合并,减压浓缩至干,作为待用样品。取固相萃取小柱,依次加入甲醇12mL,抽干,0.01mol/L的乙酸铵缓冲溶液12mL,抽干。将样品溶于少量80%的乙酸铵甲醇溶液中,上柱,抽干,依次用0.01mol/L的乙酸铵12mL、50%的乙酸铵甲醇溶液12mL淋洗,抽干,再加入80%的乙酸铵甲醇溶液12mL洗脱,收集洗脱液,减
6、压蒸发,残渣用甲醇溶解,定容至1mL,甲醇液经0.45μm微孔滤膜滤过,作为供试品溶液。对照品和供试品图谱见图1。2.5精密度试验取紫杉醇对照品溶液(0.0504mg/mL),重复进样5次,测得峰面积分别为1381.7362、1379.4353、1375.7966、1384.4672、1360.4456,RSD＝0.69%,表明仪器精密度良好。2.6稳定性试验取5年生枝叶供试品溶液,每隔2h进样测定1次,共5次,测得其含量分别为0.0628‰、0.0632‰、0.0637‰、0.0642‰、0.0634‰,RSD＝0.83%,
7、表明样品溶液在8h内测定稳定。2.7重复性试验取5年生枝叶5份,按“2.4”项下方法分别提取,精制,测定,含量分别为0.0634‰、0.0641‰、0.0639‰、0.0626‰、0.0613‰,RSD＝1.81%。2.8加样回收率试验精密称取5年生枝叶1g,置于100mL锥形瓶中,分别加入浓度为0.012mg/mL的紫杉醇对照品溶液5mL,按“2.4”项下方法制备供试品溶液,得5份供试品,分别对每份供试品按前述色谱条件进行测定。结果见表1。表1紫杉醇加样回收率试验结果（略）2.9样品测定分别取5年生云南红豆杉的树皮、针叶、小
8、枝和树根,按“2.4“项下方法制备供试品溶液,分别进样,测定。结果见表2。再分别取2年生、3年生、4年生、5年生云南红豆杉枝叶,按上述方法处理、测定。结果见表3。表2云南红豆杉(5年生)不同部位中紫杉醇的含量测定结果（略）表3不同生长年限云南红豆杉枝叶中紫杉醇的含量测定结果（
