川东地区南方红豆杉药用部位紫杉醇含量变化研究-论文.pdf

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1、LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2012VOL．23NO．9时珍国医国药2012年第23卷第9期川东地区南方红豆杉药用部位紫杉醇含量变化研究方应权，谢仲德，陈鸿源(重庆三峡中药研究所，重庆万州404020)摘要：目的用HPLC法考察了川东地区南方红豆杉(Taxusyunnanensis)不同部位中紫杉醇的含量，以及不同生长年限对川东地区红豆杉枝叶中紫杉醇含量的影响。方法采用HPLC法，HypersilODS2色谱柱，流动相为甲醇一水(60：40)，柱温25℃，检测波长227nm，比较南方红豆杉的树皮、针叶、

2、小枝和树根中紫杉醇的含量，以及不同生长年限对川东地区南方红豆杉枝叶中紫杉醇含量的影响，取川东地区南方红豆衫1～7年树种，分别测定其药用部分根及根皮、茎皮、小枝、叶紫杉醇的含量。结果7年、6年生和5年4年生含量无明显差异，3年以下生含量明显偏低。紫杉醇含量茎皮最高。枝叶次之，根皮最低无明显差异。结论三峡库区红豆杉药用部位紫杉醇含量分布各不相同。关键词：南方红豆杉；紫杉醇；高效液相色谱法D0I标识：doi：10．3969／j．issn．1008-0805．2012．09．055中图分类号：R284．1文献标识码：B文章编号：1008-0805(2012)09—

3、2237—02南方红豆杉Taxusmairei，又称美丽红豆杉，是松杉纲、红豆2．4供试品溶液的制备供试样品自然干燥，粉碎成细粉，过80杉科、红豆杉属的一个种。自20世纪70年代美国科学家从短叶目筛，40~C减压干燥。称取药材细粉约2—4g，精密称定，置人具红豆杉(TaxusbreoColia)树皮中提取抗癌药物——紫杉醇(Taxo1)塞三角瓶中，加乙酸乙酯一丙酮(1：1)30ml，25℃超声提取6O以来，红豆杉属植物备受人们的重视。近四十多年来一直成为世min，滤过残渣再同法超声提取2次。合并上清液，减压蒸干。残界上天然药物研究领域的热点。紫杉醇也被认为

4、是目前发现的渣加入石油醚萃取3次，超声洗涤3次，离心分离。残渣挥干石抗癌效果最好的药物⋯。南方红豆杉主要分布于我国黄河以南油醚后加入氯仿20ml，分4次萃取，超声振荡，离心分离。上清广大地区，包括广东北部、广西北部、四川西部、重庆东南部、湖北液合并，减压浓缩，作为待用样品。取固相萃取小柱，依次加入甲西部、云南东部、贵州中部和东部、安徽南部和西南部、河南西部醇12ml，抽干；0．叭mol／L的乙酸铵缓冲溶液12m1，抽干。将样(伏牛山)、陕西南部(秦岭)、浙江、福建和台湾等17个省市区。品溶于少量80％的乙酸铵甲醇溶液中，上柱，抽干，依次用一般多集中分布分布

5、在海拔800—1600m的山地或溪谷，近几0．01mol／L的乙酸铵12ml、50％的乙酸铵甲醇溶液12ml淋洗抽年在重庆三峡库区发现天然林南方红豆杉群落，三峡库区忠县、干，再加入80％的乙酸铵甲醇溶液12ml。洗脱，收集洗脱液，减丰都等海拔1500in以上的高山地区生长着野生红豆杉，由于三压蒸发，残渣用甲醇溶解，定容至1ml，甲醇液经0．45m微孑L滤峡库区特殊的地理环境，三峡库区的野生红豆杉的紫杉醇的含量膜滤过，作为供试品溶液。与其它地方南方红豆杉有所不同。2．5精密度实验取紫杉醇对照品溶液(0．0506mg／m1)，重复1仪器与材料进样6次，测得峰面

6、积分别为1381．73659，1280．4452，1．1仪器AngilentHPllO0高效液相色谱仪；LCZ1一CL4010紫1376．8065，1384．5592，1360．9456，1360．949，RSD为外检测器；KH2200E型超声仪；固相萃取小柱(GH—cleanext—0．85％，表明仪器精密度良好。SPE—C18)；固相萃取装置(美国JTBaker公司)。2．6稳定性试验取5年生枝叶供试品溶液，每隔2h进样测定1．2药物药材均采自三峡库区忠县天池农场，由三峡中药研究1次，共6次，测得其含量分别为0．0630％o、0．0629％。、0．06

7、3所付少志教授生药室鉴定为三峡库区红豆杉(Taxusyunnanensis)5％。、0．0644‰、0．0637％e、0．0638％。，RSD为0．95％，表明样品的树皮、根、枝叶。溶液在10h内测定稳定。1．3试剂紫杉醇(20100615)，中国药品生物制品检定所提供；2．7重复性实验取5年生枝叶5份，按“2．4”项下方法分别提甲醇、为色谱纯，水为高纯水；其余试剂均为分析纯。取，精制，测定，含量分别为0．06294％e，0．0652‰，0．0629‰，2方法及结果0．0619％口，0．0624％。。RSD为1．92％。2．1色谱柱HypersilOSD；

8、流动相为甲醇一水(40：60)；柱温：2．8加样回收率实验精密称取